血管紧张素Ⅰ转换酶基因多态性与2型糖尿病心血管并发症关联研究

背景糖尿病晚期并发症的发生与遗传因素有关.有报道血管紧张素Ⅰ转换酶(angiotensin Ⅰ-converting enzyme,ACE)基因是糖尿病心血管并发症发生的风险因子.目的探讨ACE基因多态性与2型糖尿病心血管并发症之间的相关性.设计以2型糖尿病患者为研究对象的病例-对照研究.单位一所医学院的生物科学系普通生物学教研室.对象本研究于2001-02/2002-06在华北煤炭医学院分子生物学实验室完成.研究对象均为本医学院附属医院门诊及住院2型糖尿病患者,根据是否合并心肌梗死分为两组.心肌梗死患者组68例,其中男29例,女39例,年龄(65±3)岁;非心肌梗死组190例,其中男161例,女29例,年龄(60±1)岁.纳入标准均符合1985年WHO 2型糖尿病诊断标准,心肌梗死诊断根据MRI确诊;排除标准资料不完整或不合作者.方法按常规酚/氯仿法提取基因组DNA,扩增产物用20 mL/L琼脂糖凝胶电泳分析,溴化乙锭染色观察结果.对不同患者组等位基因和基因型频率进行比较.主要观察指标两组患者ACE基因的等位基因和基因型分布比较.结果2型糖尿病心肌梗死患者(64.7%)与非心肌梗死患者(55.0%)比较,DD纯合子频率显著增高(41.2%vs33.2%),差异具有显著性意义(x2=0.833,P＜0.05),D等位基因频率也显著增高,差异也具有显著性意义(x2=3.8491,P＜0.05).结论D等位基因和DD基因型是2型糖尿病心肌梗死发生的风险因子,这些指标的监测为糖尿病心肌梗死患者的二级康复预防和提高远期生活质量提供理论参考.     

酵母双杂交技术在病原生物蛋白质研究中的应用

酵母双杂交技术在蛋白质的研究中有着重要的、不可替代的位置。在基因组蛋白质连锁图的建立、药物及其作用位点、抗原抗体反应、细菌、病毒、寄生虫等领域的研究也有广泛的应用。随着科学技术的发展,酵母双杂交技术的不断改进和完善,其应用必将大有前景。     

蓝氏贾第鞭毛虫α-19贾第素的单克隆抗体制备与亚细胞定位研究

目的 制备蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)α-19贾第素的特异性抗体,并通过免疫荧光对该贾第素的亚细胞定位进行鉴定。方法 经PCR获得α-19贾第素编码区片段,双酶切将目的 片段连入原核表达载体pET-28a(+)-α-19,重组载体转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE及 Western blot验证表达情况;采用设计的合成抗原肽免疫小鼠经细胞融合和筛选制备特异性单克隆抗体,分别用贾第虫滋养体裂解物和α-19贾第素重组蛋白Western blot验证抗体特异性和结合力,选择特异性最好的单克隆抗体通过免疫荧光技术对α-19贾第素的亚细胞定位进行观察。结果 成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-19,经SDS-PAGE及 Westernblot分析显示重组载体在大肠杆菌中表达出相对分子量约49 kD的重组蛋白,与理论值相符;Western blot显示单克隆杂交瘤细胞株α-19-3-7-3-5分泌的抗体结合力和特异性俱佳,可用于定位研究;免疫荧光定位结果表明α-19贾第素主要位于贾第虫滋养体的腹鞭毛。结论 制备了α-19贾第素的特异性单克隆抗体,免疫荧光显示α-19贾第素定位于贾第虫滋养体的腹鞭毛。     

"互动式"教学方法在《护理伦理学》教学中的运用

[目的]探讨《护理伦理学》课程的最优教学方法。[方法]对我系开设的《护理伦理学》课程逐年增加学生讲课的学时数,学生的参与人数逐年增多到全部参与,学生讲课形式多种多样。[结果]86.4%的学生感到从互动课中受益,其能力提高是多方面的。[结论]“互动式”教学可提高学生的综合能力。     

