二甲基亚砜和5-氮胞苷诱导P19细胞转化为心肌细胞的效率

目的分析二甲基亚砜(DMSO)和5-氮胞苷(5-Aza)诱导P19细胞转化为心肌细胞的效率,比较两者的区别。方法将研究对象分为3组。一组使用常规方法对P19细胞进行培养,为阴性对照组;一组使用DMSO 1.0%进行诱导;一组使用5-Aza 10μmol/L进行诱导。对所有研究对象使用RT-PCR法检测GATA-4基因相对表达量。结果 DMSO和5-Aza组诱导4 d后,细胞均以克隆集落方式增殖,梭形细胞明显增多。8 d出现自发性节律收缩的心肌样细胞。诱导后2 w,5-Aza组分化细胞明显多于DMSO组。RT-PCR法检测GATA-4基因相对表达量,除阴性对照组外,其他两组均表达心肌早期分化基因。每组15 d后表达量与本组7 d表达量相比较均明显增加。此外,5-Aza组诱导28 d基因表达量明显高于DMSO组28 d。结论 DMSO 1.0%和5-Aza 10μmol/L均可诱导P19细胞转化为心肌细胞,5-Aza 10μmol/L的诱导效率高于DMSO 1.0%。     

心理干预可缓解局麻下椎间孔镜手术患者的术前焦虑

目的探讨心理干预对局麻下椎间孔镜手术患者术前焦虑的影响。方法回顾分析2016年1月~2018年12月间使用阿姆斯特丹术前焦虑与信息量表（APAIS）进行术前焦虑评分、接受局麻经皮椎间孔镜髓核摘除术（PTED）治疗患者的临床资料。将符合纳入标准的患者根据是否接受术前心理干预分为对照组、干预组,比较两组间不同时间点APAIS评分、VAS评分、收缩压、出血量、手术时间等,分析心理干预对患者术前焦虑程度及手术的影响。结果共纳入患者128例,对照组69例,干预组59例。干预组患者准备间APAIS评分（11.83±1.49）比入院时（14.12±1.83）明显下降（P=0.000）,对照组患者准备间APAIS评分（13.77±1.59）与入院时（14.22±2.03）相比差异无统计学意义（P=0.150）。干预组患者准备间APAIS评分（11.83±1.49）低于对照组（13.77±1.59）,差异有统计学意义（P=0.000）。对照组患者准备间收缩压、术中收缩压、出血量、手术时间均高于干预组（P<0.005）。两组之间术后VAS评分、术中是否加用镇痛药物差异无统计学意义（P>0.05）。结论心理干预可以明显缓解患者术前焦虑,减少椎间孔镜手术出血量、缩短手术时间。      

P19细胞移植对急性心肌梗死后心功能的影响

目的观察P19细胞经冠脉移植对急性心肌梗死后心功能的影响。方法 P19细胞体外诱导分化为心肌细胞,RT-PCR法检测GA-TA-4基因相对表达量。22只日本大耳白兔,随机分为P19细胞移植组(n=11)和培养液对照组(n=11)。通过结扎左冠前降支建立急性心肌梗死模型。冠脉结扎后7 d,细胞移植组和对照组直接经冠脉注入P19细胞和培养液。分别于心梗前、细胞移植前、细胞移植后1 w和4 w对兔进行超声心动图检查。结果移植后4 w,P19细胞移植组在射血分数(LVEF)、左室收缩末直径(LVESD)和舒张末直径(LVEDD)方面与移植前及对照组相比均有显著改善(P<0.05)。结论经冠脉移植的P19细胞可显著改善心功能。     

血运重建术治疗高龄冠心病患者的临床体会

研究表明,冠心病患者中老年人占64%~87%,冠心病是老年人致残和致死的主要原因。本研究通过分析PCI和冠状动脉旁路移植术(CABG)治疗高龄冠心病患者的临床资料,比较其疗效差异及对患者近远期预后的影响,为高龄冠心病患者治疗及预防提供理论依据。1资料与方法选择2003年2月~2005年     

非营养性吸吮联合抚触对早产儿生长发育的影响

目的探讨非营养性吸吮联合抚触对早产儿生长发育的影响。方法将68例需经鼻胃管喂养的早产适于胎龄儿,体质量<2500g,胎龄<35周,随机分为干预组(非营养性吸吮联合抚触)及对照组(单纯予间歇鼻胃管喂养)各34例。干预组在鼻胃管喂养间歇期给予吸吮无孔橡皮奶头8～10min/次,8～10次/d。同时给予全身抚触3次/d,每次15min。对照组单纯给予鼻胃管喂养,两组不足热量给予部分肠外营养。观察胃残留,喂养不耐受情况。肠道营养达418.4kJ(kd·d)时间,恢复出生体质量时间,14d时头围,身高增长情况,平均住院日。结果干预组胃残留、喂养不耐受情况明显低于对照组,达足量肠内营养时间,平均住院日较对照组明显缩短。生后恢复出生体质量时间、头围、身高增长、干预组明显优于对照组。结论非营养吸吮联合抚触,能更好地促使胃肠激素的分泌,刺激胃肠道的生长、发育和成熟,提高经肠道喂养的耐受性,还能加快吸吮反射的成熟,加快体格生长,促进早产儿的生长发育。     

