康氏抗纤方治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床研究

目的观察康氏抗纤方治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床疗效,探讨其对肝组织N-花生四烯酸氨基乙醇(arachidonoylethanolamine,AEA)、2-花生四烯酸甘油(2-arachidonoylglycerol,2-AG)、大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,CBR1)mRNA、大麻素受体2(cannabinoid receptor 1,CBR2)mRNA含量变化的影响。方法将110例慢性乙型肝炎肝纤维化患者按随机数字表法分为治疗组和对照组,每组55例。治疗组予中药康氏抗纤方联合恩替卡韦分散片治疗,对照组用恩替卡韦分散片单药治疗,两组均治疗48周。判定两组临床疗效,检测血清ALT水平,HBV DNA、HBsAg、HBs Ab定量,肝组织病理、肝硬度变化,肝组织AEA、2-AG含量和CBR1、CBR2 mRNA表达水平。结果与对照组比较,治疗组的临床总有效率、HBsAg阴转率、肝组织纤维化分期疗效有效率均高于对照组(χ2=4.453,4.152,6.364,均P0.05)。与本组治疗前比较,治疗后两组患者肝纤维化瞬时弹性测定值、AEA、2-AG含量及CBR1、CBR2 mRNA表达均降低(均P0.05),且治疗组降低更明显(均P0.05)。肝组织病理显示:治疗后治疗组肝小叶结构基本完整,肝细胞轻度水样变性,汇管区纤维组织无增生,局部少量淋巴细胞浸润,炎症及纤维化较对照组明显改善。结论康氏抗纤方具有提高慢性乙型肝炎肝纤维化患者的临床总有效率、HBsAg阴转率、肝组织纤维化分期疗效有效率,其作用机制可能与调节内源性大麻素系统有关。     

脑梗死患者外周血CD34+细胞水平和预后价值

Objective To detect the alteration of circulating CD34 + cell level in patients with the In'st-ever nonlacunar stroke and to investigate the prognostic value of CD34 +cell level. Methods 1he level of the circulating CD34+ cells were examined using flow eytometry in 119 patients with nonlacunar infarction. 1he patients were divided into group A (higher than average) and group B (lower than average) according to the detected values, The National Institutes of Health Stroke Scale (NIHSS) scores on admission and the modified Rankin Scale (mRS) scores at 3 months after the onset in the two groups wre compared. Results The level of CD34 + cells in group A was significantly higher than that in group B (0. 048 ± 0. 001 versus 0. 032 ± 0. 002, P < 0. 05 ), however, there was no significantly difference in NIHSS sores between the two groups. One week after admission, the increased level of CD34 + cells in group A was significantly higher than that in group B (0. 001 ±0. 003 versus - 0. 005 ± 0. 000, P < 0. 05 ). Three months after the onset of symptoms, the average mRS score in group A was significantly superior to that in group B (2. 98 ± 1.14 versus 3.25 ± 1.39, P <0. 05). 1he level of circulating CD34 + cells at the initial onset of symptom was negatively correlated with the mRS score at 3 months after stroke (r = -0. 48, P <0. 05). Conclusions The higher level of circulating CD34+ cells had better prognosis in patients with cerebral infarction. The level of circulating CD34+ ceils may be used as a prognostic indicator in patients with cerebral infarction.     

内皮祖细胞的转化与扩增研究进展

内皮祖细胞移植有可能成为治疗缺血性脑血管病的新策略。内皮祖细胞数量有限成为限制其治疗应用的主要障碍。如何在一定条件下有效扩增内皮祖细胞或将其他组织来源的细胞转化为内皮祖细胞具有十分重要的意义。近年来已发现一些药物、其他组织来源的细胞以及某些大分子物质对增加内皮祖细胞数量有着积极的作用。     

早期诊断肾损伤试剂(NAG)的临床应用

肾病多少年来一直困扰着人们，是人类身体健康的一大天敌，在检验技术方面传统的肾功能测定包括血肌酐、尿素氮、尿蛋白等测定。这些方法存在着诊断不及时，结果指征不灵敏等缺点，现我室介绍一种早期肾损伤诊断试剂NAG(N-乙酰-β-D氨基葡萄糖甘酶)它是一种细胞内溶酶体酶，以肾近曲小管含量最高，尿、血清和唾液中NAG活性变化与机体某些病理状态密切相关。     

