苦参碱对人结肠癌SW620细胞增殖及RhoA基因表达的影响

目的 研究苦参碱对人结肠癌SW620细胞增殖及Rho A基因表达的影响。方法 利用Cell Counting Kit-8检测不同浓度苦参碱对人结肠癌SW620细胞的增殖抑制作用,利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率,RT-PCR检测SW620细胞内Rho A mRNA表达的水平。结果 苦参碱能明显抑制SW620细胞的增殖,呈现剂量和时间依赖性关系,随着浓度增加能使SW620细胞的凋亡率增加,并且使SW620细胞内Rho A mRNA表达下降。结论 苦参碱能显著抑制人结肠癌SW620细胞的增殖,其作用机制可能与诱导细胞凋亡、下调Rho A mRNA的表达有关。     

RhoE对cd44基因启动子的转录活性及大肠癌细胞系恶性生物学行为的影响

目的研究RhoE对cd44基因启动子的转录调控,并探讨RhoE对裸鼠体内成瘤性的影响。方法采用PCR技术从人胚肾HEK293细胞中扩增出cd44启动子,并将其插入荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic中,经测序确定所扩增的DNA序列,并将其转染入SW480及LoVo细胞中监测其活性。将pcDNA3.1-RhoE和pcDNA3.1分别与pGL3-CD44 promoter共转染大肠癌LoVo细胞和SW480细胞,双荧光素报告基因检测活性。另外将pcDNA3.1-RhoE和对照组分别稳定转染LoVo细胞和SW480细胞,并将筛选的稳定表达的细胞分别接种裸鼠,观察肿瘤的生长;用免疫组化的方法检测RhoE对肿瘤组织细胞形态及CD44分子表达的影响。结果测序结果表明,扩增的cd44启动子序列正确,双报告基因实验检测荧光素酶活力表明构建的报告基因具有启动子活性。含cd44启动子序列的报告基因在pcDNA3.1-RhoE阳性的LoVo细胞中表达受到抑制;HE染色显示pcDNA3.1-RhoE转染组较对照组肿瘤细胞明显变小,且大小和形态呈现一致性,已没有瘤巨细胞,相应的肿瘤细胞核的体积也变小。结论 RhoE通过抑制cd44...     

胃肠道间质瘤的分子靶向治疗进展

胃肠道间质瘤（GIST）是胃肠道最常见的间叶组织源性肿瘤,约80％～90％胃肠道间质瘤发病机制为c—kit基因突变,导致KIT蛋白异常活化,引起肿瘤细胞不受控制的增殖。5％～10％的患者发病机制与血小板衍生生长因子α（PDGFRα）基因突变有关,5％的患者没有发现基因突变（野生型胃肠道间质瘤）。     

新铂类药物双环铂对8种结肠癌耐药细胞的化疗敏感性分析

目的用双环铂对8种耐奥沙利铂或伊立替康结肠癌耐药细胞及其原代细胞作化疗敏感性研究,为扩大该新药的临床应用范围,给耐药结肠癌患者提供更多化疗选择奠定基础。方法将8种耐奥沙利铂或伊立替康结肠癌耐药细胞系及其原代细胞系-COLO320与COLO320/OHP,COLO320与COLO320/CPT,SW620与SW620/OHP,SW620与SW620/CPT,SW480与SW480/OHP,SW480与SW480/CPT,LOVO与LOVO/OHP,LOVO与LOVO/CPT配对培养于96孔板。按从低到高的浓度加入双环铂作用一段时间后做3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)细胞毒性试验,计算各原代及耐药细胞的IC50、耐药指数及临床用药浓度下对各耐药细胞的抑制率,分析双环铂对上述耐药细胞的疗效。结果 8种结肠癌耐药细胞对双环铂的耐药指数均为1.10～2.46,而各细胞系原有耐药指数在10.16～25.87,且双环铂对8种中的7种耐药细胞均敏感,对其中1种细胞系具有高度化疗敏感性,3种中度敏感,3种低度敏感,1种不敏感。结论多数耐奥沙利铂/伊立替康的结肠癌耐药细胞(7/8)对双环铂具有不完全交叉耐药性,可以考虑将其作为临床耐药结肠癌患者的另一化疗选择。     

华蟾素对人胃癌SGC7901细胞增殖及Rho GTPase表达的影响

目的 研究华蟾素对人胃癌SGC7901细胞增殖及Rho GTPase表达的影响.方法 将人胃癌SGC7901细胞分为华蟾素组和对照组,利用Cell Counting Kit-8检测(0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL)华蟾素组和对照组的人胃癌SGC7901细胞的增殖抑制情况,利用Western blot和RT-PCR分别检测不同浓度(0.5、1.0、2.0 ng/mL)华蟾素组和对照组的人胃癌SGC7901细胞内Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)蛋白和mRNA表达的水平.结果 与对照组相比,0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL华蟾素组对SGC7901细胞均具有增殖抑制作用(P＜0.05).0.5、1.0、2.0 mg/mL华蟾素组的SGC7901细胞内Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)蛋白和mR-NA表达明显降低且呈剂量依赖性(P＜0.05).结论 华蟾素抑制胃癌SGC7901的增殖的机制可能与下调Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)信号通路的表达有关.