表达TIPE2腺病毒载体的构建及其对结肠癌细胞增殖的影响

目的结肠癌的发生与结肠慢性炎症密切相关。TIPE2(tumor necrosis factor-α-induced protein 8-like 2)是一种炎症和免疫平衡的调节因子。本实验旨在构建表达TIPE2的腺病毒载体,并初步观察其对结肠癌细胞增殖的影响。方法将TIPE2-cDNA定向克隆至转移质粒pShuttle-CMV多克隆位点,然后与病毒骨架质粒pAdc68重组,在HEK293细胞中包装成完整病毒并复制扩增、纯化,获得表达TIPE2的重组腺病毒载体,命名为Adc68-TIPE2。实时荧光定量PCR及Western blot检测病毒感染后TIPE2在结肠癌细胞系HT29及SW620中的表达,MTT法检测TIPE2对结肠癌细胞增殖的影响。结果重组腺病毒载体Adc68-TIPE2构建成功。病毒感染后TIPE2可在结肠癌细胞系HT29及SW620中高效表达。以不同浓度Adc68-TIPE2(分别为108 vp/ml、109 vp/ml、1010 vp/ml)感染HT29及SW620细胞48 h后,HT29细胞的增殖率分别为93%、71%、14%。与空载体相比差异有统计学意义(P<0.05);SW620增殖率分别为89%、53%、10%。与空载体相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论本研究成功构建表达TIPE2的腺病毒载体Adc68-TIPE2,Adc68-TIPE2可抑制结肠癌细胞增殖。     

血清CEA、CA125联合CA199对晚期肝内胆管细胞癌患者预后的预测作用

目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)联合糖类抗原199(CA199)对晚期肝内胆管细胞癌(ICC)预后的预测作用。方法回顾性分析2015年1月～2018年1月医院收治的120例ICC患者的临床资料,根据随访1年内病情是否进展和死亡将患者分别纳入预后良好组和不良组;对比预后良好组和不良组患者血清CEA、CA125、CA199水平,并对比2组其他可能导致预后不良影响因素的差异,采用Logistic回归分析法明确相关危险因素;绘制受试者工作曲线(ROC),分析血清CEA、CA125、CA199检测及联合检测对晚期ICC患者预后不良的预测意义。结果随访1年内,共91例患者发生预后不良,其中72例死亡、19例进展生存,预后不良发生率为75.83%。预后不良组血清CEA、CA125、CA199水平高于预后良好组,且差异均有统计学意义(P0.05);2组性别、年龄、肿瘤直径、合并肝炎、合并肝硬化、Child-Pugh分级、治疗方式、不同血AFP水平患者构成比比较,差异均无统计学意义(P0.05),预后不良组多发肿瘤、低度分化、TBIL171 μmol/mL患者构成比均高于预后良好组,且差异均有统计学意义(P0.05);经Logistic回归分析发现,CEA9.67 ng/mL、CA12593.23 U/mL、CA199120.11 U/mL、多发肿瘤、低度分化、TBIL171 μmol/mL均是导致晚期ICC患者预后不良的独立危险因素(P0.05);血清CEA、CA125、CA199预测晚期ICC患者预后不良最佳截断点分别为9.67 ng/mL、93.23 U/mL、120.11 U/mL;血清CEA、CA125、CA199联合检测预测预后不良的灵敏度、特异度和准确度均高于单独检测,且联合检测预测预后不良的AUC为0.832,高于单独检测。结论 CEA、CA125、CA199与晚期ICC患者预后不良关系密切,且与单独检测血清CEA、CA125、CA199相比,联合检测3种血清学指标对晚期ICC患者预后预测价值更高。