维甲酸诱导基因G慢病毒表达载体的构建及对肺癌细胞A549的影响

背景与目的：维甲酸诱导基因G(retinoic acid-induced gene G,RIG-G)是从急性早幼粒细胞性白血病细胞系NB4细胞中克隆出的肿瘤抑制基因。我们通过调控基因(Tet-on)系统构建受强力霉素(doxycycline,DOX)诱导RIG-G基因表达的A549细胞系,并观察其对A549细胞增殖的作用。方法：采用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术扩增RIG-G基因片段,利用LR重组系统构建pLenti6/TO/V5-GIM-RIG-G慢病毒载体,对该慢病毒载体和Tet-on慢病毒载体包装和病毒滴度测定后,感染A549细胞;采用有限稀释法筛选稳定株;使用细胞免疫荧光和蛋白［质］印迹法(Western blot)鉴定RIG-G基因受DOX调控表达的效果;CCK-8试验检测细胞增殖能力。结果：成功构建pLenti6/TO/V5-GIM-RIG-G慢病毒载体,包装后测得其活性滴度为1.0×10⁸ TU/mL;慢病毒经Tet-on包装后物理滴度为4×10⁹ VP/mL;RIG-G蛋白成功地在慢病毒感染后的A549稳定株中合成和表达,并且受DOX的诱导调控。RIG-G蛋白表达成功后,A549细胞的增殖与对照组相比显著降低(1.168±0.107 vs 2.099±0.162,P<0.05)。结论：本研究成功建立了RIG-G基因可调控表达的A549稳定株;RIG-G蛋白对A549的增殖有抑制作用。     

信息化管理使TAT监控节点有效前移

目的建立适用于临床需求的标本流程监控程序,缩短检验结果回报时间(TAT),提高检验报告及时率。方法分析检验流程中的各时间节点;建立流程中关键节点的信息化监控程序;建立标本进入检验科时间的预警系统;统计分析预警前后的TAT监控效果。结果 (1)临床常规检验流程中共存在12个节点,包括检验医嘱、医嘱处理、医嘱交接、采集标本、转运标本、检验接收、各工作站接收、上机检测、检测结束、报告审核、发送报告及打印报告。(2)流程中检验科需要常规监控的节点有8个,包括采集标本、检验接收、各工作站接收、上机检测、检测结束、报告审核、发送报告及打印报告。(3)医生通过医嘱工作站专设的"标本流向查询"界面实时查询每份标本的流向,降低了检验科的咨询电话的发生率。(4)检验科内部在标本到达TAT的预设值时通过大屏幕显示报警,实现了预警时间前移。"报告延时提醒大屏幕"安装前后检验的平均报告时间明显下降,报告及时率提高。结论通过将临床标本检验周期监控节点前移,提高了检验报告的及时率,有效避免了临床投诉。     

CDA-2抑制肺癌生长的炎症机制研究

目的探究尿多酸肽（CDA-2）抑制肺癌生长的作用及炎症机制。方法通过给雌性C57BL/6小鼠尾静脉注射LLC细胞,建立小鼠肺癌模型。采用肿瘤计数和测量大小评价CDA-2对肺肿瘤增殖的影响;收集经CDA-2治疗过的小鼠肺支气管肺泡灌洗液（BALF）并分离肺泡巨噬细胞,采用白细胞分类计数、电泳迁移位移试验（EMSA）、ELISA试验,研究CDA-2抑制肿瘤的作用机制。结果与对照相比,CDA-2明显抑制小鼠肺肿瘤的生长,肿瘤数和肿瘤尺寸显著下降（P〈0.05）。经CDA-2处理后支气管肺泡灌洗液（BALF）的巨噬细胞中的NF-κB与靶DNA结合的活性被强烈的抑制。此外,CDA-2处理显著减少BALF中各种炎性细胞的数量（P〈0.05）,以及炎症因子TNFα,IL-6,KC在肺组织中的表达（P〈0.05）。结论 CDA-2能抑制肺肿瘤的生长,通过抑制髓系细胞中NF-κB的活性,减少肺部炎症,可能是CDA-2抑制肺癌的生长的机制。     

RDW在恶性肿瘤诊疗中的最新应用

红细胞分布宽度(RDW)是反映红细胞体积大小异质性的参数,以往主要应用于贫血的诊断。在过去一段时间里,已经有大量的研究数据表明RDW在心血管疾病、高血压、炎症性肠病及自身免疫性疾病等多种疾病中具有应用价值。近年来,有越来越多的研究开始报道RDW在恶性肿瘤中的诊断价值,文章就RDW在各类肿瘤临床诊断中的研究进展作一综述。     

骨科患者感染病原菌分布及其药敏性分析

目的 了解骨科住院患者感染的病原菌分布及其药敏性,为临床合理应用抗菌药提供依据。方法 通过回顾性调查方法,对上海某医院骨科医院感染患者送检病原学标本检测资料进行分析。结果 调查时段内从该医院骨科住院感染患者送检标本中共分离出病原菌698株,其中革兰阴性菌和革兰阴性菌分别占51.9%和46.3%,假丝酵母菌属占1.9%。分离的感染菌株以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分居前3位。临床分离的金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、克林霉素等抗菌药物耐药率均超过50%;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检出率分别为33.3%和25.8%。结论 住院骨科患者感染病原菌中革兰阳性和革兰阴性菌几乎各占50%,检出金黄色葡萄球菌居首位,应加强耐药菌监测。     

