苦参碱对人结肠癌SW620细胞增殖及RhoA基因表达的影响

目的 研究苦参碱对人结肠癌SW620细胞增殖及Rho A基因表达的影响。方法 利用Cell Counting Kit-8检测不同浓度苦参碱对人结肠癌SW620细胞的增殖抑制作用,利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率,RT-PCR检测SW620细胞内Rho A mRNA表达的水平。结果 苦参碱能明显抑制SW620细胞的增殖,呈现剂量和时间依赖性关系,随着浓度增加能使SW620细胞的凋亡率增加,并且使SW620细胞内Rho A mRNA表达下降。结论 苦参碱能显著抑制人结肠癌SW620细胞的增殖,其作用机制可能与诱导细胞凋亡、下调Rho A mRNA的表达有关。     

北京地区2007-2008年G9型A组人轮状病毒VP7和VP4基因分析

目的 了解北京地区2007-2008年检测到的G9型A组人轮状病毒外壳蛋白VP7和VP4的基因特征.方法 选取经过轮状病毒核酸杂交方法检测为G9型轮状病毒的12份儿童腹泻患儿的粪便标本,应用针对VP7全长基因的特异引物对进行RT-PCR扩增,对所获得的VP7全长基因进行克隆和测序,将所获得的序列与GenBank中的G9型原型病毒株和近期流行株的VP7基因进行序列和种系进化分析;经巢式PCR对G9型的VP4进行P基因分型.结果 12株G9型轮状病毒经VP7基因的序列比较分析得到确认.P基因分型结果显示北京地区近年来存在G9P[8]和G9P[6]型两种组合的轮状病毒感染.序列和种系进化分析发现北京G9型株VP7基因与世界范围内近期流行的G9型株一样都属于进化分支Ⅲ,彼此间的核苷酸和氨基酸同源性较高,而与国内最早报道的G9型T203进化关系较远,且北京G9P[8]和G9P[6]型株分别与国内近期报道的新疆G9P[8]和G9P[6]型株及相应的武汉G9型株VP7基因,在氨基酸位点上存在一些共同的氨基酸残基取代.结论 北京地区近年存在G9P[8]和G9P[6]两种不同基因组合的G9型轮状病毒感染,需要进一步加强对G9型轮状病毒的分子流行病学监测.     

牙齿萌出后再补钙有用吗

有的孩子患龋率非常高,几乎口内所有的牙都有龋。医生在检查时发现患儿的牙齿表面有黄白色的斑块,甚至有釉质缺损,告诉家长说:您的孩子的牙在发育时可能缺钙,因而造成釉质钙化不良。     

A组轮状病毒广州地方株VP7基因序列的比较分析

目的 了解我国轮状病毒G1型广州地方株与标准株及北京G1型地方株VP7基因序列的差异，为我国轮状病毒疫苗的研制提供资料。方法 通过逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)获得了轮状病毒广州地方株R97—196 VP7全基因的cDNA片段，将其克隆入T—A克隆质粒pUCm—T中，构建成重组质粒pUCmT—VP7，对克隆的VP7基因进行序列测定。结果 该地方株的基因核苷酸全长为1062nt，读码框架和以往的研究一致，和北京G1型地方株173的VP7氨基酸序列具有高度同源性(98％)，而与不同血清型标准株间则变异较大(73％—81％)，氨基酸序列中存在的一些高变区和保守功能区与已报道的研究结果一致。从进化角度分析，与轮状病毒标准株Wa株，相距较远。结论 轮状病毒广州地方株R97—196 VP7基因片段属G1型，轮状病毒VP7基因的变异与地域有一定关系。     

北京地区婴幼儿人类杯状病毒感染状况及型别分析

目的 研究人类杯状病毒与北京地区婴幼儿急性腹泻的病原关系。方法 用RT－PCR检测了婴幼儿非细菌性腹泻患儿粪便标本中的杯状病毒核酸，并用地高辛标记的不同型人类杯状病毒的cDNA(NLV基因型Ⅱ型探针CR840和SLV探针A141）作为探针，用斑点杂交对阳性标本进行分型。结果 从233份标本中检测出阳性标本58份（阳性率24.9%）：6个月以下的幼儿阳性19份，占阳性标本总数的32.8%，7－12个月的婴儿阳性15份，占总阳性标本总数的25.9%,1-2岁的幼儿阳性9份，占总阳性标本总数的15.5%，2－3岁的阳性5份，占总阳性标本总数的8.6%,3－4岁的阳性4份，占总阳性标本总数的6.9%，5岁以上的儿童的阳性6份，占总阳性标本总数的10.2%，杂交阳性标本共29份，占50.0%：A141探针杂交阳性的标本14份，占24.1%，CR840探针杂交阳性的标本8份，占13.8%，A141和CR840探针杂交均为阳性的标本7份，占12.1%。结论 我国婴幼儿腹泻与人类杯状病毒感染有关，北京地区儿童中存在多种型别杯状病毒的感染，同时显示不同基因型的杯状病毒基因序列之间的差异可以用杂交分型的方法加以区别。     

