携带TPH-2基因小分子干扰RNA表达载体的构建与鉴定

目的 构建携带色氨酸羟化酶(TPH)-2基因的小分子干扰RNA表达载体.方法 设计并合成shRNA TPH-2对应的两条互补的寡核苷酸链,pU6-CMV-GFP质粒经Age Ⅰ和EcoRⅠ双酶切与退火后的寡核苷酸连接,目的 质粒转化感受态细胞,对长出的克隆应用菌落聚合酶链反应(PCR)鉴定,再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析.结果 经PCR、酶切及测序证实,pU6-CMV-GFP-TPH-2 shRNA表达载体片段大小为332 bp,其中插入的片段序列和位点与预期完全一致.结论 实验成功构建pU6-CMV-GFP-TPH2 shRNA表达载体.     

异丙酚对内毒素诱导人脐静脉内皮细胞过氧亚硝基阴离子生成的影响

目的 探讨异丙酚对内毒素诱导人脐静脉内皮细胞过氧亚硝基阴离子(ONOO-)生成的影响.方法 培养至活细胞计数大于95%的人脐静脉内皮细胞,随机分为7组(n=5),对照组(C组)不给予任何处理;LOS0.1组、LPS1组和LPS10组分别加入内毒素(LPS)至终浓度为0.1、1和10 μg/ml,于37℃5%CO2培养箱中孵育6 h;P4+LPS10组和P40+LPS10组预先加入异丙酚至终浓度为4、40μg/ml,I40+LPS10组预先加入脂质溶剂Introlipid至终浓度为40 μg/ml,于37℃ 5%CO2培养箱中孵育30 min,再分别加入LPS至终浓度为10μg/ml,于培养箱中继续孵育6 h.孵育6 h时,测定细胞活力和乳酸脱氢酶(LDH)释放率;采用免疫组化法和Western blot法测定硝基酪氨酸蛋白(NT)表达.结果 与C组比较,其余各组细胞活力降低,内皮细胞NT表达上调,LPS1组、LPS10组、I40+LPS10组、P4+LPS10组和P40+LPS10组LDH释放率升高(P<0.01);与LPS0.1组比较,LPS1组细胞活力、LDH释放率和内皮细胞NT表达差异无统计学意义(P>0.05),LPS10组细胞活力降低,LDH释放率升高,内皮细胞NT表达上调(P<0.01);与LPS10组比较,I40+LPS10组细胞活力、LDH释放率和内皮细胞NT表达差异无统计学意义(P>0.05),P4+LPS10组和P40+LPS10组细胞活力升高,LDH释放率降低,内皮细胞NT表达下调(P<0.01).结论 异丙酚可通过抑制ONOO'-的生成,减轻内毒素诱导人脐静脉内皮细胞损伤.     

输血与血液保护新认识

血液筛查技术的发展使输血的安全性得到很大提高,但输血风险并未得到根本解决。近期陆续发表的研究显示。输血使肝癌切除或其他外科重瘟病人的预蜃更差。1—2单位的小剂量输血同样可致不良预后。输用陈旧库血可使并发症和死亡率增加。创伤失血性休克输血也具风险。脑外伤的输血仍需评估。急性肺损伤成为输血的重要风险之一。输血未必能改善贫血冠心病人的预后．通过输血纠正术前贫血可能对病人产生“二次打击”。对血液保护策略提出新探索．包括建立术中出血预测模裂,贫血处理策略。择期手术输血策略等。理解这些新认识对于安全输血和血液保护无疑具有积极作用。     

