纳米磷酸三钙复合人工骨的Ames致突变试验

目的:从基因角度探讨纳米磷酸三钙/胶原复合人工骨(Co/N-TCP)的遗传毒理学特性。借以了解其生物相容性,并为其在骨缺损修复领域的临床应用提供依据。方法:将纳米级磷酸三钙(β-TCP)同胶原复合,制成纳米β-TCP/胶原复合人工骨,并制备浸提液,采用Ames致突变试验,以生理盐水为阴性对照,测试其对鼠伤寒沙门菌的致突变比值(MR=实验组回变菌落数Rt/阴性对照组回变菌落数Rc)。结果:阳性对对照组各菌株回变菌落平均数均超过相应阴阴性对照组回变菌落平均数的2倍以上(MRp>2),此复合工人骨的浸提液各剂量组对鼠伤寒沙门菌的致突弯比值MR均小2。结论:(Co/N-TCP)不会引起鼠伤寒沙门菌的回复突变数增加,提示此人工骨不会引起基金突变。     

胶原基纳米骨的遗传毒性及对体外培养细胞影响的研究

目的：体外研究胶原基纳米骨的遗传毒性，及对原代培养的人牙周膜成纤维样细胞、兔成骨细胞的影响。方法：采用Ames致突变试验、MTT法及碱性磷酸酶（ALP）检测法，测定不同浓度胶原基纳米骨（nHAC）的浸提液对鼠伤寒沙门菌的致突变比值的影响和对人牙周膜成纤维样细胞及兔成骨细胞的影响。结果：nHAC的浸提液各剂量组对鼠伤寒沙门菌的致突变比值均小于2，nHAC不会引起鼠伤寒沙门菌的回复突变数增加。不同时间点用不同浓度浸提液培养的人牙周膜成纤维样细胞正常增殖，浸提液不影响兔成骨细胞的功能表达。结论：胶原基纳米骨无遗传毒性，不影响人牙周膜成纤维样细胞的增殖活性和兔成骨细胞的成骨活性，是一种组织工程骨支架的良好材料。     

纳米磷酸三钙复合人工骨的程序外DNA合成试验

目的:从DNA的角度来探讨纳米磷酸三钙/胶原复合人工骨的遗传毒理学特性。借以了解此复合人工骨的生物相容性,为其在骨缺损修复领域的临床应用提供依据。方法:将纳米级磷酸三钙(-βTCP)同胶原复合,制成纳米-βTCP/胶原复合人工骨,并制备浸提液,采用程序外DNA合成检测法(UDS试验),以生理盐水为阴性对照,测试大鼠原代肝细胞的每分钟放射计数(CPM)值。结果:材料浸提液的CPM均值为1262,与阴性对照组(814)比较无显著性差异(P>0.05),与阳性对照组(6734)比较差异显著(P<0.01)。结论:纳米磷酸三钙/胶原复合人工骨不会引起大鼠肝细胞程序外DNA合成增加,提示此人工骨不会引起DNA损伤。     

纳米磷酸三钙复合人工骨的UDS试验

目的 :从DNA的角度探讨纳米磷酸三钙 /胶原复合人工骨的遗传毒理学特性。借以了解此复合人工骨的生物相容性 ,为其在骨缺损修复领域的临床应用提供依据。方法 :将纳米级磷酸三钙 (β -TCP)同胶原复合 ,制成纳米 β -TCP/胶原复合人工骨 ,并制备浸提液 ,采用程序外DNA合成检测法 (UDS试验 ) ,以生理盐水为阴性对照 ,测试大鼠原代肝细胞的每分钟放射计数 (CPM )值。结果 :材料浸提液的CPM均值为 12 6 2 ,与阴性对照组 (814 )无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,与阳性对照组 (6 734)差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :纳米磷酸三钙 /胶原复合人工骨不会引起大鼠肝细胞程序外DNA合成增加 ,提示此人工骨不会引起DNA损伤。     

牙用镍铬烤瓷铸造合金的Ames试验研究

目的 对镍铬烤瓷铸造合金进行鼠伤寒沙门氏菌回复突变(Ames)试验，以评价材料的潜在致突变性。方法 采用标准平板掺入法，计数TA97，TA98，TAl00，TA332在4个不同浸提浓度下，37℃培养48h后的回变菌落数。结果 该材料各浓度组的回复突变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍，并且无剂量反应关系。Ames试验结果为阴性。结论 牙用镍铬烤瓷铸造合金经Ames试验未见潜在致突变性。Ames试验是检测生物材料体外致突变性的一项快速，有效的方法。     