GW003对恒河猴急性辐射损伤的治疗作用

目的本研究旨在观察不同剂量重组人血清白蛋白-粒细胞集落刺激因子融合蛋白(GW003)对急性放射病恒河猴的治疗作用。方法 28只成年恒河猴分为正常对照组、照射对照组及GW003 50、150和450μg/kg治疗组共5组,后4组动物(每组6只)用60Coγ射线全身双侧一次照射3.0 Gy。GW003治疗组动物分别于照射后0和7 d皮下注射GW003 50、150和450μg/kg,所有照射动物均给予对症治疗。观察照射动物一般状况、体征、外周血细胞计数、外周血和骨髓细胞集落培养及病理组织学检查结果。结果不同剂量GW003皮下注射给药能明显升高3.0 Gy照射猴外周血白细胞、中性粒细胞和造血祖细胞数,其中GW003 150和450μg/kg剂量组提高外周血白细胞、中性粒细胞、血小板和血红蛋白最低值,缩短细胞减少持续时间的作用显著,明显加速骨髓造血功能恢复,减少输血次数。结论 GW003 150μg/kg可明显促进急性辐射损伤猴造血功能恢复,对中度骨髓型急性放射病有明显的治疗作用。     

ECSOD体外转染恒河猴骨髓间充质干细胞的实验研究

本研究旨在探讨载带超氧化物歧化酶基因的腺病毒（AD-ECSOD）感染恒河猴骨髓间充质干细胞（R-BMMSC）生物学特性的影响。用含有ECSOD和报告基因EGFP的腺病毒感染经梯度密度离心和贴壁培养法分离、培养并纯化的R-BMMSC,用倒置荧光显微镜及流式细胞仪观察检测感染效率,ELISA法检测细胞培养上清中的ECSOD蛋白表达水平;流式细胞仪检测感染后R-BMMSC的表面抗原（CD34,CD29,CD45,CD90,mA-DR）;油红0和茜素红染色观察R-BMMSC的成骨及成脂诱导分化能力;MTT法检测AD-ECSOD转染对R-BMMSC增殖能力的影响。结果表明,不同滴度AD-ECSOD（感染滴度为每个细胞500,1000,1500和2000pfu）对R-BMMSC的感染效率均〉95％。转染后24h即可在细胞上清液中检测到ECSOD蛋白表达,且明显高于对照组（P〈0．01）,转染后48h蛋白表达量最高。AD-ECSOD转染后R-BMMSC的增殖能力及其表面抗原表达和多向分化能力与未转染组比较无统计荤差异fP〉0．05、．结论：AD-ECSOD能够高效转染R-BMMSC．对萁生物荤特性无明显影响．     

rhIL-12对恒河猴造血系统辐射防护作用的初步研究

摘要本研究旨在初步观察重组人白介素-12（rhIL-12）对急性辐射损伤猴造血系统的防护和治疗作用,为同类型病人的临床救治提供实验依据。在体外实验中,观察了不同浓度rhIL-12（0、1、5、25、125和625ng/ml）对来自人和健康成年猴骨髓造血祖细胞集落形成能力的影响。在体内实验中,用11只经3．0Gy全身照射后90d活存猴再经致死剂量^60Coγ（6．0Gy）射线全身1次照射以建立重度骨髓型急性放射病动物模型。模型动物被随机分为照射对照组（n=4）、单次给药组（n=3）和分次给药组（n=4）。单次给药组于照射后2h皮下注射rhIL-124μg／kg,分次给药组分别于照射后2h和3、6、9d皮下注射rhIL-121μg/kg,对照组于皮下注射同样体积的PBS。观察照射后动物活存情况和外周血象变化。体外培养结果显示,不同浓度rhIL-12可明显促进正常猴和人骨髓单个核细胞形成各系造血祖细胞集落,特别是CFU-E和CFU-GM最为明显。照射对照组动物于照射后22d内全部死亡,死亡动物平均活存时间为（20．3±1．2）d;rhIL-12单次给药组3只动物全部存活,rhIL-12分次给药组1只动物于照射后17d因贫血死亡。与对照组比较,rhIL-12治疗能明显提高动物存活（P=0．018）,并促进外周血白细胞数、血红蛋白水平、血小板以及网织红细胞数的恢复（P〈0．05）。结论：rhIL-12可明显促进灵长类骨髓造血祖细胞体外集落形成,并明显促进重度骨髓型急性放射病猴的造血功能恢复,提高动物存活率。