纳米磷酸三钙复合人工骨的Ames致突变试验

目的 从基因角度探讨纳米磷酸三钙／胶原复合人工骨的遗传毒理学特性。以了解此复合人工骨的生物相容性，为其在骨缺损修复领域的临床应用提供依据。方法 将纳米级磷酸三钙（β－TCP）同胶原复合，制成纳米β－TCP／胶原复合人工骨，并制备浸提液，采用Ames致突变试验，以生理盐水为阴性对照，测试其对鼠伤寒沙门菌的致突变比值（MR＝实验组回变菌落数Rt／阴性对照组回变菌落数Rc）。结果 阳性对照组各菌株回变菌落平均数均超过其相应阴性对照组回变菌落平均数的二倍以上（MRp＞2)，此复合人工骨的浸提液各剂量组对鼠伤寒沙门菌的致突变比值MR均小于2。结论 纳米磷酸三钙／胶原复合人工骨不会引起鼠伤寒沙门菌的回复突变数增加，提示此人工骨不会引起基因突变。     

全国部分毒理学实验室现况调查

毒理学实验作为一种生物学实验，具有独特的专业特点，对实验室人员素质和管理水平要求相对较高。目前，我国从事毒理学检验的实验室主要分布在卫生、进出口检验检疫、药检、农业、高等院校等多个行业，实验室管理模式圾人力资源相差较为悬殊，这使得不同实验室检测能力和检验质量相差较大，检验结果可靠性和可比性较差。因此，为了解国内毒理学实验室管理及人力资源情况制定切实可行的实验室质量控制对策。进行了本次调查。     

灵芝孢子油增强小鼠免疫功能及护肝作用的实验研究

[目的]探讨灵芝孢子油对小鼠免疫功能的影响及对肝脏的保护作用。[方法](1)免疫功能实验:昆明种小鼠经口连续分别给予0.17、0.33、1.00 g/kg BW的灵芝孢子油及粟米油(溶剂对照组)30 d,进行迟发型变态反应试验、淋巴细胞转化试验、NK细胞活性测定;(2)护肝作用实验:昆明种小鼠经口连续分别给予0.17、0.33、1.00g/kg BW的灵芝孢子油及粟米油(溶剂对照)30 d后,腹腔注射CCl4以诱发小鼠化学性肝损伤,测定谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)及观察肝脏病理组织学变化。[结果](1)免疫功能实验:与空白对照组比较,中、高剂量组迟发型变态反应能力,脾淋巴细胞转化能力及脾NK细胞活性均增强,差异有统计学意义(P﹤0.05);(2)护肝功能实验:与CCl4对照组比较,各剂量组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及肝脏病理组织学变化均减轻,差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]灵芝孢子油对小鼠细胞免疫功能和NK细胞活性有明显的促进作用,对CCl4诱导的化学性肝损伤具有辅助保护作用。     

哺乳期母鼠接触溴氰菊酯对其仔鼠神经行为发育的影响

目的探讨哺乳期母鼠接触溴氰菊酯(DM)对发育期仔鼠脑一氧化氮合酶(NOS)活力及神经行为发育的影响。方法妊娠大鼠随机分为对照组和2个染毒组,每组6只。染毒剂量分别为3．35和6．70 mg/kg,每只母鼠自产后1～19 d,隔日1次,经口染毒DM；对照组予等量玉米油。观察DM对出生后5、10和21 d仔鼠脑NOS活力及30d仔鼠学习、记忆能力的影响。结果2个染毒组仔鼠哺乳存活率(81．80%、78．60%)均明显降低于对照组(96．70%),差异有统计学意义(P＜0．01)；6．70 mg/kg染毒组10、21 d仔鼠体重[(16．62±2．28)、(31．34±6．94)g]明显低于对照组[(18．81±2．01)、(36．21±7．01)g],差异有统计学意义(P＜0．05)；6．70mg/kg染毒组仔鼠延迟时间为(3．05±1．20)s,被动逃避反应阳性率为21．5%；3．35 mg/kg染毒组被动逃避反应阳性率为22．5%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0．05)。旷场实验中,2个染毒组仔鼠行进格子数均明显降低,与对照组的差异均有统计学意义(P＜0．05)；产后5至21 d仔鼠脑NOS活力呈发育性增高趋势；6．70mg/kg染毒组出生后5 d仔鼠脑NOS活力[(0．60±0．07)U·mg pro~(-1)·h~(-1)]明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0．05)结论哺乳期母鼠接触DM可导致仔鼠神经行为发育迟缓,并伴有NOS活力下降。     

