在酵母中异源表达人破骨细胞钠氢转运蛋白

目的 在酿酒酵母中异源表达人破骨细胞分化成熟潜在因子钠氢转运蛋白2(HsNHA2),鉴定其作为盐离子载体转运Na+的功能,并对其在细胞中的表达进行初步定位分析.方法 采用高保真PCR试剂盒扩增出HsNHA2;构建酵母表达载体,通过电穿孔的方式转入到酿酒酵母菌株中;Western印迹检测其在酵母菌株的表达;通过NaCl选择压力观察菌株在高盐环境中的生长表型,并用根皮素抑制HsNHA2观察其抗盐功能;最后用细胞原位荧光染色确定HsNHA2在细胞中的表达位置.结果 Western印迹证实HsNHA2在酵母菌株中正常表达;生长曲线显示HsNHA2可使菌株在高盐环境中生长,根皮素抑制HsNHA2表达后菌株不能在0.2mol/L NaCl培养基中生长;免疫荧光染色初步证明HsNHA2表达在细胞膜上.结论 HsNHA2作为盐离子载体在酵母细胞中主要表达在细胞膜上行使转运Na+的功能,以维持细胞正常生长.     

适度低氧微环境对体外培养脑胶质瘤干细胞生长的影响

目的 探讨低氧微环境对脑胶质瘤干细胞(GSCs)凋亡及增殖的影响.方法 原代培养脑胶质瘤干细胞,特殊培养基筛选;将GSCs分常氧组(21％02)和低氧组(3％02),给予不同的氧浓度,倒置显微镜下观察细胞形态、荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞凋亡、MTT法检测细胞增殖情况.结果 倒置显微镜下可见低氧组细胞较常氧组生长更好;荧光显微镜下2组细胞的胞核形态完好,无凋亡像;流式细胞仪检测,与常氧组相比,低氧组细胞凋亡率无差异(P＞0.05);MTT示:于72 h、96 h及120 h时低氧组较常氧组明显增殖(P＜0.05).结论 适度低氧不会诱导脑胶质瘤干细胞凋亡;适度低氧微环境对胶质瘤干细胞有促增殖作用.     

经阴道与开腹子宫肌瘤剔除术对机体免疫功能影响的比较

目的探讨经阴道子宫肌瘤剔除术对机体免疫功能的影响。方法 2008年5月～2010年12月选择经阴道与开腹子宫肌瘤剔除术各40例,测定2组术前、术后24 h和术后72 h机体免疫球蛋白IgG、IgM、IgA,T细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋。结果经阴道组手术前后免疫球蛋白差异无统计学意义（P〉0.05）。开腹组术后24 h IgG、IgM较术前降低（P〈0.05）,且显著低于经阴道组（P〈0.05）,术后72 h恢复至术前水平（P〉0.05）。2组术后24 h CD3＋、CD4＋均较术前下降（P〈0.05）,但2组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。术后72 h经阴道组CD3＋、CD4＋上升至接近术前水平（P〉0.05）,而开腹组CD4＋仍低于术前水平（P〈0.05）,且显著低于经阴道组（P〈0.05）。结论经阴道子宫肌瘤剔除术比开腹手术对机体免疫抑制小,有利于患者的恢复。     

盐霉素与抗肿瘤药物联合应用研究进展

盐霉素(salinomycin;Sal)作为一种新型的靶向杀伤肿瘤干细胞药物,已成为当今的研究热点,其抗肿瘤活性较紫杉醇强约100倍。多药耐受是影响肿瘤化疗效果的一项重大因素。盐霉素能克服肿瘤细胞对化疗药物的耐受,提高传统化疗药物的敏感性,与多种抗肿瘤药物联合应用表现出协同效应,并能诱导多药耐受的肿瘤细胞凋亡。本文系统阐述了盐霉素联合其他抗肿瘤药物的药效学研究机制,以期为临床上以盐霉素为核心的联合化疗提供参考。     

