铜绿假单胞菌对耐喹诺酮药物质粒基因的研究

目的：探讨铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物的耐药质粒与周围共生菌耐药质粒染色体相互转移的关系。方法收集深圳市第七人民医院2011年1月～2013年12月481份各种样品培养出的铜绿假单胞菌31例,药敏实验结果对喹诺酮耐药的15例为研究对象,运用质粒转化、提取实验证实其耐药质粒的存在,PCR扩增、基因序列分析,与周围共生菌耐药质粒的基因序列比对。结果铜绿假单胞菌耐药株的耐药质粒与周围共生菌质粒发现有相同基因序列（χ2检验,χ2＝1.207,P＜0.01）。结论耐药质粒能在不同种属细菌之间传递。     

耳鼻喉科综合治疗台喷枪头污染与消毒观察

目的探讨耳鼻喉科综合治疗台喷枪使用前后的污染状况和常用消毒方法的效果。方法按《消毒技术规范》规定方法进行采样及消毒,并对数据进行统计分析。结果使用后的喷枪头有明显细菌污染,除了分布于口咽部和鼻腔的正常菌群外,还有致病菌。酒精灯烘烤、乙醇擦拭和碘伏擦拭3种消毒方法均可有效消毒。结论耳鼻喉科综合治疗台喷枪头存在污染,侵入性操作有引起医源性医院感染的可能,常规消毒方法效果明显,以乙醇擦拭和碘伏擦拭方便易行。     

深圳市乙肝疫苗免疫失败者S基因分析

目的了解乙肝疫苗免疫失败者的HBVS基因的变异情况。方法采用流行病学、ELISA与分子生物学方法,筛选乙肝疫苗免疫失败者。采用聚合酶链反应（PCR）、基因克隆和测序的方法,对乙肝疫苗免疫失败者的HBVS基因进行分析,并与HBV参考序列s基因进行比较,分析其变异情况。结果从2564份受检者中．筛选出2例（0．78％e）HBsAg（-）／HBeAg（＋）／HBcAb（＋）乙肝疫苗免疫失败者（HBsl、HBs2）,经HBVDNA荧光定量PCR检测和HBVS基因PCR扩增,结果均为阳性,为B基因型。其S基因序列与参考序列（JX429908．1）相比,同源性为98．57％,且乙肝疫苗免疫失败者s基因在第363位和第467位分别由野生型的C变为A、G变为A,HBsAg121位和156位氨基酸C和w缺失。结论乙肝疫苗免疫失败者HBVS基因上第363位和第467位碱基存在错义突变（C→A和G→A）,改变了HBsAg的结构和抗原性。     

深圳东部地区儿童呼吸道合胞病毒与肺炎支原体感染的相关性研究

目的分析深圳东部地区儿童呼吸道合胞病毒(RSV)与肺炎支原体(MP)感染的相关性。方法运用荧光定量聚合酶链反应技术检测2011-2015年儿童咽拭子中RSV与MP,并进行比较。结果2011-2015年RSV与MP总感染率为14.26%(639/4 482),其中RSV感染率为7.24%(312/4 311),MP感染率为7.30%(327/4 482)。2011-2015年RSV合并MP双重感染率为0.18%(7/3 956)。RSV上半年与下半年及逐年之间均存在明显差异。RSV与MP在5种常见呼吸道疾病中以支气管肺炎55.45%(173/312)与69.42%(227/327)感染率最高,其次是急性支气管炎31.73%(99/312)与20.80%(68/327)。结论 RSV与MP双重感染应引起临床高度重视;RSV流行与季节和气候环境相关,而且会出现连续性的高峰期;MP流行无明显季节性规律;RSV与MP在同一气候环境条件下高发流行呈相反趋势;RSV与MP主要引起儿童支气管肺炎,其次是急性支气管炎。     

XS-800i血细胞分析仪对地中海贫血患者血小板参数检测的影响分析

目的分析XS-800i血细胞分析仪对地中海贫血患者血小板参数检测的影响。方法通过对107例地中海贫血患者使用XS-800i血细胞分析仪进行血细胞分析测定,分组与100例健康对照组比较PLT计数结果,作相关统计学分析,并分析其对PDW、MPV、P-LCR、PCT等参数的影响。结果XS-800i血细胞分析仪对70fL〈MCV〈80fL的地中海贫血患者PLT测定差异无统计学意义（P〉0．05）,对60fL〈MCV〈70fL和MCV〈60fL患者PLT测定差异有统计学意义（P〈0．01）,PLT直方图出现翘尾现象,使部分患者PDW、MPV、P—LCR、PCT等参数未能测定与计算。结论XS-800i血细胞分析仪对地中海贫血McV〈70fL患者血小板测定会导致结果假性升高,并影响PLT相关参数的测定与计算,需根据PLT直方图改变进行手工法复查。     

