一氧化氮对人肝癌细胞SMMC-7721辐射敏感性的增强效应

目的:观察一氧化氮对肿瘤细胞SMMC-7721辐射敏感性的作用效果。方法:实验于2005-06/09在兰州大学生命科学学院和中科院近代物理研究辐射医学实验室进行。处于对数生长期的肝癌细胞SMMC-7721,在用X射线照射前4h,换入含有0.1mmol/L硝普钠(一氧化氮的前体)的培养液,与对照组(不加硝普钠)一起,在200cGy/min的剂量率下,分别照射0,1,2,4,6,8Gy,换为正常培养液培养。用集落形成法计算细胞的存活率,用吖啶橙/溴乙啶双染法检测细胞的死亡情况,用流式细胞仪检测细胞周期。结果:①存活曲线细胞存活率随照射剂量增加而减少,硝普钠组细胞的克隆形成率低于对照组(2Gy时,P<0.01)。②细胞死亡百分率(坏死细胞与凋亡细胞总数/总细胞数):与照射剂量呈正相关,硝普钠组高于对照组(P<0.05)。对照组从(9.95±3.53)%(0Gy)逐渐升至(58.74±3.46)%(6Gy),而硝普钠组则从(18.53±12.02)%(0Gy)迅速升至(61.57±9.53)%(2Gy)。③细胞周期检测结果:对照组细胞经过X射线照射后,出现了G2/M期阻滞[从0Gy时(12.50±5.76)%逐渐增加到8Gy(40.36±2.74)%],而硝普钠组细胞在低剂量时主要表现为G0/G1期阻滞[0Gy:(16.06±7.19)%;2Gy:(17.93±0.92)%],而G2/M期阻滞仅在高剂量时明显[8Gy时为(50.10±3.93)%,P<0.05]。结论:经硝普钠产生的一氧化氮,通过与X射线协同作用,减少了肝癌细胞SMMC-7721的细胞存活率,促进细胞死亡,阻止细胞被阻滞至G2/M期,是一种有效的辐射增敏剂。     

高度浓缩生长因子对MC3T3-E1成骨细胞生物学性能的影响

目的：观察高度浓缩生长因子（concentrated growth factor,CGF）对成骨细胞生物学性能的影响。方法：将MC3T3-E1细胞在CGF环境下进行培养,并设立空白对照组。扫描电镜观察成骨细胞在CGF表面的附着;培养1、4、7 d后,检测细胞增殖情况以及碱性磷酸酶（ALP）活性;茜素红染色观察矿化结节和成骨相关基因Runx2的表达。CGF浸出液培养细胞24 h后,以鬼笔环肽染色观察细胞骨架的形态变化。采用 SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果：CCK-8比色显示,培养1、4、7 d,在相同时间点,实验组与对照组相比,CGF细胞增殖活性显著增强（P< 0.05）。ALP活性检测显示,培养1 d后,实验组与对照组无显著差异（P>0.05）;培养4、7 d后,实验组与对照组相比,ALP活性具有显著差异（P<0.05)。茜素红染色显示,CGF组钙化结节数量增多且面积较大。鬼笔环肽染色和DAPI染色可见,CGF组中细胞数量增多,细胞铺展面增大,肌动蛋白形态更为清晰。CGF可促进Runx2 mRNA表达（P<0.05）。结论：CGF可促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化以及Runx2的表达。     