大鼠脑出血后血肿周围组织中p75NTR表达及其与凋亡的时相性研究

目的 通过大鼠脑出血模型,探讨脑出血后不同时期p75NTR的变化规律及与细胞凋亡的关系.方法 采用大鼠脑出血模型,检测血肿周围凋亡细胞的比例,p75NTR的蛋白表达水平.结果 血肿周围6h即可见细胞凋亡,72 h达高峰,10d仍可见较高比例的凋亡细胞,与对照组比较有显著统计学差异(P＜0.01).实验组及对照组均可检测出p75 NTR蛋白和RNA表达,但各实验组与对照组比较有显著统计学差异(P＜0.05),尤以72 h为著(P=0.000).发现除6h组外,其余各组的p75NTR的RNA表达水平与凋亡比例呈正相关(P ＜0.001).结论 大鼠脑出血模型中血肿周围组织p75NTR蛋白和RNA表达水平增加,且与凋亡规律一致,24 h后RNA表达与细胞凋亡正相关.     

颈动脉体瘤的影像学诊断

目的 探讨CT、MRI、DSA检查在颈动脉体瘤诊断中的价值.方法 病理证实的10例颈动脉体瘤,其中4例行MRI T1WI、T2WI及对比增强MRA,6例行CT平扫加增强扫描,10例均行DSA和TBO试验.结果 10例术前CT、MRI、DSA均诊断为颈动脉体瘤,与临床及病理诊断符合率为100%.10例病变均位于颈动脉分叉处.CT平扫主要表现为均匀性低密度球形病灶,CT值25～37 Hu.MRI的特征为T1WI、T2WI均为高信号,中心有流空信号,MRA均清楚显示出病变的部位、大小、形态及血流动力学的特点.DSA表现为肿瘤包绕颈动脉,颈动脉分叉角度增大,肿瘤均匀染色,可显示供血动脉.结论 CT、MRI和DSA均有特征性表现,诊断比较容易,若将三种方法优化组合,可优势互补,为制定最佳手术方案提供科学、准确而全面的依据.     

破骨细胞钠氢转运蛋白集中于线粒体中表达

目的：把RAW264.7和人外周血CD14+ 诱导成破骨样细胞,检测破骨细胞在成熟过程中钠氢转运蛋白2（Na+-H+ An－tiporter 2,NHA2）的转录表达情况,并定位其表达位置。方法：细胞因子RANKL、M-CSF在体外诱导RAW264.7和人外周血CD14+细胞发育成破骨样细胞;RT-PCR检测NHA2在诱导过程中转录水平上所发生的变化;Western blot检测诱导前后此蛋白表达情况;细胞原位荧光染色对其表达进行细胞精确定位。结果：RAW264.7和人外周血CD14+ 细胞被RANKL、M-CSF诱导成破骨样细胞;RT-PCR结果显示NHA2随着破骨细胞的分化成熟转录水平不断加强;Western blot结果显示此蛋白只表达于成熟的破骨细胞中;细胞原位荧光染色结果显示这个蛋白主要表达于成熟破骨细胞的线粒体中。结论：NHA2作为盐离子载体主要表达于成熟破骨细胞的线粒体中,通过控制线粒体盐离子的代谢平衡来影响破骨细胞的发育分化     

涎腺粘液表皮样癌诊断与治疗

目的：探讨涎腺黏液表皮样癌的诊断、治疗及疗效。方法：收集2001～2008年收治的20例涎腺黏液表皮样癌病例资料进行回顾分析。结果：20例黏液表皮样癌中腮腺13例（65%）,副腮腺1例（5%）,腭部2例（10%）,颌骨2例（10%）,颌下腺1例（5%）,颊黏膜1例（5%）。其中11例为高分化,4例为中分化,1例为低分化,其余未分级。20例患者均行手术切除（切除范围视肿瘤部位及分级而定）,其中4例行同侧颈部选择性淋巴清扫术,17例行术后放疗。3例因面神经受累同时切除面神经,其中1例行面神经吻合术,1例行耳大神经移植术,手术半年后患者面神经功能恢复良好。随访1～5年,失访2例,平均随访时间2.44年。获随访的18例均无复发。结论：手术切除时应重视原发灶切除的彻底性,在疑有颈部淋巴结转移时应同期进行选择性颈部淋巴清扫术;对于术中切除不彻底,有颈部淋巴结转移,病理结果显示为中低分化病例应进行术后放疗。