彩色正畸不锈钢弓丝的Ames试验研究

目的对应用表面化学着色工艺研制的彩色正畸不锈钢弓丝进行鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验),研究材料是否具有遗传危害和潜在的致癌作用。方法采用平板掺入法,计数TA97、TA98、TA100、TA102在材料4种人工唾液浸提浓度下的回复突变菌落数。结果无论在-S-9和+S-9的情况下,材料各剂量组均未引起测试菌株回变菌落数的明显增加。Ames试验结果为阴性。结论应用表面化学着色工艺研制的彩色正畸不锈钢弓丝未见潜在致突变性。     

胶原/纳米磷酸三钙复合人工骨修复骨缺损区TGF-β的表达

目的：观察胶原(Collagen，简称Co)／纳米磷酸三钙(Nano-Tricalcium Phosphate，简称N-TCP)复合人工骨植入骨缺损区转化生长因子-β(TGF-β)的分布、刺激引导成骨细胞聚集、促进骨创愈合的能力。方法：家兔24只，颅骨制成直径8．0mm圆形洞穿缺损，左侧植入Co／N-TCP复合人工骨作为实验组，右侧植入非纳米Co／TCP人工骨作为对照组；于2、4、8、12周后处死各组动物取材，FGF-β免疫组织化学染色。结果：TGF-β免疫组织化学染色显示：成骨细胞、新生骨细胞大量TGF-β阳性表达，细胞间质及纤维组织中散在的TGF-β阳性反应；近骨床区各期内两组间TGF-β阳性表达程度无明显差异，远骨床区Co／N-TCP组TCP-β阳性表达高于Co/TCP组。结论：Co／N-TCP复合人工骨在修复骨缺损区可有效刺激引导TGF-β表达，促进骨缺损的早期修复。     

胶原/纳米磷酸三钙复合人工骨修复骨缺损的实验研究

目的 观察胶原（Collagen,简称Co)／纳米磷酸三钙（Nano-Tricalcium Phosphate,简称N－TCP）复合人工骨的生物相容性，Co/N-TCP植入骨缺损区促进骨创愈合的能力。方法 家兔24只，颅骨制成直径8.0mm圆形穿通型缺损，左侧植入Co/N-TCP复合人工骨作为实验组，右侧植入非纳米Co/TCP人工骨作为对照组；于2，4，8，12周后处死各组动物取材，行肉眼，组织学方法观察。结果 两组材料除早期（2周内）轻微炎性2细胞浸润外，其余各时间点均未见异物巨细胞反应，4－8周骨新生活跃，有骨岛形成，12周时可见骨性连接。结论 Co/N-TCP复合人工骨具有良好的生物相容性及骨引导活性，能促进骨缺损的早期修复，是一种颇有潜力的骨缺损修复材料。     

自制烤瓷合金的生物相容性评价

目的通过微核实验和鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames实验)检测自制烤瓷合金对小鼠的致畸作用及对染色体的突变作用以评价其生物相容性。方法微核实验中将小鼠分成高、中、低剂量组及阴、阳性对照组,并将自制烤瓷合金与纯钛作比较,通过观察股骨骨髓玻片的微核标本,计算并比较P/N值。Ames实验取鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型TA98、TA100,按一定剂量加入不同浓度自制烤瓷合金及钛的生理盐水浸提液中,计数每皿回变菌落数。结果各实验组的微核率与空白对照组比较,无显著差异,并与纯钛组相近。Ames实验中各剂量、各菌株的回变菌落数均在正常范围,故自制烤瓷合金的生理盐水浸提液Ames实验结果为阴性。结论自制烤瓷合金对小鼠无致畸作用,对染色体亦无致突变作用。     

口腔材料与器械

20062533湿法合成纳米缺钙磷灰石的实验研究；20062534，XD-1根管测量仪的临床应用研究；20062535不同纳米颗粒二氧化钛的细胞相容性研究；20062536金刚石涂膜种植材料骨界面区骨钙素mRNA表达；20062537纳米磷酸三钙复合人工骨的Ames致突变试验；20062538牙本质粘结界面纳米渗漏的激光扫描共聚焦显微观察．[编者按]     