山茱萸萜类甲羟戊酸合成途径关键酶CoHMGS基因的克隆与分析

目的克隆得到山茱萸Cornusofficinalis萜类合成途径的关键酶CoHMGS基因的cDNA序列,并进行相应的生物信息学分析,为深入研究CoHMGS基因的功能奠定基础。方法以山茱萸转录组筛选出的c102453_g2序列为参考序列设计特异引物,以山茱萸叶片总RNA,通过RT-PCR扩增获得CoHMGS基因序列,序列纯化回收后连接到pTOPO-T载体上,转化至大肠杆菌DH10B,选取阳性克隆测序。利用生物信息学软件预测CoHMGS基因及其编码蛋白质的功能。结果克隆得到长度为1645 bp的CoHMGS序列,包含1413 bp的完整开放阅读框,编码470个氨基酸。蛋白整体带负电荷,为不稳定亲水性蛋白,定位于细胞质内,不含跨膜结构。结论首次克隆得到山茱萸CoHMGS基因,对其编码蛋白质进行了初步的分析和预测,为深入揭示CoHMGS基因在山茱萸萜类物质合成途径中的功能奠定了基础。     

栀子苷改善大鼠非酒精性脂肪性肝病游离脂肪酸代谢的机制研究

观察栀子苷改善非酒精性脂肪性肝病的效果,从游离脂肪酸探讨栀子苷调节非酒精性脂肪性肝病的作用机制。健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组:正常组、模型组、栀子苷组和血脂康组,每组大鼠10只,正常组大鼠给予正常大鼠饲料喂养,其余3组大鼠均采用高脂饲料喂养以诱导非酒精性脂肪性肝病,造模时间为8周,从第5周起至第8周末,栀子苷组和血脂康组分别灌服相应的药物。记录大鼠体重、肝湿重、脂肪质量;用相应方法检测肝组织TG,FFA,FAS,AMPK,ACCase及Malonyl-Co A含量,血清CHO,LDL-C的含量,血清AST,ALT的活性;观察肝脏组织肉眼及病理变化(HE染色法)。结果显示,与正常组相比,模型组大鼠的体重;肝湿重;脂肪重;血清CHO,LDL-C,ALT,AST;肝组织TG,FFA,FAS,ACCase及Malonyl-Co A含量皆显著升高(P0.01);肝组织AMPK活性显著降低(P0.01),肝组织肉眼外观及病理切片脂肪变性明显,并出现炎症损伤;与模型组相比,栀子苷组大鼠体重、脂肪质量、肝组织FFA含量、血清ALT,AST活性均显著降低(P0.01),肝湿重,肝组织TG,FAS,ACCase及Malonyl-Co A含量明显降低(P0.05),肝组织AMPK活性明显增多(P0.05),肝脏肉眼外观及病理学表现均有所改善;与模型组相比,血脂康组大鼠的肝湿重、脂肪质量、肝组织TG,FFA和血清LDL-C水平明显降低(P0.05);与血脂康组相比,栀子苷组大鼠的体重、脂肪质量、肝组织FFA含量均显著降低(P0.01),其他方面无明显差异。结果表明,栀子苷具有显著的改善高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病的药理效应;其改善大鼠非酒精性脂肪性肝病的游离脂肪酸代谢是通过调节"AMPK-ACCase-Malonyl-Co A-FFA"轴来实现的。     