雌二醇对溴氰菊酯染毒胶质细胞EAAs释放影响

目的　以原代培养的神经胶质细胞为研究对象 ,观察溴氰菊酯对胶质细胞兴奋性氨基酸 (EAAs)释放的影响 ,并探讨内分泌激素雌二醇对溴氰菊酯作用的影响。方法　高效液相色谱 (HPLC)检测不同水平 17β -雌二醇(10 -5、10 -8、10 -11mol/L)对 2× 10 -5mol/L溴氰菊酯染毒大鼠原代神经胶质细胞兴奋性氨基酸释放的影响 ,并观察雌激素受体拮抗剂Tamoxifen对雌激素有无拮抗作用。结果　 2× 10 -5mol/L溴氰菊酯可增加大鼠原代胶质细胞谷氨酸 (Glu)释放 ,释放增加率为 82 0 3% ;10 -8mol/L17β -雌二醇可部分抑制溴氰菊酯所致Glu释放增加 ,抑制率为37 77% ;Tamoxifen对雌二醇的作用并无干扰。结论　 17β -雌二醇对溴氰菊酯所致Glu释放增加表现出一定保护作用     

溴氰菊酯对原代培养大鼠星形胶质细胞存活率和胞内游离钙浓度的影响

目的　观察溴氰菊酯 (DM)对原代培养大鼠神经星形胶质细胞存活率及胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的影响。方法　以锥虫蓝染料排斥试验检测细胞染DM后存活率的变化 ;以Fura 2 /AM为荧光指示剂 ,RF 5 30 1PC荧光分光光度计测定细胞内 [Ca2 + ]i的变化。结果　 1× 10 -5mol/L组染毒DM 72h后细胞存活率下降为 91.9% ,与对照组的差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,1× 10 -4mol/L组DM染毒4、12、4 8、72h后细胞存活率分别为 89.0 %、84 .8%、81.2 %和 79.2 % ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;1× 10 -7、1× 10 -6、1× 10 -5mol/L组DM染毒 5min后胞内 [Ca2 + ]i分别上升至 (45 1.4± 4 2 .3)、(5 36 .9± 4 7.5 )、(870 .9± 10 0 .5 )nmol/L ,与染毒前及对照组比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。以后各染毒组胞内 [Ca2 + ]i逐渐下降 ,15min时 1× 10 -8、1× 10 -7、1× 10 -6、1× 10 -5mol/L染毒组胞内 [Ca2 + ]i分别降至 (12 4 .3± 6 .0 )、(131.3± 19.1)、(118.9± 1.4 )、(136 .6± 3.8)nmol/L ,与染毒前及对照组比差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论　DM在体外可降低神经胶质细胞的存活率并短时升高胞内 [Ca2 + ]i。     

氯菊酯诱导脑源性神经生长因子的表达

目的　为了进一步阐明氯菊酯 (PM)的神经毒作用机制。方法　用逆转录 -PCR(RT -PCR)、斑点杂交、流式细胞仪及免疫组织化学技术检测了氯菊酯对大鼠脑组织中脑源性神经生长因子 (BDNF)表达的影响。结果　大鼠一次大剂量〔PM1,40 0mg/ (kg·d) ,ip〕或反复小剂量〔PM2 ,2 0 0mg/ (kg·d) ,ip〕给予氯菊酯后 ,明显诱导其大脑皮层和海马的BDNFmRNA水平 :RT -PCR表明PM1和PM2组大鼠皮层和海马BDNFmRNA诱导率分别为 67% ,81%和 5 3 %和5 4%。斑点杂交亦显示 ,PM1和PM2组皮层和海马BDNF的水平分别高出对照组 5 7% ,78%和 3 6% ,5 0 % ,且均表现为对皮层的诱导强于海马。而BDNF蛋白表达结果表明 ,氯菊酯对蛋白水平的影响与BDNFmRNA并不一致 :流式细胞分析表明PM1和PM2组大鼠皮层BDNF的蛋白表达均明显升高 ,尤其是PM2组 ,其BONF蛋白水平是对照组的 2 3 7% ,然而海马BDNF蛋白量无明显改变 ;免疫组化结果与流式细胞分析基本一致 ,仅PM1组海马CA1区蛋白表达较对照组高2 1%。结论　氯菊酯诱导大脑皮层和海马BDNF的表达可能在其神经损伤修复中有重要意义     

