耐两性霉素B的近平滑与热带假丝酵母菌的体外诱导及耐药分子机制研究

目的：体外诱导近平滑假丝酵母菌（ CP）、热带假丝酵母菌（ CT）对两性霉素B（ AMB）的耐药株,检测其中的耐药基因表达情况。方法 AMB体外构建耐药株,用实时荧光定量PCR法检测耐药基因的表达水平。结果 CP、CT 野生株经体外 AMB 浓度递增法诱导后,形成耐药株最低抑菌浓度（ MIC,≥8μg? mL－1）;CYP51A、CYP51B、CDR1、CDR2、MDR1及MDR2基因在野生株中低水平表达,在耐药株中表达水平明显升高,差别有统计学意义（ P ＜0．05）;CYP51A、CYP51B、CDR1、CDR2、MDR1及MDR2的表达量在CPAMB耐药株中分别是其野生株的136．92,16．33,2．07,14．84,4．07,2．38倍;在CT AMB耐药株中分别是其野生株的8．83,2．98,3．00,2．40,2．30,3．57倍。结论 CP、CT对AMB耐药与CYP51A、CYP51B、CDR1、CDR2、MDR1及MDR2基因过度表达有关。     

巢式MS-PCR法检测恶性血液病细胞株APC基因启动子甲基化状态

本研究旨在应用巢式甲基化特异性PCR（nMS—PCR）法检测10种恶性血液系统肿瘤细胞株APC基因启动子的甲基化状态,并探究其在肿瘤发生发展中的作用,同时筛选出APC基因启动子高甲基化的肿瘤细胞株,将其作为研究基因甲基化与表达关系的细胞模型。采用nMS—PCR扩增亚硫酸盐修饰后的10种肿瘤细胞株基因组DNA,检测其APC基因启动予区CpG岛的甲基化状态。结果表明,CA46、U266、Molt4、K562、HL-60、CEM、AKR、U937、Raji细胞的APC基因启动子区均未甲基化,而Jurkat细胞的APC基因启动子区出现甲基化。结论：用nMS—PCR可以准确地检测出恶性血液病细胞株APC基因的甲基化状态,该方法操作简便,可用于检测各种肿瘤细胞基因的甲基化状态。     

MicroRNA-143在急性白血病患者与正常人骨髓细胞中的差异表达及意义

microRNA(miR)与急性白血病的发生密切相关.为分析急性白血病患者与正常人骨髓细胞中miR-143的差异表达情况,常规提取50例急性白血病患者及20例正常人骨髓细胞中的总RNA,应用实时荧光定量PCR的方法检测标本中miR-143的表达状况.结果表明:急性白血病患者骨髓细胞中miR-143表达明显下调(p<0.05);化疗缓解后表达明显上调;miR-143的表达与靶基因DNMT3A呈负相关.结论:miR-143在白血病病人骨髓细胞中的表达下调,这可能与白血病的发生发展有关.     

MTSS1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨转移抑制因子1（MTSS1）在非小细胞肺癌（NSCLC）发生发展中的作用及临床价值。方法 收集本院2006年3月至2008年3月存档的98例NSCLC石蜡标本,构建组织芯片并采用免疫组织化学法检测98例NSCLC组织及对应癌旁组织中MTSS1的表达,分析其与临床病理参数（年龄、性别、淋巴结转移、病理类型、分化程度和TNM分期）的关系;随访不同MTSS1表达者的生存情况;构建pcDNA3.1-MTSS1表达载体（pcDNA3.1-MTSS1组）和pcDNA3.1空载体（pcDNA3.1组）并分别转染肺癌A549细胞,采用Western blotting法检测两组MTSS1的蛋白水平,采用四甲基偶氮唑盐MTT法和划痕试验检测两组细胞的增殖与迁移情况。结果 癌组织中MTSS1阳性表达率低于癌旁组织（56.1％ vs. 100.0％;P＜0.05）,MTSS1的表达与性别、年龄、分化程度和病理类型均无关,而与淋巴结转移和TNM分期有关（P＜0.05）;MTSS1阳性表达者的中位总生存期为40.9个月,高于阴性表达者的21.5个月,差异有统计学意义（P＜0.05）。Cox多因素分析显示MTSS1表达是影响NSCLC患者预后的独立因素。pcDNA3.1-MTSS1组的MTSS1蛋白水平高于pcDNA3.1组,且增殖比例和迁移率均低于pcDNA3.1组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 MTSS1缺失表达在NSCLC的发生发展过程中发挥了重要作用,逆转MTSS1的表达有助于肺癌的防治。     