鸡蛋黄抗体IgY的致突变试验

目的：通过3项致突变实验，观察实验动物使用鸡蛋黄抗体IgY后的毒性反应，评估鸡蛋黄抗体IgY的安全性。方法：实验1，昆明小鼠，雌雄各60只，鸡蛋黄抗体IgY喷漱液经口灌胃连续2次，观察受试动物骨髓微核率，并统计分析结果。实验2，昆明小鼠，雄性50只，经口连续灌胃5d后，再继续喂养30d，高倍镜下观察精子，并记录畸形精子数。实验3，将IgY加入鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型菌珠进行试验，记录各组回变菌落数，与对照组比较，分析结果。结果：3项致突变试验（小鼠骨髓嗜染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames试验）结果均为阴性。结论：鸡蛋黄抗体IgY无致突变性，为安全制剂。     

胶原/纳米磷酸三钙复合人工骨修复骨缺损区TGF-β的定量表达

目的 :观察胶原 (Collagen ,Co) /纳米磷酸三钙 (Nano -TricalciumPhosphate ,N -TCP)复合人工骨植入骨缺损区转化生长因子 -β(Transforminggrowthfactor -beta ,TGF -β)的定量分布、刺激引导成骨细胞聚集、促进骨创愈合的能力。方法 :家兔 2 4只 ,颅骨制成直径 8.0mm圆形穿通型缺损 ,左侧植入Co/N -TCP复合人工骨为实验组 ,右侧植入非纳米Co/TCP人工骨为对照组 ;于 2、4、8、12周后处死动物取材 ,TGF -β免疫组织化学染色 ,用HPIAS -10 0 0图文分析系统作定量分析。结果 :TGF -β免疫组织化学染色定量表达显示 :近骨床区各期内两组间TGF -β阳性表达程度无明显差异 ( p >0 .0 5 ) ,远骨床区纳米材料组TGF -β阳性表达程度明显高于非纳米Co/TCP组 ( p <0 .0 5或 p <0 .0 1)。 结论 :Co/N -TCP复合人工骨在修复骨缺损区可有效刺激引导TGF -β表达 ,促进骨缺损的早期修复。     

N,O-羧甲基壳聚糖与磷酸三钙复合体的理化性能研究

目的：研究N，O-羧甲基壳聚糖（N，O-carboxymethyl chitosan，N，O-CMCS）／磷酸三钙（tficalcium phosphate，TCP）以不同质量比例复合制作骨支架材料的理化性能。方法：N，O-CMCS与TCP分别以质量比2：1、1：1和1：2混合，以同体积的水将材料调匀．制成复合体，应用红外光谱仪测试复合材料的特征谱带，扫描电镜观察复合材料的微观特征，万能材料实验机测试材料复合后15min和12h时的抗压强度和弹性模量。结果：3种复合材料中，N，O-CMCS的-COO-和-NH2的特征峰渐向低波数方向明显位移，-COO和-NH2与TCP的Ca^2＋发生了络合反应。N,O-CMCS／TCP呈三维结晶多孔结构，N，O-CMCS含量增多．复合材料孔隙增加，抗压强度变大：而TCP含量增多，其孔隙减少，弹性模量变大，刚性加强。结论：N，O-CMCS具有络合钙粒子的特性，与TCP复合后形成的复合材料具有良好的可塑性、三维多孔结构和力学性能，有望成为一种有应用前景的骨修复材料。     

胶原复合梯度磷酸三钙修复髁突软骨缺损

目的 研究胶原复合梯度磷酸三钙(Col/TCP)修复髁突软骨损伤的效果.方法 选用成年雄性新西兰大白兔30只,在实验动物的右侧髁突前斜面形成3 mm × 4 mm的全层缺损后,植入复合材料;左侧仅造成同样的缺损.分别于术后4、6、8、12和24周各处死6只实验动物,对缺损区的新生软骨进行大体标本、组织学、免疫组织化学及透射电镜观察.结果 实验组4周后复合材料即可诱导关节软骨的修复;12周时缺损区与周围正常软骨基本一致,且与关节下骨结合紧密;24周后再生软骨未见明显褪变;对照组缺损区由纤维组织充填,未见软骨形成.实验组Ⅱ型胶原免疫组织化学染色呈阳性,对照组为阴性;透射电镜观察实验组见典型软骨细胞出现,对照组为纤维组织.结论 Col/TCP可以修复髁突软骨缺损,形成类似正常的关节软骨.     