Bcl2 在溴氰菊酯诱导神经细胞凋亡机制中的作用

背景与目的:研究溴氰菊酯 (deltamethrin, DM)对大鼠脑细胞的促凋亡作用及对 Bcl-2基因表达的影响.材料与方法:成年雄性 Wistar大鼠 30只随机分为对照组和 4个染毒组 (5 h、 24 h、 48 h和 5 d组 ),染毒组腹腔注射 12.5 mg/kg DM, 以 FACS420流式细胞仪法测定皮层和海马神经细胞凋亡率与 Bcl-2蛋白表达,免疫印迹法检测皮层和海马神经细胞 Bcl-2蛋白的表达. 结果:DM染毒 24 h、 48 h、5 d组大鼠海马、皮层神经细胞凋亡率 (海马:8.45±1.02、9.44± 1.14、7.58±0.75;皮层:7.90±0.49、8.01±0.87、7.97±0.41)均高于对照组(海马:2.97±0.36;皮层: 3.50±0.48),而 5 h组未见变化;5 h、 24 h、48 h组海马 Bcl-2表达 (5.27±0.33、 4.72±0.13、5.80±0.86)降低 (对照:7.16± 0.61),皮层仅 24 h组表达降低 (对照: 6.99±0.66,皮层:4.27±0.48); 5 h、24 h、48 h组皮层与海马 Bcl-2表达阳性细胞数 (海马:33.1±5.26、 25.4±4.39、5.6±4.71;皮层:20.7±2.58、 25.1±3.12、21.7±2.14)均低于对照组(海马:38.9±7.45;皮层:29.9±5.41),而 5 d染毒组海马与皮层 Bcl-2蛋白表达阳性细胞率未见变化;免疫印迹结果与 FCM结果基本一致.结论:DM可影响大鼠脑海马、皮层神经细胞凋亡率和 Bcl-2蛋白表达.     

溴氰菊酯对发育大鼠脑NOS活性及神经行为的影响

目的　探讨溴氰菊酯 (deltamethrin ,DM)对发育大鼠脑内一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)活性及神经行为发育的影响。方法　将妊娠大鼠随机分为对照组和两个剂量组 ,妊娠第 1天～ 19天隔日 1次DM经口染毒 ,剂量分别为 0、3 3 5和 6 70mg kg。观察DM对妊娠 2 0d胎鼠、5、10和 2 1日龄仔鼠脑NOS活性及 3 0日龄仔鼠学习和记忆能力的影响。结果　 6 70mg kgDM染毒组 1、5和 10日龄仔鼠体重明显下降 ;产后 5d～ 2 1d仔鼠脑NOS活性呈发育性增高趋势 ;两个剂量组 5日龄雄性仔鼠及 6 70mg kgDM染毒组 5日龄雌性仔鼠脑NOS活性明显高于对照组 (P <0 0 5 ) ,而妊娠2 0日龄胎鼠、10与 2 1日龄仔鼠脑NOS活性未见明显变化 ;行为试验结果显示 :6 70mg kgDM染毒组仔鼠延迟时间为(3 86± 1 40 )s、被动逃避反应阳性率为 2 4% ,与对照组 [(1 68± 0 70、6% ) ]相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。两个剂量DM染毒组仔鼠旷场试验中行进格子数均明显降低 ,与对照组相比 ,差异均有显著性 (P <0 0 5 )。结论　母鼠妊娠期接触DM可影响仔鼠脑内NOS活性 ,并造成仔鼠神经行为发育迟缓     

溴氰菊酯对大鼠神经细胞胞内游离钙浓度及凋亡的影响

目的　观察溴氰菊酯 (DM )对神经细胞游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)及凋亡的影响。方法　Wistar大鼠随机分为对照组与 3个染毒组 ,染毒组腹腔注射 1 2 .5mg/kg的DM ;以Fura 2 /AM为荧光指示剂 ,RF 530 1PC荧光分光光度计测定染毒后 5、2 4、48h后大鼠神经细胞 [Ca2 + ]i浓度的变化 ;FACS42 0型流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果　PM染毒 5、2 4、48h组大鼠海马及皮层细胞 [Ca2 + ]i分别为 :5h组海马 :(389.94± 43 .64)nmol/L、皮层 :(449.33± 2 3 .2 3)nmol/L ;2 4h组海马 :(340 .47±32 .36)nmol/L、皮层 :(31 1 .62± 2 5 .48)nmol/L ;48h组海马 (2 87.1 3± 2 4 .2 9)nmol/L、皮层 :(346 .55±36 .87)nmol/L ,均高于对照组 [海马 :(2 0 3 .2 4± 1 8.53)nmol/L、皮层 :(2 2 6 .85± 1 4 .81 )nmol/L] ,差异有显著性 (P <0 .0 1 )。染毒 48h组大鼠此二项指标值较 5h组明显下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。染毒 2 4、48h组大鼠神经细胞凋亡率 [海马 :(8.45± 1 .0 2 ) %、(9.44± 1 .1 4 ) % ,皮层 :(7.90± 0 .49) %、(8.0 1± 0 .87) % ]均明显高于对照组 [海马 :(2 .97± 0 .36) %、皮层 :(3 .50± 0 .48) % ] ,差异有显著性 (P<0 .0 1 ) ,且有时间 反应关系 (r=0 .940、0 .893)。结论　DM可影响大鼠神