心脏瓣膜置换术病人体外循环期间血浆内皮素、房钠利尿多肽和血流动力学变化

目的 了解体外循环（CPB）期间血浆内皮素（ET）、房钠利尿多肽（ANP）与血流动力学指标变化及其相互之间的关系。方法 用放射免疫法测定16例心脏瓣膜置换手术病人的术前及CPB期间血浆内皮素、房钠利尿多肽水平。结果 诱导前血浆ET为（2.68±1.8）pg/ml，与对照组[（2.22±0.7）pg/ml]相比无显著差异（P>0.05），而血浆ANP为（738±559）pg/ml，明显高于对照组[（72.7±14.5）pg/ml，P<0.001]。CPB期间血浆ET无明显变化，而血浆ANP在体外循环初期明显下降，停CPB时恢复至CPB前水平。CPB期间及停CPB时SVRI明显降低，血球压积（Hct）与血管阻力指数（SVRI）关系密切。结论 CPB期间血浆ET无明显变化，而血浆ANP下降为血液稀释所致，SVRI降低主要在于血液稀释。     

非洗涤式自体回输致急性肾功能衰竭1例

患者 ,男 46岁。因反复腰痛伴右下肢放射痛 8个月入院。入院后测血压为1 9～ 2 1 /1 2～ 1 6ｋＰａ ,心率 78次 /ｍｉｎ ,血常规、尿常规及血生化指标无异常。术前诊断为Ｌ5 Ｓ1椎间盘突出症、Ｌ5 椎峡部裂、高血压Ⅰ期。请心内科会诊后予心痛定、拜心通控制高血压 2周 ,至术前血压基本稳定在 1 5～ 1 7/9 5～ 1 2ｋＰａ ,择期在持续硬膜外麻醉行Ｌ5 半椎板切除、Ｌ5 Ｓ1Ｄｙｎａ-Ｌｏｋ椎弓根钉内固定术。术中用Ｓｏｒｅｎｓｏｎ自身输血系统回收手术野出血。术中麻醉效果满意 ,患者无诉不适。手术时间为 3ｈ ,血压波动在 1 6 5～ 1 4/8～…     

老年髋部手术患者围术期白细胞β2整合素表达的变化

目的探讨老年手术患者在麻醉和手术围期白细胞表面黏附分子表达情况.方法择期髋部手术老年患者20例,年龄75～88岁,采用流式细胞仪方法,在围术期多个时间点测定外周血白细胞黏附分子的表达.结果与麻醉前相比,手术结束时单核细胞系CD11b,CD18,CD11b/CD18及粒细胞系CD11b的阳性表达率显著增加(P<0.05);术后第1天单核细胞及粒细胞系的CD11b,CD18,CD11b/CD18的阳性表达率进一步升高,而淋巴细胞系的CD11b,CD18,CD11b/CD18的阳性表达率则较麻醉前显著降低(P<0.01);术后第3天三者均未完全恢复到术前水平.结论老年手术患者术后多个细胞系的β2整合素的表达发生显著变化,提示全身免疫功能发生异常改变.     

不同液体复苏对失血性休克-内毒素二次打击大鼠急性肺损伤的影响

目的 比较不同液体复苏对失血性休克-内毒素二次打击大鼠急性肺损伤的影响.方法 60只雄性SD大鼠,体重250～280 g,随机分为5组(n=12):假手术组(S组)、失血性休克-内毒素组(SL组)、乳酸钠林格氏液组(LR组)、7.5%氯化钠组(HS组)和羟乙基淀粉(HES)130/0.4组(HES组).分为院前期(90 min)、院内复苏期(1 h)和复苏后观察期(3.5 h).院前期:SL组、LR组、HS组和HES组颈总动脉放血建立失血性休克模型(维持MAP 35～45 mm Hg 60 min)后,气管内注射内毒素2mg/kg,同时断尾,注射内毒素后即刻分别经30 min静脉输注3倍放血量的乳酸钠林格氏液、7.5%氯化钠4ml/kg和等放血量的6%HES 130/0.4;院内复苏期:结扎尾部断端止血,在1 h内回输全部放出的血液及等放血量的0.9%氯化钠;复苏后观察期3.5 h时采集动脉血样,进行血气分析,计算肺组织湿/干重量比(W/D)和肺通透指数(PPI),测定肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度和肺组织AQP-1 mRNA和AQP-5mRNA表达水平,光镜下观察肺组织病理学结果,记录大鼠存活情况.结果 与SL组和LR组比较,HS组和HES组MAP、pH值、PaO2和SaO2升高,血乳酸浓度、BE、W/D、PPI和BALF蛋白浓度降低,HS组肺组织AQP-1 mRNA表达上调,HES组肺组织AQP-1 mRNA和AQP-5 mRNA表达上调,大鼠存活率升高(P＜0.05或0.01);与HS组比较,HES组W/D降低,AQP-5 mRNA表达上调,大鼠存活率升高(P＜0.05),肺组织损伤程度减轻.结论 6%HES 130/0.4和7.5%氯化钠可减轻失血性休克-内毒素二次打击大鼠急性肺损伤,6%HES 130/0.4的效果更好,其机制与抑制AQP-1和(或)AQP-5表达下调有关;而乳酸钠林格氏液对其无效.     