Sysmex XN-2000血液分析仪“3R”功能应用评价

目的评价Sysmex XN-2000血液分析仪"3R"自动复检规则对血常规计数类复检标本回报时间(TAT)的临床价值。方法汇总本实验室2013年8月至2014年6月有"3R"功能的Sysmex XN-2000血液分析仪与无"3R"功能的Sysmex XE-2100血液分析仪检测的血常规检验标本的TAT和报告及时率,并统计分析。结果 XN-2000、XE-2100分析仪检验的标本TAT分别为13.17、14.61 min,报告及时率(30 min内为合格)分别为93.19%、90.84%,差异有统计学意义(P0.01);PLT计数类复检标本:XN-2000、XE-2100检验的标本TAT分别为21.09、40.66 min,报告及时率分别为86.38%、9.95%,差异有统计学意义(P0.01);WBC计数类复检标本:XN-2000、XE-2100检验的标本TAT分别为38.72、42.72 min,报告及时率分别为38.94%、26.24%,差异有统计学意义(P0.01);RBC类计数类复检标本:XN-2000、XE-2100检验的标本TAT分别为16.32、22.37min,报告及时率分别为92.83%、82.39%,差异有统计学意义(P0.01)。结论 Sysmex XN-2000血液分析仪"3R"自动复检规则可有效改善血常规计数类复检标本,尤其是PLT计数类复检标本TAT较长的问题,对改善血常规标本TAT起关键作用。     

Effect and mechanism of antimicrobial peptide cathelicidin secreted by tumor associated macrophage on the growth of colorectal cancer in mice

正Objective To investigate the effect and mechanism of the antibacterial peptide cathelicidin secreted by tumor associated macrophages on the growth of colorectal cancer in mice.Methods Azoxymethane(AOM)/dextran sodium sulfate(DSS)method was used to establish a mouse model of colitis associated colon cancer.To induce tumor formation,cathelicidin antibody,Ig G antibody(positive     

Versican蛋白在肿瘤微环境中的生物学作用及应用研究进展

摘要：恶性肿瘤是当今世界上威胁人类健康，导致人类死亡常见的疾病之一。肿瘤的发生、发展不仅取决于肿瘤细胞的遗传改变，也取决于基质、血管、浸润炎症细胞等肿瘤微环境(TME)的改变。Versican是一种大分子量的硫酸软骨素蛋白多糖，作为细胞外基质(ECM)的重要成分，其在肿瘤微环境中通过与多种蛋白质分子及细胞表面相关的ECM成分相互作用，参与肿瘤细胞的增殖、黏附、转移、侵袭、血管生成和凋亡，并发挥重要作用。该文旨在对Versican蛋白在肿瘤微环境中的生物学作用及其应用的研究进展作一综述，以进一步探究该蛋白质在肿瘤疾病进展过程中的临床意义，展望新的研究方向。     

Beclin 1在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与Ki67的关系

目的探讨自噬相关基因Beclin 1和增殖相关基因Ki67编码的蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达情况。方法选取乳腺浸润性导管癌患者64例。采用免疫组化法检测癌组织及对应的癌旁组织中Beclin 1和Ki67蛋白的表达,同时采用免疫荧光法和免疫印迹法检测癌组织及对应癌旁组织中Beclin1蛋白的表达。结果癌组织中Beclin 1的阳性表达率(43.8%)明显低于癌旁组织(98.5%)(P0.05),而Ki67的阳性表达率(76.6%)则高于癌旁组织(0.00%)(P0.05)。癌组织中Beclin 1蛋白表达与Ki67蛋白表达呈负相关(r=-0.256,P0.05)。Beclin 1蛋白表达与乳腺浸润性导管癌病理分级、有无淋巴结转移有关(P0.05),与肿瘤直径、年龄、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体2(HER-2)均无关(P0.05)。Ki67蛋白表达与乳腺浸润性导管癌病理分级、肿瘤直径有关(P0.05),与有无淋巴结转移、年龄、ER、PR、HER-2均无关(P0.05)。免疫荧光法检测结果显示癌组织中Beclin 1蛋白的阳性表达率(30.0%)明显低于癌旁组织(100.0%)(P0.05)。免疫印迹法检测结果显示癌旁组织中Beclin l蛋白的相对表达量为0.43±0.12,明显高于癌组织(0.20±0.18)(P0.05)。结论乳腺浸润性导管癌组织中Beclin 1蛋白表达明显降低,Ki67蛋白表达明显升高。     

苯基乙酰对小鼠移植性肺癌的抑制作用及其机制

目的观察苯基乙酰(PG)对肺癌的抑制作用,并探讨其作用机制。方法选择C57BL/6小鼠40只,尾静脉注射肺癌LLC细胞建立肺癌模型。随机将成模小鼠分为PG组、PBS组各20只,PG组腹腔内注射800 mg/kg PG,PBS组腹腔内注射等量PBS,连续10天。两组各随机取5只,计数肺肿瘤个数、测量肿瘤最大直径;各随机取5只,采用Western blotting法观察肺癌组织Bcl-2、Bcl-XL、细胞凋亡抑制蛋白1(c IAP1)、Survivin、增殖细胞核抗原(PCNA)表达。剩余小鼠收集支气管肺泡灌洗液(BALF),取5只小鼠的BALF,检测炎症细胞(包括WBC总数及分类)及炎症因子(TNF-α、IL-6、趋化因子);剩余小鼠的BALF,采用电泳迁移位移试验观察NF-κB DNA结合活力。结果与PBS组比较,PG组肺肿瘤个数和肿瘤最大直径明显减少或降低(P均<0.05)。Western blotting结果显示,PG组Bcl-2、BclXL、c IAP1、Survivin及PCNA表达均明显下调,BALF中巨噬细胞中NF-κB与靶DNA结合活性明显被抑制。与PBS组比较,PG组可显著降低BALF中各种炎性细胞数量及炎症因子水平(P均<0.05)。结论 PG能明显抑制小鼠肺癌的生长,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡、抑制巨噬细胞中NF-κB活性、减轻肺部炎症反应有关。