新型可注射磷酸钙骨水泥在椎体后凸成形术中的生物力学评价

目的 评价一种新型可注射磷酸钙骨水泥(CPC)在椎体后凸成形术中的体外生物力学性能,以探讨该材料能否有效替代聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥(PMMA)应用于经皮椎体后凸成形术.方法 取老年尸体共20个胸腰椎新鲜标本(T11～L3),经双能X线吸收骨密度仪测试骨密度后完全随机分为CPC组和PMMA组.在材料试验机上制成椎体压缩骨折模型并测量两组椎体初始的强度和刚度,然后分别用CPC和PMMA两种材料行椎体后凸成形术,再次测量术后两组椎体的强度和刚度.结果 两种骨水泥都具有良好的可注射性,CPC固化后不放热,PMMA固化有明显放热反应,体外工作时间CPC长于PMMA,X线显影效果CPC优于PMMA.椎体后凸成形术后PMMA组椎体最大载荷(4.80±1.957)kN、抗压强度(4.794±1.683)kPa,均较术前明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).刚度高于骨折前,但差异无统计学意义(P＞0.05).CPC组椎体后凸成形术后最大载荷(3.412±1.078)kN、抗压强度(3.477±0.689)kPa,稍高于骨折前,差异无统计学意义(P＞0.05).而刚度(918±201)N/mm,低于骨折前,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 新型CPC在椎体后凸成形术中能有效恢复椎体的生物力学性能,可望在椎体后凸成形术中作为PMMA的理想替代材料.     

二甲双胍对转化生长因子β1诱导黑素瘤1205Lu细胞上皮-间质转化及侵袭的影响

目的 探讨二甲双胍在转化生长因子β1 (TGF-β1)诱导下,对黑素瘤1205Lu细胞上皮-间质转化(EMT)过程及侵袭的影响.方法 体外培养1205Lu细胞,分3组处理:空白对照组、TGF-β1(5 ng/ml)组、TGF-β1(5 ng/ml)+二甲双胍(1 mmol/L)组.处理48 h后,显微镜下观察各组细胞形态变化并采集照片.Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量RT-PCR技术分别测定细胞内N-钙黏蛋白及基质金属蛋白酶9(MMP-9)在蛋白质和mRNA水平上的表达,通过单因素方差分析及LSD-t法对结果进行统计学分析.结果 与空白对照组相比,TGF-β 1诱导1205Lu细胞向成纤维细胞样形态转变(同上皮-间质转化样改变),联合二甲双胍可逆转上述形态改变.3组穿膜细胞数为空白对照组194.1±8.295、TGF-β1组412.2±13.427、TGF-β1+二甲双胍组175.3±8.693.N钙黏蛋白水平3组分别为0.603±0.029、1.963±0.016、0.207±0.009,mRNA水平3组分别为1.000±0.000、6.678±0.043、1.035±0.015.MMP-9蛋白水平3组分别为0.575±0.009、1.243±0.027、0.629±0.008,mRNA水平3组分别为1.000±0.000、5.351±0.604、0.930±0.130.结果经方差分析显示,3组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 二甲双胍可显著抑制TGF-p1诱导的黑素瘤1205Lu细胞EMT样形态改变、细胞侵袭及N钙黏蛋白、MMP-9在蛋白和mRNA水平上的表达.     

香菇多糖抗小鼠MRSA皮肤感染的作用

目的 本研究主要探讨香菇多糖是否具有抗小鼠耐甲氧西林金黄色葡萄球菌皮肤感染的作用.方法 将小鼠随机分为对照组和香菇多糖处理组,每组10只,皮下注射5×107CFU/30μl耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,建立小鼠皮肤感染模型.对照组腹腔注射100μl PBS,实验组腹腔注射100μl香菇多糖(100mg/kg).观察小鼠皮肤部位感染情况,感染组织匀浆细菌培养检测小鼠皮肤感染部位细菌负荷量,免疫荧光染色方法检测小鼠皮肤感染部位内中性粒细胞浸润情况,RT-P C R技术检测小鼠皮肤感染部位白细胞介素33(I L-33)、中性粒细胞趋化因子1(KC)的表达.结果 经香菇多糖处理后,小鼠皮肤部位感染明显轻于对照组;感染部位细菌定量、免疫荧光染色显示香菇多糖可降低小鼠皮肤感染部位细菌负荷量,促进中性粒细胞浸润;RT-P C R技术检测显示香菇多糖可促进小鼠皮肤感染部位I L-33、趋化因子K C的表达.结论 香菇多糖可抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对小鼠皮肤的感染.     

