携带前强啡肽基因重组质粒的构建及鉴定

强啡肽(dynorphin)是作用于κ-阿片受体的神经肽,广泛分布于外周和中枢神经系统,涉及到许多生理和病理变化如吗啡耐受和依赖等[1].我们利用前强啡肽基因(prodynorphin gene)构建pUC57-prodynorphin重组质粒为下一步探讨其在吗啡耐受和依赖中的作用奠定了基础.     

高龄严重心肺疾患患者全髋置换手术的麻醉处理

高龄患者常合并高血压、心功能不全及肺功能损害等多种疾病，全髋置换手术难度大、术时较长，易引起血流动力学和机体内环境紊乱，术中还需要保护各重要器官，故对麻醉处理的要求较高。我们对9例高龄严重心肺疾患患者施行全髋置换手术的临床资料进行分析，现将有关麻醉处理情况总结如下。     

舒芬太尼给药模式对妇科腹腔镜手术患者术后麻醉恢复质量的影响

目的 研究舒芬太尼不同给药模式对妇科腹腔镜患者术后麻醉恢复质量的影响,探讨此类手术舒芬太尼较佳给药模式.方法 选择60例妇科择期行腹腔镜手术患者,ASA Ⅰ～Ⅱ级,根据舒芬太尼给药模式随机分为间断推注给药组和血浆靶控给药组.所有患者常规连续监测收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、心率(HR)、心电图(ECG)、呼气末二氧化碳分压(PetCO2),分别记录两组患者手术时间、舒芬太尼用量、丙泊酚用量、呼吸恢复时间、睁眼时间、拔管时间、出手术时Ramsay 镇静评分、VAS评分.结果 间断推注组与靶控输注组相比,舒芬太尼用量明显减少(P<0.05),丙泊酚用量两组差异无统计学意义(P>0.05),患者呼吸恢复时间、睁眼时间、拔管时间间断推注组均明显缩短(P<0.05),但出手术室时靶控输注组Ramsay评分较高(P<0.05),VAS评分两组差异无统计学意义(P>0.05).结论 舒芬太尼两种常用的给药模式均能较好地应用于妇科腹腔镜患者,间断推注给药患者券醒更快.     

舒芬太尼给药模式对妇科腹腔镜手术病人术后麻醉恢复质量比较

目的 研究舒芬太尼不同给药模式对妇科腹腔镜患者术后麻醉恢复质量的影响,探讨此类手术舒芬太尼较佳给药模式。方法 选择60例妇科择期行腹腔镜手术患者,ASAⅠ～Ⅱ级,根据舒芬太尼给药模式随机分为两组：Ⅰ组为间断推注给药组,Ⅱ组为血浆靶控给药组。所有患者常规连续监测收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、心率（HR）、心电图（ECG）、呼末二氧化碳分压（PetCO2）,分别记录两组患者手术时间、舒芬太尼用量、丙泊酚用量、呼吸恢复时间、睁眼时间、拔管时间、出手术时Ramsay镇静评分、VAS评分。结果 Ⅰ组与Ⅱ组相比,舒芬太尼用量明显减少（P＜0.05）,丙泊酚用量差异两组无统计学意义（P＞0.05）,患者呼吸恢复时间、睁眼时间、拔管时间Ⅰ组均明显缩短（P＜0.05）,但出手术室时Ⅱ组Ramsay评分较高（P＜0.05）,VAS评分两组无统计学意义（P＞0.05）。结论 舒芬太尼两种常用的给药模式均能较好地应用于妇科腹腔镜患者,间断推注给药患者苏醒更快。     

硬膜外麻醉下躯干温度升高与痛觉缺失平面变化

目的观察在硬膜外麻醉下躯干温度升高平面与痛觉缺失平面的关系,探讨躯干皮肤温度测量的临床意义。方法硬膜外麻醉手术的患者40例,随机在30例硬膜外腔中注入2%利多卡因(测试组),10例硬膜外腔中注入生理盐水(对照组),观察两组患者注液前和注液后5、10、15、20、25、30min的T4、T5、T6、T7、T8、T9、T10、T11、T12和L5皮肤温度变化,同时也测量测试组中各时间点痛觉缺失平面(针刺法),观察温度升高平面同痛觉缺失平面的关系。结果测试组各时间点温度升高平面均高于痛觉缺失平面,在5、10、15、20、25、30min时间点,温度升高平面与痛觉缺失平面差分别为2.5±0.6、2.8±0.7、2.3±0.5、2.4±0.5、2.4±0.5、2.4±0.5。测试组阻滞区T6、T7、T8、T9、T10、T11、T12、L5稳定温度升高值较对照组的相应点的稳定温度升高值升高明显(P<0.01)。结论硬膜外麻醉下阻滞区皮肤温度呈节段性升高,且温度升高平面均高于痛觉缺失平面2~3脊神经节段。     

手术前后静脉注射地塞米松对预防PCA患者术后恶心呕吐作用的比较

【目的】手术前后应用地塞米松预防病人自控镇痛（PcA）患者术后恶心呕吐的效果。【方法】随机将80例接受乳腺癌改良根治手术的女性患者分为两组,每组40例：术前组（n=40）,麻醉诱导前静脉注射地塞米松10rag（2mL）,术毕静脉注射生理盐水2mL;术毕组（n=40）,麻醉诱导前静脉注射生理盐水2mL,术毕静脉注射地塞米松10mg（2mL）。术毕均行PCA。观察术后24h内病人镇痛效果、镇静评分和恶心呕吐发生情况。【结果】两组间镇痛效果、镇静评分无明显差异（P〉0．05）。术毕组恶心发生率为35％,呕吐发生率为25％,均分别明显高于术前组的15％和7．5％,且差异均有显著性（P〈0．05）。【结论】术前地塞米松注射预防乳腺癌改良根治术后静脉芬太尼镇痛相关的恶心呕吐的效果优于术毕。     