第380例——反复面色苍白伴皮肤黄染,头痛、鼻塞

病历摘要 患者男,57岁.因反复面色苍白伴皮肤黄染3个月,头痛、鼻塞5 d,于2009年1月13日入院.患者2008年10月始无诱因出现面色苍白伴皮肤黄染,排茶色尿,在我院查血象:WBC 35.9×109/L,RBC 1.53×1012/L,Hb 47g/L,PLT218×109/L,网织红细胞0.452.     

大黄素逆转非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药的机制研究

目的 探讨大黄素逆转非小细胞肺癌（NSCLC）表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR TKI）耐药的作用机制。方法 应用持续诱导的方法构建NSCLC EGFR-TKI耐药细胞株HCC827／GR;应用MTS法检测大黄素（30μmol／L）、吉非替尼（1μmol／L）及两药联合处理HCC827和HCC827／GR细胞48h后细胞增殖能力的变化;应用Western blotting法检测HCC827和 HCC827／GR细胞中p EGFR、p-AKT、p-ERK1／2及p-MET蛋白表达水平的变化。结果 MTS法检测结果显示,经单药吉非替尼或大黄素处理后,HCC827／GR细胞增殖能力未减弱,而两药联合处理组的细胞增殖能力明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。Western blotting检测结果显示,HCC827、HCC827／GR细胞中p-EGFR、p-ERK1/2明显表达,而p-AKT表达微弱;HCC827／GR 中p-MET表达水平较HCC827明显上调。经单药吉非替尼处理后,HCC827细胞株p-EGFR、p-ERK1/2表达水平下调,HCC827／GR细胞株p-EGFR表达明显下调;大黄素可显著下调HCC827／GR细胞株p-MET表达,但对p-EGFR、p-ERK1/2的表达无影响;而大黄素与吉非替尼两药联用可明显抑制HCC827／GR细胞株p-EGFR、p-ERK1/2以及p-MET的表达。结论 大黄素可以逆转NSCLC EGFR-TKI耐药,可能是通过抑制c-Met的活化来实现。     

第380例——反复面色苍白伴皮肤黄染,头痛、鼻塞

病历摘要 患者男,57岁.因反复面色苍白伴皮肤黄染3个月,头痛、鼻塞5 d,于2009年1月13日入院.患者2008年10月始无诱因出现面色苍白伴皮肤黄染,排茶色尿,在我院查血象:WBC 35.9×109/L,RBC 1.53×1012/L,Hb 47g/L,PLT218×109/L,网织红细胞0.452.     

第380例——反复面色苍白伴皮肤黄染,头痛、鼻塞

病历摘要 患者男,57岁.因反复面色苍白伴皮肤黄染3个月,头痛、鼻塞5 d,于2009年1月13日入院.患者2008年10月始无诱因出现面色苍白伴皮肤黄染,排茶色尿,在我院查血象:WBC 35.9×109/L,RBC 1.53×1012/L,Hb 47g/L,PLT218×109/L,网织红细胞0.452.     

第380例——反复面色苍白伴皮肤黄染,头痛、鼻塞

病历摘要 患者男,57岁.因反复面色苍白伴皮肤黄染3个月,头痛、鼻塞5 d,于2009年1月13日入院.患者2008年10月始无诱因出现面色苍白伴皮肤黄染,排茶色尿,在我院查血象:WBC 35.9×109/L,RBC 1.53×1012/L,Hb 47g/L,PLT218×109/L,网织红细胞0.452.