间接荧光法测定特异性IgM在呼吸道合胞病毒感染早期快速诊断中的应用

呼吸道合胞病毒(RSV)为婴幼儿严重下呼吸道感染的重要病原。常规的病原诊断方法是取病人鼻、咽拭子或鼻咽部吸出物作病毒分离和/或取病人双份血清作抗体测定。由于RSV易灭活,分离阳性率低,分离鉴定所需时间长,与双份血清抗体测定一样,仅能提供回顾性诊断。国外目前所用RSV早期快速诊断的方法是用直接或间接免疫荧光法检测咽部脱落细胞     

腹泻患儿粪便标本中腺病毒PCR检测方法的建立

.0%.结论 成功建立PCR法可一次快速检出患儿粪便标本中的腺病毒,并区分F组和非F组型别,有望用于开展常规粪便标本腺病毒检测,并为肠道腺病毒流行病学的研究提供参考.     

改进探针标记法斑点杂交在轮状病毒VP7分型中的应用

目的建立一种更加简便的A组人轮状病毒（HRV）核酸斑点杂交VP7分型方法,以便用于对HRV流行情况进行调查。方法在HRV VP7编码基因各G基因型间高度变异而型内高度保守区域设计分型探针,在该区域的两侧相对保守区域设计一对通用引物,利用PCR分别将地高辛标记HRV 5种常见型别（G1～4,G9型）的DNA探针,建立基于VP7的斑点杂交方法;选取经抗原检测和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测均为HRV阳性的2006至2008年住院腹泻患儿粪便标本200份,RT-PCR扩增VP7全基因,并对扩增阳性产物应用斑点杂交方法进行G型别分析。结果建立的斑点杂交方法在5种型别探针间无交叉反应,各型探针的检测灵敏度可达到10 pg。200份PAGE阳性标本中162份RT-RCR扩增VP7基因阳性,斑点杂交显示G1型41例(25.3%),G2型2例(1.2%),G3型63例(38.9 %),G9型35例(21.6%),混合感染19例（11.7%）,杂交未分出型2例(1.2%),未检测到G4型HRV。结论本研究所建立的斑点杂交方法敏感度和特异度强,适合在HRV大规模分子流行病学调查时应用。通过该方法的初步应用,发现北京地区婴幼儿HRV除了常见的G1、G2和G3型外,还有G9型感染。     

雌激素受体α变异体36在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的 探讨雌激素受体α的变异体ERα-36在人乳腺浸润性导管癌中的表达及其与临床分期、淋巴结转移、ERα-66、孕激素受体(PR)、表皮生长因子受体2(Her2)的关系.方法 应用免疫组织化学SP法,检测33例乳腺浸润性导管癌组织ERα-36的表达,并与此组患者术后病检采用SP法检测的ERα-66、PR及Her2的表达进行相关分析.结果 ERα-36、ERα-66、Her2和PR在33例人乳腺浸润性导管癌中的阳性率分别为66.7%、51.5%、45.5%和60.6%.ERα-36的阳性表达率与ERα-66、PR、Her2、临床分期无明显相关性(P均>0.05).ERα-36的表达与淋巴结转移呈负相关(rs=-0.368,P<0.05).结论 ERα-36在多数人乳腺浸润性导管癌中表达.ERα-36表达与ERα-66、PR、Her2无相关性.     

北京市某些医院内腹泻暴发与诺如病毒的相关性研究

目的确定2006年11-12月北京市某些医院内发生的住院患者腹泻爆发性流行的病原及其分子生物学特点。方法首先检测腹泻标本中轮状病毒抗原并用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行轮状病毒核酸检测,然后用逆转录-聚合酶链反应进行诺如病毒核酸检测,对检测阳性标本进行诺如病毒VP1全基因的扩增;并对其中一例进行全基因克隆、测序和分析。另外对来自不同医院的2份阳性标本中的VP1的5′端部分序列进行测序分析。结果30份腹泻患者粪便标本中共有17份检测为诺如病毒阳性,总阳性率为56.7%,每一家医院送检标本的阳性率都在42.9%以上。对其中一份标本的诺如病毒VP1全基因序列测定和分析显示为GⅡ-4型诺如病毒。另2份标本中的部分序列测定显示与全基因序列高度保守,只有1个核苷酸的差异,因此也提示为GⅡ-4型诺如病毒。结论诺如病毒是北京地区医院内腹泻暴发的重要病原,此次暴发极可能是由GⅡ-4型诺如病毒引起。