冠脉搭桥术中麻醉处理对血液动力学的影响

冠心病病人由于心血管功能受损 ,麻醉手术期间的血液动力学常不易维持稳定。为探索冠脉搭桥术中麻醉处理对血液动力学的影响 ,对一组病人进行了观察研究。资料和方法择期行冠脉搭桥手术病人 2 1例 ,男19例 ,女 2例 ,平均年龄 (6 3 7± 8 8)岁。其中合并心肌梗塞者 7例 ,室壁瘤 2例 ,高血压病 4例 ,脑梗塞 1例 ,二尖瓣或主动脉瓣病变各 1例。手术类型 :冠脉搭桥 4支 13例、5支 3例、6支 1例 ,搭桥 2支加室壁瘤切除术 2例 ,搭桥 3支加主动脉瓣置换及搭桥 4支加二尖瓣置换各1例。麻醉诱导前局麻下桡动脉穿刺监测动脉压 ,同时经右颈内静脉穿刺置…     

艾司洛尔对脑血管及体循环血流动力学的影响

目的　观察艾司洛尔 (esmolol,ESM)在无气管插管刺激的条件下对患者脑血管血流动力学指标(CVDI)、心率 (HR)、血压 (BP)的影响。方法　 5 4例患者 ,随机分为A、B两组 ,分别静注ESMlmg/kg、2mg/kg ,于注药前 1min ,注药后 1、5、10min ,检测病人CVDI、HR、BP。结果　A、B两组在注药前后各时点CVDI、体循环血压(BP)的两两比较无统计学差异 (P >0 0 5 ) ;两组相同时机CVDI、BP的两两比较亦均无显著性差异 (P >0 0 5 )。A、B两组注药前后的HR两两比较 ,唯注药前 1min与注药后 1min有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,A、B两组同时点的两两比较 ,唯注药后 1min有显著性差异 (P =0 0 17) ,其它时点差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　静注ESMlmg/kg、2mg/kg不对脑血管产生作用、亦不影响体循环血压 ;注药前与注药后 1min有减慢心率的作用 ,静注ESM 2mg/kg作用更明显     

坐位全身麻醉对肺血液动力及肺内分流的影响

目的 观测神经外科手术中坐位全身麻醉对肺血液动力及肺内分流（Ｑｓ／Ｑｔ）的影响。方法 ２８例后颅窝及后颈髓手术病人，采用静脉复合诱导、吸入七氟醚或安氟醚及伍用芬太尼维持麻醉，以Ｓｗａｎ－Ｇａｎｚ导管和动脉、混合静脉缺血气检测方法监测血液动力学和肺内分流状况，参数包括ＣＩ、ＲＡＰ、ＭＰＡＰ、ＰＣＷＰ、ＰＶＲＩ、ｐＨａ、ＰａＣＯ２、ＰａＯ２、ＰａＯ２／ＦｉＯ２及Ｑｓ／Ｑｔ。分别在麻醉前、坐位前、坐位后