基因捕获联合高通量测序技术在甲基丙二酸血症诊断中的应用

目的 探讨新一代基因测序平台(HiSeq2000)在甲基丙二酸血症(MMA)诊断中的价值.方法 1.采集已经临床确诊的9例MMA患儿外周血并提取DNA,将设计好的基因捕获探针与患儿DNA文库混合,然后利用基因捕获联合高通量测序分析技术对有机酸代谢相关的48个基因全部外显子区域进行测序.2.获得原始数据,去除接头和过滤低质量数据,对数据进行SNP、InDel等分析,并采用Sanger测序方法对异常位点进行测序验证.3.气相色谱-质谱联用分析技术对尿液标本的有机酸测定及其他辅助检查.结果 1.突变基因:7例存在MMACHC基因突变,7例患儿中共检测出7种突变,包括c.482G＞A、c.567_568insT、c.609G＞A、c.440_ 441del、c.80A＞G、c.315C＞G、c.90G＞A,其中c.440_441 del为未见报道突变;1例存在甲基丙二酰辅酶A变位酶(MUT)基因突变,均为内含子异常,分别是c.754-1G＞C、c.1677-1G＞A,其中c.754-1G＞C为未见报道突变;1例未检测到突变.2.临床症状:9例患儿均存在智力运动发育迟缓,伴抽搐3例,反复顽固性代谢性酸中毒、头痛及面瘫、反复性溶血各1例.脑电图异常9例,头颅磁共振异常8例,尿液中甲基丙二酸水平均升高(273.4 ～146 022.8倍),血同型半胱氨酸水平增高8例(27.13～ 396.84 μmol/L,正常＜20 μmol/L).3.Sanger测序验证:均符合新一代测序平台结果,无假阳性存在.结论 1.进一步证明c.609G＞A突变位点为中国MMA合并同型半胱氨酸血症患儿的热点突变位点.MMA基因突变类型较多,与临床症状无明显相关性.2.推测MMACHC基因c.440_441 del突变及MUT基因c.754-1G＞C突变为新发突变.3.基因捕获联合高通量基因测序技术一次性捕获突变基因数量大,获取疾病的遗传信息量广,具有高通量、高灵敏度、高效等特点,适合于MMA患儿检测,也可为其他儿科临床常见遗传性疾病的检测提供参考.     

不同年龄组儿童急性偏瘫伴随症状与病因的关系

目的 探讨儿童不同年龄组急性偏瘫伴随症状和病因的关系。方法 对2007-2009年本院收治的31例急性偏瘫患儿的临床资料进行回顾性分析。结果 31例患儿中，＜1岁5例，＞1～3岁12例，＞3～6岁儿童4例，＞6岁年长儿10例。主要伴随症状：惊厥21例、发热12例、意识障碍10例。急性偏瘫的主要病因：①脑血管病10例：其中脑血管畸形4例（幼儿3例、学龄儿1例）、外伤性脑梗死2例（学龄前）、合并先天性代谢缺陷病（同型半胱氨酸血症）2例；②中枢神经系统感染9例（<1岁4例）；③先天代谢性缺陷病5例（均为年长儿）；④偏侧惊厥偏瘫综合征/偏侧惊厥偏瘫癫痫综合征（hemiconvulsion-hemiplegia/hemiconvulsion-hemiplegia-epilepsy syndrome，HH/HHE）4例；交替性偏瘫2例；⑤其他：维生素K1缺乏性颅内出血、急性播散性脑脊髓炎和脑干肿瘤各1例。结论 ①小儿急性偏瘫病因繁多，各年龄段均有发病，其中1～3岁所占比例最大；②偏瘫主要伴随症状有惊厥、发热、意识障碍；伴随症状不同其病因各异；③婴幼儿主要病因是中枢神经系统感染，幼儿和学龄前期儿童中外伤性脑梗死和脑血管畸形并不少见；先天性代谢缺陷病是年长儿偏瘫的病因之一。     

基于职业岗位的高职药学人才培养方案的课程构建

目的通过调研药学专业毕业生的职业岗位任务,探索高职药学人才培养方案。方法调研高职药学生的就业岗位,分析执行工作任务时所必须具备的专业知识、能力和素质,制定以职业岗位导向的人才培养方案。结果结合职业岗位制定实用性人才培养方案。结论制定切合职业岗位的人才培养方案,更好地提高高职药学专业人才培养质量。     

1～14岁正常儿童胫后神经体感诱发电位正常值及其特点

目的：探讨正常儿童胫后神经（PTN）体感诱发电位（SEP）的特点及正常值。方法：对121名正常儿童进行PTN—SEP检测,分析各波的特点及各波参数随年龄变化规律。结果：PTN—SEP随年龄增长,波幅增高,使波容易辨认,波幅在个体问变异较大。左右双侧对应波的潜伏期（PL）和峰间期（IPL）比较差异无显著意义（P〉0．05）,各组男女间PL和IPL无性别差异（P〉0．05）。外周神经电位的腰髓电位（LP）、马尾电位（cE）、胭窝电位（PF）等3个波的潜伏期随年龄增长PI。延长,而P40和N45等皮层电位的PL在8岁前变化则不明显（相邻组间P〉0．05）,8岁后延长明显。PF-T12的IPL也随年龄增长而延长（相邻组间P〈0．05）;而T12-P40IPL3岁组较1岁组延长,但差异不明显,以后随年龄增长而缩短,6岁组达成人值。结论：儿童PTN—SEP的正常值按年龄组划分是完全必要的。由于各波PL受身长的影响大,因此绝对PL不宜作为PTN—SEP的异常标准。PTNSEP是评价小儿躯体感觉通路、脊髓、脑干和大脑功能的客观指标,具有较大的临床实用价值。     