大承气汤对失血性休克大鼠再灌注肠组织iNOS-NO-ONOO~-通路的影响

目的 观察失血性休克再灌注大鼠肠组织诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、过氧亚硝基阴离子(ONOO-)体内生成标志物硝基酪氨酸(NT)的表达,探讨中药大承气汤对失血性休克大鼠肠组织损伤的防治作用及其可能机制.方法 SD大鼠24只,雌雄各半,体重180～200 g.实验随机分为3组(每组8只):正常组(仅手术,不放血)、模型组(模型+生理盐水1 mL/100 g体重灌胃)、大承气汤组(模型+大承气汤灌胃含生药2.0 g/mL,1 mL/100 g体重).大承气汤、生理盐水在实验前连续灌胃,2次/d,连续2 d,各组动物术前禁食24 h.复制重度失血性休克及复苏动物模型,造模完成后观察各组动物肠黏膜病理学变化,免疫组化法检测肠黏膜组织iNOS与NT的表达与分布.应用ImageJ软件对免疫组化显色结果进行拍照、灰度分析.结果 病理检查结果显示:正常组肠黏膜正常,模型组肠黏膜损伤最重,大承气汤组肠黏膜损伤明显减轻;模型组小肠黏膜组织iNOS阳性细胞平均灰度值及NT阳性细胞平均灰度值均高于大承气汤组(P<0.01).结论 (1)失血性休克再灌注后,肠组织iNOS-NO-ONOO-通路表达上调.(2)大承气汤能减轻大鼠失血性休克再灌注肠黏膜损害,其机制可能与抑制肠黏膜组织iNOS-NO-ONOO-通路激活有关.     

重组前强啡肽基因35型腺病毒载体的构建

目的 构建含前强啡肽(PDP)基因的重组35型腺病毒载体(Ad5/F35).方法 以pUC57-PDP重组质粒为模板扩增PDP基因,将回收的聚合酶链反应(PCR)产物片段克隆入pDC316载体,获得重组质粒pDC316-PDP.骨架质粒pBHG-fiberS/35和穿梭质粒pDC316-PDP共转染293细胞,同源重组产生Ad5/F35-PDP.经PCR鉴定目的 基因的表达.结果 PCR表明Ad5/F35-PDP质粒构建正确.结论 获得的Ad5/F35-PDP可以用于转基因治疗的实验研究.     

携带前强啡肽基因的Ad5 F35重组腺病毒制备及鉴定

目的 用Ad5F35载体制备携带前强啡肽基因的重组腺病毒Ad5F35-PDP并对其进行鉴定.方法 利用NheI和Agel分别对合成的目的 基因prodynorphin聚合酶链反应(PCR)产物和pDC316-LacZ-a载体质粒进行双酶切.将PDP目的 基因片段和线性化的pDC316连接,克隆构建pDC316-PDP.pDC316-PDP与腺病毒骨架pBHG-fiber5/35共转染293细胞制备Ad5F35-PDP重组腺病毒,收获并纯化病毒,检测重组病毒滴度,运用PCR进行鉴定.结果 编码PDP的基因序列经测序鉴定证实与Gene Bank中的一致,pDC316-PDP构建成功.pDC316-PDP与腺病毒骨架共转染293细胞后见明显的毒斑,说明两者在293细胞中同源重组并包装成功.经PCR证实Ad5F35-PDP重组腺病毒构建完成.病毒滴度为1×1012v.P./ml.结论 本实验成功制备了含PDP全序列的高滴度、高纯度的Ad5F35-PDP重组腺病毒,为下一步进行该重组病毒生物安全性能和生物学功能研究及今后应用Ad5F35-PDP重组腺病毒对吗啡成瘾患者进行基因治疗奠定了基础.     

舒芬太尼给药模式对妇科腹腔镜手术病人术后麻醉恢复质量比较

目的研究舒芬太尼不同给药模式对妇科腹腔镜病人术后麻醉恢复质量的影响,探讨此类手术舒芬太尼较佳给药模式。方法选择60例妇科择期行腹腔镜手术患者,ASAⅠ～Ⅱ级,根据舒芬太尼给药模式随机分为两组:Ⅰ组为间断推注给药组,Ⅱ组为血浆靶控给药组。所有患者常规连续监测收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、心率(HR)、心电图(ECG)、呼末二氧化碳分压(PetCO2),分别记录两组患者手术时间、舒芬太尼用量、丙泊酚用量、呼吸恢复时间、睁眼时间、拔管时间、出手术时Ramsay镇静评分、VAS评分。结果Ⅰ组与Ⅱ组相比,舒芬太尼用量明显减少(P<0.05),丙泊酚用量差异两组无统计学意义(P>0.05),患者呼吸恢复时间、睁眼时间、拔管时间Ⅰ组均明显缩短(P<0.05),但出手术室时Ⅱ组Ramsay评分较高(P<0.05),VAS评分两组无统计学意义(P>0.05)。结论舒芬太尼两种常用的给药模式均能较好地应用于妇科腹腔镜病人,间断推注给药病人苏醒更快。