肾上腺髓质素在黑素瘤中的表达

目的：检测肾上腺髓质素（adrenomedullin,ADM）在人黑素瘤中的表达。方法：采用免疫组织化学SP法检测ADM在15例黑素瘤、30例色素痣组织标本及人成纤维细胞、黑素瘤细胞系A375中的表达。结果：人成纤维细胞中ADM的表达为弱阳性、A375中ADM表达呈强阳性。黑素瘤组织标本中80％检测到ADM,色素痣组织标本中仅有43．3％检测到ADM的表达,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：肾上腺髓质素在人黑素瘤组织中高表达,在人的色素痣和成纤维细胞中低表达,提示ADM与黑素瘤发生、发展可能密切相关。     

建中行建汤治疗冠心病108例

2000～2006年，笔者应用自拟建中行建汤治疗冠心病108例，现报告如下。     

髋臼假体位置对人工股骨头应力分布的影响

目的探讨髋臼假体不同放置位置对髋关节置换术后人工股骨头压应力的生物力学影响。方法对8具尸体16侧髋关节标本按照全髋关节置换术髋臼的处理原则，制作16种人工髋臼放置的位置，共分成两组：髋臼向内侧位移组，从解剖位置起间隔2mm，递增至14mm，共8髋；靛臼向上方位移组，从解剖位置起间隔2mm，递增至14mm，共8髋。应用电阻应变片在生物力学试验机上测定各标本在轴向1000N载荷下人工股骨头的应变数据，记录人工股骨头所承受的压应力值。结果（1）髋臼向内侧位移组：髋臼假体位置每向内位移2mm，人工股骨头承受的压应力就增加，位移越多，股骨头承受的压应力增加就越明显，位移超过6mm后，压应力呈明显快速增加趋势；（2）髋臼向上方位移组：髋臼假体位置每向上位移2mm，除上移6mm应力值小于上移4mm外，人工股骨头承受的压应力总体趋势是增加，且上移超过8mm后，人工股骨头压应力值开始明显增加；（3）在相同位移情况下，向内位移时人工股骨头压应力明显大于向上位移。结论髋臼中心无论是向内或向上位移，股骨头承受的压应力均增加，且位移幅度越大，压应力增加越明显；向上位移6mm时，人工股骨头承受的应力值均小于前后位移点，未排除此位点是一应力缓冲点的可能。     

瑞香狼毒治疗肺癌的临床研究

目的:观察瑞香狼毒治疗非小细胞肺癌的临床有效性及安全性。方法:非小细胞肺癌患者80例根据入院顺序平分为治疗组与对照组各40例,对照组采用吉西他滨联合顺铂治疗,治疗组在此基础上加用瑞香狼毒挥发物注射治疗。结果:经过治疗后,治疗组40例中,CR 0例,PR 16例,RR为40.0%;对照组40例中,CR 0例,PR 8例,RR为20.0%。治疗组的治疗有效率明显高于对照组(P<0.05)。治疗组1年生存率为75.0%(30/40),对照组为35.0%(14/40),治疗组的1年生存率明显高于对照组(P<0.05)。治两组不良反应主要为皮疹、腹泻、转氨酶升高等。结论:瑞香狼毒具有抗肿瘤、抑菌等多种生物活性,药理活性强,辅助治疗非小细胞肺癌的临床有能取得更好的近期治疗效果,值得推广应用。     

发疹型药疹皮损内浸润淋巴细胞类型和亚类的检测

发疹型药疹的皮损组织病理表现为真皮浅层、中层血管扩张充血 ,周围有淋巴细胞浸润 ,为了进一步探讨本病皮损浸润淋巴细胞中以那些细胞类型及亚类为主,我们对本病患者皮损进行了淋巴细胞类型及亚类的免疫组化研究。 一、病例选择 发疹型药疹患者 34例 ,男 14例 ,女 20例;年龄 (35.55± 11.59)岁。为本院门诊及住院患者,临床确诊为发疹型药疹。原发病为阑尾炎、感冒、肺炎或咽峡炎,其致敏药物为氨苄西林、青霉素、头孢菌素、利福平、卡马西平及感冒清等药物,诊断依据文献 [1],特异性淋巴细胞转化试验阳性、皮内试验阳性或激发试验阳性…