带绦虫精母细胞发生的超微结构观察

目的：在超微结构水平研究带绦虫精母细胞的发生。方法：透射电镜。结果：本文对猪带绦虫，牛带绦虫，及豆状带绦虫的精母细胞的发生进行了ＴＥＭ观察，结果精母细胞的发生（ｓｐｅｒｍａｔｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓｉｓ）可分辨出两种精原细胞：Ａ型和Ｂ型，以及包绕其周围的支持细胞。Ａ型精原细胞为干细胞。Ｂ型为母细胞。Ｂ型精原细胞经４次无细胞分离的有丝分裂，形成１６个初级精母细胞，其特点为胞质中存在核糖体团。初级精母细胞经减数分裂产生３２个次级精母细胞，排列成玫瑰花团样。次级精母细胞经短暂的发育过程很快形成精细胞。结论：带绦虫精原细胞的分裂方式为无细胞分离的有丝分裂。     

女性乳房自我检查情况调查

目的 调查女性乳房自检情况及影响因素。对唐山市20岁以上的非乳腺癌患者、非医务工作者的知识女性、普通女工、农村妇女963名。方法 采用分层抽样,利用自行设计的问卷进行资料收集,原始数据用SPSS统计软件进行录入与分析,立要的统计方法为一般性描述、X~2检验。结果 只有7.79％的妇女经常定期做乳房自检,61.79％的妇女不做;不做的主要原因是不知道怎么做及不知道需要做;知识女性做乳房自检的比例高于普通女工和农村妇女。结论 妇女做乳房自检情况与其对乳腺癌的相关知识的了解程度呈正相关;妇女对乳房自检的重要性的认识急待提高,且应掌握乳房自检的正确方法。     

离退休老年人抑郁状况及其相关因素与社区护理

目的　探讨离退休老年人抑郁症患病情况及相关因素。方法　采用老年抑郁量表 (GDS)和个人一般情况问卷 ,根据分层抽样方法 ,在唐山市约 8万名离退休老年人中 ,抽取 1 0 0 0名进行调查。结果　离退休老年人轻度抑郁占 1 7 2 % ,中、重度抑郁占 5 % ,其中退休、女性、文化程度低、缺乏社会支持、生活不充实、缺乏锻炼 ,健康自评差等因素与抑郁发生关系密切。结论　离退休老年人抑郁症患病率较高 ,在社区护理工作中要重视对离退休老年人的精神保健 ,特别是对离婚、丧偶、女性、文化程度低、退休者要格外关注。     

PBL教学法在《护理心理学》课程中的应用

目的探索PBL教学法在护理心理学教学中的效果。方法选择2004级3个护理本科班，145人，针对常见的心理问题，采用设问-讨论-选题-讲课-总结的方法。并对教学效果进行评估，分析和讨论PBL教学的优势和存在的问题。结果PBL护理心理学教学改变了传统的“以授课为基础（LBL）”的单向教学模式，激发了学生主动学习的积极性，培养了质疑和创新思维能力、分析和解决问题的能力，增强了团队合作精神，锻炼了人际沟通及表达能力，创造了师生平等、和谐的学习氛围，收到良好效果，认为各种能力提高者均在90％以上。结论PBL教学法应用在护理心理学教学中，提高了护生的主动学习积极性，培养了护生自主学习和创新精神。     

C2株蓝氏贾第鞭毛虫SUMO特异性蛋白酶基因的克隆、生物信息学分析及其催化活性区的原核表达

目的 克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的SUMO-Specific Protease(SENP)基因,并对其序列进行生物信息学分析,原核表达贾第虫SENP的催化活性区。方法 提取C2株贾第虫基因组DNA,以基因组DNA为模板获得SENP编码区全长片段,连入克隆载体pGM-T,测序后进行生物信息学分析;根据分析结果克隆SENP的催化活性区,构建其原核表达载体pET-28a(+)-SENPc,在E.coli Rosetta(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE及Western blot观察表达结果。结果 成功克隆了C2株贾第虫SENP编码区全长序列,生物信息学分析显示C2株贾第虫SENP蛋白序列与WB株相同,二级结构以无规则卷曲为主,其催化活性区位于126-497aa,被一段插入序列分割成两个部分;构建了SENP催化活性区原核表达载体并在大肠杆菌中高效表达,在相对分子量约43 kD的位置出现目的 蛋白条带,与理论值相符。结论 成功克隆了贾第虫SENP基因并原核表达了其催化活性区,为贾第虫SENP蛋白功能的研究提供了基础。