兔骨髓基质干细胞自体嚼肌内移植异位成骨实验研究

目的：观察骨髓基质干细胞成骨向分化诱导后植入嚼肌内异位成骨的过程。方法：从兔髂骨分离骨髓基质干细胞，经体外诱导分化，与磷酸三钙／羟基磷灰石（tricalcium phosphate／hydroxyapatite，TCP／HA）支架复合，植入兔自体嚼肌内，形态学、免疫细胞化学、组织学观察其成骨特征。结果：体外培养的兔骨髓基质干细胞性状稳定，经矿化诱导培养的骨髓基质干细胞表现为成骨细胞分化，表达Ⅰ型胶原蛋白，与支架材料复合植入自体嚼肌内可见成熟骨组织形成。结论：利用骨髓基质干细胞为种子细胞植入嚼肌内开展功能性组织工程化颌骨移植方法可行。     

骨形成蛋白和载体材料复合人工骨的研究进展

在骨形成蛋白（ＢＭＰ）与α－聚酯，钙磷陶瓷，无活性脱矿骨基质，胶原，胶原／羟基磷灰石，纤维蛋白粘合剂或硫酸钙等载体材料组成的复合人工骨中，ＢＭＰ与载体材料间协同作用，弥补相互间的不足，ＢＭＰ赋予载体材料以骨诱导活性，载体材料则充当ＢＭＰ的缓释载体，并在骨缺损中发挥支架作用，现有的载体材料均存不足或需要改进之处，ＢＭＰ的生产工艺有待于完善。     

多孔β—TCP／BMP复事人工骨引导牙周组织再生的？…

目的 将骨形成蛋白（ＢＭＰ）和多孔β磷酸三钙（β－ＴＣＰ）复合人工骨联合应用于引导组织再生（ＧＴＲ）技术中，评价其对Ⅱ度根分叉病变牙周组织再生修复的影响和意义。方法 用健康成年杂种狗４只，制备下颌后牙区人工骨缺损。实验牙位随机分为３组：①骨形成蛋白／引导组织再生（ＢＭＰ／ＧＴＲ）组；缺损处植入引导膜材料和复合人工骨；②ＧＴＲ组；单位放置引导膜材料；③以常规翻瓣术为对照组。术后１２周取材做组织学观     

牙本质基质蛋白1、骨桥蛋白及骨涎蛋白在小鼠牙骨质形成中的组织学定位

目的：研究牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1，DMP1)、骨桥蛋白(osteopontm，OPN)及骨涎蛋白(bone sialoprotein，BSP)在小鼠成牙骨质细胞分化及牙骨质形成中的时空分布特点：方法：取出生后第5、10、15、25天的BALB／c小鼠36只．引颈处死．解剖分离含下颌第一磨牙区的下颌骨，新鲜配制4％多聚甲醛固定过夜，甲酸一甲酸钠复合脱钙液脱钙1～3周，常规石蜡包埋，近远中向5μm连续切片，免疫组化PV二步法检测DMP1、OPN及BSP的表达。采用CMIAS2000多功能真彩色病理图像分析系统．高倍镜下每张切片阳性部位沿牙骨质表面随机选取不相重叠的10个视野．计算机测量其积分光密度值，取其均值．计为该指标的1个标本的积分光密度值、相同指标重复3次．均值作为该指标在该标本中的表达强度，各指标在不同发育期的积分光密度值采用重复测量数据方差分析，分别进行统计学处理。结果：DMP1、OPN及BSP在小鼠成牙骨质细胞分化及牙骨质形成过程中呈先后不同的时相表达。DMP1表达最早，出生后第5天在牙囊细胞中表达阳性，一旦牙囊开始分化为牙周膜细胞、成牙骨质细胞和成骨细胞，其表达开始转为阴性；而PPN至出生后第10天出现表达，第15天达到高峰，此后持续表达至牙发育完成的第25天；BSP直到第15天开始表达，持续到第20天后开始减弱．至牙根发育第25天近阴性表达。对3种调节因子的染色积分光密度值的方差分析结果显示：除OPN在第15～25天之间无显著性差异外，其他各因子两两比较差异均具有显著性。结论：牙骨质是由不同序贯发生的多种调节信号顺序启动牙囊细胞分化成牙骨质细胞而形成,DMP1、OPN及BSP在这一过程中先后起着重要的调节作用。