TCT与高危型HPV DNA检测在宫颈病变中的诊断价值

目的探讨液基细胞学技术(TCT)与高危型人乳头瘤病毒(HPV)检测在宫颈病变中的诊断价值。方法对2008年1~6月在妇科门诊就诊的396例宫颈病变的患者进行TCT、高危型HPV DNA检测,以病理组织学诊断结果为金标准。结果将ASCUS以上的病变作为细胞学阳性诊断,其阳性率为21.71%(86/396),组织学将CINⅠ以上病变作为阳性诊断,阳性率为17.42%(69/396),两者比较差异无统计学意义(P>0.05);高危型HPV检测396例,阳性率为19.44%(77/396),其慢性炎症、CINⅠ、CINⅡ~Ⅲ和SCC的HPV感染率分别为7.05%、49.28%、71.43%、100.00%。结论 TCT联合HPV DNA检测可提高宫颈疾病筛查的敏感度和阴性预测值。     

深圳地区慢性HBV感染者血清中HBx基因多态性分析

目的:研究HBV感染者血清学模式与HBx基因多态性的关系。方法:采用聚合酶链反应、单链构象多态性和异源双链分析的方法对HBV感染者血清中HBx基因进行多态性分析。结果:在HBsAg(+)/HBeAg(+)/HBcAb(+)、HBsAg(+)/HBeAb(+)/HBcAb(+)和HBsAg(+)/HBcAb(+)血清学模式中,HBx基因双链区(nt1595-1881)多态性不明显(P(0.05),带形基本一致;HBx基因单链区(nt1365-1625)多态性明显,HBsAg(+)/HBeAg(+)/HBcAb(+)模式PCR扩增产物条带数与HBsAg(+)/HBcAb(+)模式相比,差异显著(P(0.05)。结论:慢性HBV感染者不同血清学模式HBx基因存在多态性,其多态性主要表现在HBx基因单链区。     

乙肝病毒突变体HBx-d382特异性抗体的制备及鉴定

目的制备乙肝病毒X基因突变体HBx-d382特异性抗体。方法运用生物信息学和多肽合成法制备HBx-d382特异性多肽(HBx-d382P),采用高效液相色谱法(HPLC)和电喷雾离子化质谱(ESI-MS)测定合成多肽的纯度和分子量。用化学方法将多肽与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联成多肽抗原HBx-d382P-KLH,并经完全弗氏佐剂(CFA)和不完全弗氏佐剂(IFA)乳化,免疫新西兰雄性大白兔。用ELISA鉴定抗血清效价、亲和层析法纯化抗体、Dot blot评价抗体特异性。结果经HPLC和ESI-MS分析,合成多肽符合HBx-d382特异性抗体制备的要求。ELISA和Dot blot试验结果显示,兔抗血清的效价为6.4×104,纯化后的HBx-d382抗体特异性高。结论获得了高效价高特异性的HBx-d382多克隆抗体,为进一步研制HBx-d382免疫检测试剂盒打好了基础。     

单管双重巢式聚合酶链反应及基因测序技术鉴别呼吸道合胞病毒A,B亚型

目的建立呼吸道合胞病毒(RSV)A,B亚型的鉴别方法,以供临床科研应用。方法运用荧光定量聚合酶链反应技术(FQ-PCR)筛选出2015~2017年50例住院儿童咽拭子RSV阳性标本;根据RSV的G蛋白编码基因核苷酸序列设计单管双重巢式PCR引物进行基因分型;其A,B亚型产物经测序与GeneBank库中核苷酸序列进行比对分析鉴定;采用卡方检验对结果进行统计学分析。结果50例咽拭子RSV阳性患儿呼吸道合胞病毒A,B亚型及混合感染率分别为82.00%,14.00%和4.00%,差异有统计学显著性意义(χ2=81.06,P0.01);RSV分型结果与基因测序结果完全符合。结论深圳东部地区以A亚型流行为主,混合感染并存;单管双重巢式聚合酶链反应(PCR)及基因测序技术适用于RSV的A,B亚型鉴别,具有灵敏度高、特异度强和准确率高的特点。     

HBV基因型与HBx基因变异的研究

目的分析慢性HBV感染者血清中HBV基因型和HBx基因多态性,探讨HBx基因变异与HBV基因型的关系。方法采用型特异性引物PCR法对110份慢性HBV感染者血清中HBV基因型进行检测。采用巢式PCR、单链构象多态性与异源双链分析、以及基因测序和生物信息学方法分析HBx基因突变。结果在110份慢性HBV感染者血清中,检出B型、C型和混合型B＋C,分别占57份（56.8%）、49份（44.6%）和4份（3.6%）。与参考序列相比,B型与C型HBx基因都存在点突变,且C型点突变数明显多于B型（t=-12.599,P〈0.05）。结论慢性HBV感染者HBx基因突变与HBV基因型密切相关。