血管紧张素Ⅱ和转移生长因子β1在二肾一夹高血压大鼠血管重构中的作用

目的　探讨二肾一夹高血压大鼠 ( 2 K1Ca- HR)血管重构中 Ang 、TGFβ1的作用机制。方法　动物分为实验组、对照组、治疗组 ,观察循环、组织 Ang 含量、肠系膜阻力动脉 TGFβ1 表达及对 enalapril的反应。结果　术后 2周实验组血管 Ang 明显增高 ( P<0 .0 1)持续至 12周 ,血浆 Ang 也显著升高并持续至 8周 ,但呈下降趋势 ,术后12周与术后 2周发生显著差异 ( P<0 .0 1)。实验组从 2周开始出现血管重构以后进行性加重。对照组血管组织无TGFβ1 表达 ,实验组各时相点肠系膜阻力动脉中层 VSMCs TGFβ1 表达阳性。 enalapril可降低循环、血管 Ang 至对照组水平 ,治疗组无血管形态改变 TGFβ1 表达阴性。结论　 TGFβ1 在 2 K 1C- HR血管重构中发挥作用 ,其表达活化与血管组织 Ang 的升高关系密切。enalapril具防止血管重构的血管保护作用 ,可能与其抑制了 Ang 升高、TGFβ1 表达有关     

儿童病毒性脑炎的临床特征研究

目的：总结儿童病毒性脑炎的临床特征、实验室检查和辅助检查的特点,探讨儿童病毒性脑炎的早期诊断方法及治疗方法。方法回顾性分析我院神经科2012-01-2013-06收治的30例病毒性脑炎患儿的临床资料、实验室检查及辅助检查结果。结果30例患儿以发热、意识障碍、头痛、呕吐为主要临床表现,其中发热27例（90.0％）,意识障碍22例（73.3％）,昏迷1例,头痛22例（73.3％）,呕吐21例（70.0％）;阳性12例（40.0％）,颈抵抗可疑阳性5例（16.7％）;双侧巴宾斯基征阳性12例（40.0％）,单侧巴宾斯基征阳性3例（10.0％）;布鲁津斯征均为阴性;2例（6.7％）凯尔尼格征阳性;血液肠道病毒学检查（柯萨奇、埃科病毒及EB病毒抗体IgM、IgG）,抗体[IgM 和（或）IgG]均为阳性,但脑脊液病毒学抗原检查仅7例阳性;脑电图（EEG ）和磁共振成像（M RI）检查,7例（23.3％）EEG异常,2例（6.7％）M RI异常。经抗病毒、降颅压等治疗,随访6～12个月,1例昏迷,1例小脑共济失调,余28例完全康复,未见后遗症。结论儿童病毒性脑炎多数发病较急,临床表现多样,以发热、意识障碍、头痛、呕吐为主,血液中病毒抗体阳性率高,但脑脊液病原学阳性率较低。对症治疗后大部分预后良好。     

维生素B12反应型甲基丙二酸血症患儿的脑干听觉诱发电位改变

目的 总结维生素B12反应型甲基丙二酸血症(methylmalonic acidemia,MMA)患几脑干听觉诱发电位的(BAEP)特点.方法 选择已确诊的MMA患儿15例进行BAEP检查.并对长期随诊的9例MMA患儿进行了治疗后复查.结果 ①维生素B12反应型MMA患儿BAEP异常检出率是53%.②BAEP异常主要为:I波潜伏期延长3例;听阈升高1例;Ⅰ-Ⅲ IPL、Ⅲ-Ⅴ IPL延长各3例.③维生素B12反应型甲基丙二酸血症患儿诱发电位异常改变可随病情的好转而改善或转为正常.结论 甲基丙二酸血症患儿存在脑干听觉诱发电位异常,脑干听觉诱发电位检测可反映甲基丙二酸血症患儿神经系统传导功能异常,并可用于病情监测.     

小儿病毒性心肌炎11问

人们对常见的呼吸道疾病(小儿上呼吸道感染、支气管肺炎)及消化系统的疾病(小儿肠炎)等均较熟悉,但对近年来发病率有所上升的小儿病毒性心肌炎可能认识不足。现就有关问题做一简略解答,供参考。 1.什么是小儿病毒性心肌炎? 人体心脏是推动血液循环、以保证人体组织血液供应的主要器官。病毒性心肌炎是病毒感染的同时或病毒感染1～3周以后造成心肌局灶或弥漫性间质和     

胃肠减压的护理体会

胃肠减压是利用留置胃管与负压吸引器，将积存于胃肠道的气体和内容物抽出，减低胃肠道的膨胀和压力，改善胃肠管壁的血渡循环，使其恢复功能的一种方法。现将86例胃肠减压护理体会报告如下。     

线粒体脑肌病所致昏迷的临床特点

昏迷是儿童神经系统疾病中的重症之一,病因复杂.常见病因有:中枢神经系统感染、颅内出血(头颅外伤、脑血管畸形、血友病、维生素K1缺乏)、中毒、糖尿病酮症酸中毒等.近年来,随着医疗技术在临床上的应用,由遗传代谢性疾病(有机酸血症、线粒体脑肌病等)所致昏迷也逐步被认识,为挽救患儿生命,做好先证者家庭的遗传咨询有重要的意义.