抗NPM1单克隆抗体的制备

目的 制备并鉴定NPM1单克隆抗体.方法 利用纯化的NPM1融合蛋白作为抗原,通过常规的细胞融合技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA法筛选能出产生抗NPM1单克隆抗体的阳性细胞株,对抗NPM1单克隆抗体的特性进行分析.结果 筛选出1株产生抗NPM1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,产生的抗体为IgGl亚类,效价达1∶720000;纯化后经SDS-PAGE显示两条蛋白条带,纯度达95％以上,相对分子质量约为50000和25000,与单一抗体重链、轻链分子大小相符.免疫组化证实,纯化的2G7抗NPM1单克隆抗体可检测出NPM1在结直肠癌表达,阳性位点为细胞核.结论 制备的抗NPM1单克隆抗体可用于NPM1蛋白功能的研究与临床检测.     

利用组织芯片检测水通道蛋白1在乳腺癌组织中的表达

目的检测水通道蛋白1（AQP1）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法购买含有32对乳腺癌组织标本及癌旁正常乳腺组织标本的组织芯片,应用免疫组织化学方法检测AQP1的表达。结果乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织中AQP1的平均表达率分别为70.56±14.71%、18.64±8.54%,二者存在显著差异（P〈0.05）。结论 AQP1在乳腺癌组织中表达增高,AQP1可能与乳腺癌生长、转移有关。     

水通道蛋白AQP1、AQP3在神经鞘瘤中的表达

目的检测水通道13、在人外周神经肿瘤的表达。方法收集五例患者的神经鞘瘤组织,采用免疫组化方法检测AQP1、AQP3的表达。结果 AQP1、AQP3在神经鞘瘤组织中都有表达,AQP1主要表达在微血管中,AQP3在整个组织中广泛表达。结论首次发现AQP1在神经鞘瘤微血管中表达,可能参与肿瘤血管新生;AQP3在神经鞘瘤细胞广泛表达,可能通过增加肿瘤细胞膜的水通透性而促进肿瘤的生长及浸润。两种水通道蛋白表达量与肿瘤发生发展的关系尚待扩大标本例数结合临床资料进一步分析。     

以蛋白质组学方法筛选人源性大肠癌噬菌体抗体库

目的以蛋白质组学相关技术进行初步筛选人源性大肠癌Fab段噬菌体抗体库，建立一种寻找特异性大肠癌抗原蛋白及相应的噬菌体抗体的方法。方法以二维凝胶电泳分离大肠癌组织和正常大肠粘膜组织蛋白组并将获得的2-DE凝胶电转至PVDF膜。然后以大肠癌组织匀浆为靶抗原对我们构建的人源性大肠癌Fab段噬菌体初级抗体库进行三轮淘洗，再用富集抗体库和PVDF膜进行Westem—Blot印记实验。结果经Western—Blot印记实验我们发现了至少八个大肠癌表达而正常大肠粘膜不表达的有噬菌体抗体特异性结合活性的抗原蛋白。结论成功建立了双盲，双向，高通量筛选大肠癌特异性抗原及其相应噬菌体抗体的方法。     

金黄色葡萄球菌的耐药性分析及流行病学分型

目的 研究金黄色葡萄球菌(SAU)的耐药性及流行病学分型特点.方法 应用Microscan Walkaway96全自动细菌鉴定仪进行菌种鉴定及抗菌药物敏感性试验;应用脉冲凝胶电泳将随机选取的部分MRSA进行分子流行病学分型.结果 共分离497株金黄色葡萄球菌,未发现万占霉素及利奈唑胺耐药及中介的菌株,SAU对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶及氯霉素耐药率相对较低,分别为12.6％、5.9％ ;40株MRSA脉冲凝胶电泳分型共有6个分型,其中A型及其亚型最多,占47.5％,B型占20.0％,其余4个分型占32,5％.结论 万古霉素及利奈唑胺是对MRSA最为敏感的药物,医院MRSA分子流行病学分型以脉冲凝胶电泳分型A型及B型为主.     

骨髓增殖性肿瘤JAK2V617F基因突变的临床意义

蛋白质酪氨酸激酶是信号通路中的重要调控因子,也是重要的治疗靶标[1]。2005年,5个研究小组同时发现在费城染色体阴性骨髓增殖性肿瘤(MPN),即真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)及原发性骨髓纤维化(PMF)患者体内存在JAK2V617F突变[2]。JAK2V617F突变体的     

胶体金标记单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体的制备

目的制备胶体金标记单核细胞增生李斯特菌的单克隆抗体（McAb）,用于检测食品中的致病性单核细胞增生李斯特菌。方法以纯化的单核细胞增生李斯特菌（标准菌株号54001、54002）为抗原,免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体,建立胶体金标记的单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体的制备方法。结果筛选出2株单抗杂交瘤细胞株F5、F9,并获得免疫球蛋白,测定免疫球蛋白亚类为IgM。通过选用柠檬酸钠法制备胶体金标记单核细胞增生李斯特菌抗体,测定其最适蛋白结合浓度为12 g/ml。结论成功制备了胶体金标记的单核细胞增生李斯特菌的单克隆抗体,为建立食品中病原性单核细胞增生李斯特菌检测技术奠定基础。     

细胞因子信号转导抑制因子在直肠癌组织中的表达

目的 探讨人直肠癌组织中细胞因子信号转导抑制因子-3（SOCS-3）的表达.方法 应用RT-PCR法测定8例正常人直肠组织、16例直肠癌组织（青年组8例、老年组8例）中SOCS-3的表达.结果 与正常直肠组织比较,青年组、老年组病人直肠癌组织SOCS-3 mRNA的表达均呈降低趋势,老年组更为显著（P＜0.01）;老年组直肠癌组织SOCS-3 mRNA表达水平显著低于青年组（P＜0.05）.结论 SOCS-3基因在老年直肠癌的发生、发展中可能起着更为重要的作用.     

肾病综合征大鼠模型的建立及酶酚酸酯对其作用的实验研究

目的：研究酶酚酸酯（ＭＭＦ）对大鼠肾病综合征的治疗作用。为临床应用提供依据。方法：经尾静脉一次性注射阿霉素,构建大鼠肾病综合征动物模型。观察ＭＭＦ对大鼠肾病综合征血、尿生化指标、淋巴细胞电压依赖性钾通道及肾脏组织学改变的影响。并与强的松进行对照研究。结果：注射阿霉素１４ｄ。大鼠肾病综合征模型建立。模型鼠表现外周Ｔ淋巴细胞电压依赖性钾通道电流增强。ＭＭＦ治疗可使大鼠尿蛋白和血尿素氮明显下降。血白蛋白上升。肾脏病理显示足突无明显融合。疗效明显优于强的松治疗组。结论：在阿霉素诱导的大鼠肾病综合征模型的形成中,细胞免疫参与了其发病,ＭＭＦ能明显改善模型鼠的肾功能并减轻肾脏组织形态学损害。且疗效优于强的松。