肌钙蛋白T与肿瘤坏死因子α对脑梗死诊断与预后判断的临床价值

目的 评价肌钙蛋白T(cTnT)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)联合检测对脑梗死诊断与预后判定的临床价值。方法 纳入2011年2月~2015年2月我院诊断为脑梗死的患者168例为研究对象(研究组),根据中国脑卒中临床神经功能缺损程度评分量表评分再分为3个亚组:轻型组34例、中型组68例和重型组66例; 对照组为同期来我院进行健康体检的正常人66例。比较对照组与研究组入院时的血压、血脂、cTnT及TNF-α水平; 同时比较轻型组、中型组和重型组发病后24h、发病第5d的cTnT及TNF-α水平。结果 1对照组与研究组入院时收缩压、舒张压、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白比较,差异无统计学意义(t为0.67、0.22、0.14、0.05和0.63,均P>0.05)。2对照组与研究组cTnT及TNF-α水平差异有统计学意义(t分别为6.34、6.59,均P<0.05)。3发病后24h轻型组、中型组与重型组间cTnT及TNF-α水平比较有差异(F分别为8.56、6.98,均P<0.05); 发病后第5d轻型组、中型组与重型组间cTnT及TNF-α水平亦有差异(F分别为7.36、6.25,均P<0.05)。发病后第5d轻型组、中型组和重型组cTnT较发病24h时均有明显下降,差异有统计学意义(t分别为5.82、7.25、6.21,均P<0.05),发病后第5d轻型组、中型组和重型组TNF-α较发病24h时有明显下降,差异亦有统计学意义(t分别为7.01、6.93、8.43,均P<0.05)。结论 脑梗死患者血清cTnT和TNF-α明显高于健康正常人群,而且随着疾病治疗的好转,cTnT和TNF-α呈逐步下降趋势。因此,cTnT与TNF-α联合检测对脑梗死的诊断与预后判断具有重要的临床意义。     

系统性硬皮病CD4~+ T细胞中CD70 mRNA及蛋白表达水平的观察

目的:研究系统性硬皮病(SSc)患者外周血CD4+ T细胞中CD70的表达水平。方法:应用密度梯度离心法分离17例SSc患者(女性12例,男性5例)和13例对照者(女性8例,男性5例)的外周血单个核细胞,磁珠分选CD4+ T细胞。RT-PCR检测CD4+ T细胞中CD70 mRNA的表达水平;流式细胞术检测CD70蛋白在CD4+ T细胞的表达水平。结果:与对照组相比,SSc患者CD4+ T细胞中CD70mRNA和CD70蛋白表达均明显升高(P=0.001;P=0.007)。结论:CD70在SSc的发生发展中可能起着重要作用。     

系统性硬皮病表观遗传学发病机制的进展

表观遗传学是研究DNA序列未发生改变的情况下,基因表达的可遗传变异的一门学科,其涉及的机制主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰和MicroRNA等.系统性硬皮病是一种累及皮肤及多种器官的自身免疫性结缔组织疾病,其发病机制复杂.近年来,有关系统性硬皮病表观遗传学机制的研究取得一定进展,特别是DNA甲基化、组蛋白修饰参与系统性硬皮病自身抗体的产生和胶原合成异常,如有研究发现,患者CD4+T细胞基因调控序列甲基化水平的降低导致CD70和CD40L表达升高,从而参与系统性硬皮病发病;Flil基因启动子区域组蛋白的异常修饰导致Fli1表达下降,胶原合成增加.基因低甲基化、组蛋白低乙酰化和MicroRNA修饰可能会成为系统性硬皮病早期生物学标记和治疗目标.     

系统性硬化病患者外周血CD4＋T细胞CD40LDNA甲基化研究北大核心CSCD

目的探讨系统性硬化病（SSc）患者外周血CD4＋T细胞中CD40L基因调控序列的甲基化状态。方法密度梯度离心法分离SSc患者（女16例,男10例）和健康对照组（女15例,男10例）外周血单一核细胞,磁珠分选CD4＋T细胞,提取DNA,亚硫酸氢钠处理DNA,巢式PCR扩增CD40L基因调控序列片段（包括启动子和增强子）,转化进入大肠杆菌,每个样本挑取8个克隆进行测序。结果亚硫酸盐基因组测序结果显示,健康女性CD40L基因调控序列一半为甲基化,一半为去甲基化,女性SSc患者CD40L基因启动子和增强子区域平均甲基化水平均显著低于女性健康对照（P值均〈0．01）;男性SSc患者和男性健康对照CD40L基因启动子和增强子区域几乎全部为去甲基化,两组平均甲基化水平差异无统计学意义（P值均〉0．05）。结论女性SSc患者CD4＋T细胞中失活的X染色体上CD40L调控序列低甲基化,可能是导致CD40L在女性SSc患者CD4＋T细胞中过度表达的原因之一。