Let-7b 慢病毒载体构建及对大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为神经细胞的影响

目的：探讨Let‐7b过表达和Let‐7b抑制慢病毒载体在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）向神经细胞分化中的作用。方法构建Let‐7b过表达和Let‐7b抑制慢病毒载体并感染大鼠MSCs ,筛选最适感染复数（MOI）;实验分未感染组、感染组1（感染LV‐rno‐Let‐7b‐up）、感染组2（感染LV‐rno‐Let‐7b‐inhibition）、阴性对照组（感染空病毒）;采用法舒地尔诱导感染后大鼠M SCs分化为神经元细胞。倒置荧光显微镜下观察M SCs感染后荧光表达情况;采用免疫细胞化学染色检测神经元烯醇化酶（NSE）、神经微管结合蛋白（MAP‐2）的表达变化;PT‐PCR检测MAP‐2 mRNA的表达变化;MTT 法检测细胞存活率。结果倒置显微镜下观察大鼠LV‐rno‐Let‐7b‐up和LV‐rno‐Let‐7b‐inhibition慢病毒载体感染成功,MOI值为10,感染3 d时大鼠LV‐rno‐Let‐7b‐up慢病毒感染率最高,细胞存活率较高,感染率可达（92.1±4.3）％;MOI为20,感染5 d时大鼠LV‐rno‐Let‐7b‐inhibition慢病毒感染率最高,细胞存活率较高,感染率可达（90.3±4.2）％。法舒地尔可以诱导MSCs向神经细胞分化,感染组1诱导MSCs为神经细胞显著高于阴性对照组和感染组2,NSE、MAP‐2表达率明显高于阴性对照组和感染组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论结论 LV‐rno‐Let‐7b‐up可更高效感染大鼠 MSCs ,感染LV‐rno‐Let‐7b‐up后大鼠MSCs经法舒地尔诱导向神经细胞分化比率增加。     

大面积脑梗死患者血清 let-7f 表达的初步研究

目的：本研究拟初步探讨let‐7f与大面积脑梗死的诊断及发展的相关性。方法采用前瞻性队列研究方法,收集神经重症IC U的缺血性脑卒中患者血标本（128例）,并收集年龄、性别匹配的正常人群、脑出血患者作为对照。将血清标本进行miRNA提取、反转录及实时荧光定量PCR ,以检测血清中let‐7f的相对表达量。结果血清let‐7f在大面积前循环脑梗死患者中表达较正常人群显著下调（ P＜0.05）;在后循环脑梗死患者中的表达水平较正常人群无显著性差异。血清let‐7f在大面积脑梗死合并出血转化患者中表达较正常人群显著上调（ P＜0.05）,但较脑出血患者无显著性差异。血清let‐7f在脑出血患者中的表达水平较正常人群显著上调（ P＜0.05）。血清let‐7f在非大面积脑梗死患者中的表达水平较正常人群显著上调（P＜0.05）,但低于脑出血患者。血清let‐7f表达水平与肺部感染无显著性差异（P＞0.05）。血清let‐7f与脑出血或脑梗死合并出血呈高度正相关性,其次与梗死面积呈负相关。结论血清let‐7f表达水平对于大面积前循环脑梗死的诊断及发展具有一定的相关性。     

let-7f对骨髓间充质干细胞增殖的影响

背景：microRNA let-7f和炎性因子白细胞介素6对骨髓间充质干细胞的具体作用及两者之间是否存在联系尚不可知。 目的：分析let-7f及白细胞介素6表达水平对骨髓间充质干细胞增殖的影响及两者的关系。 方法：①构建let-7f过表达及抑制慢病毒载体,分别转染SD大鼠骨髓间充质干细胞,实验分为4个组：转染上调组(转染LV-rno-let-7f-up)、转染下调组(转染LV-rno-let-7f-down)、阴性转染组(转染空病毒)、未转染组(不进行病毒转染)。 qRT-PCR检测各组细胞let-7f表达水平。MTT法、流式细胞术和ELISA等方法检测不同let-7f表达水平下细胞增殖情况及白细胞介素6表达水平,qRT-PCR及Western blot检测各组Cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平。②预测let-7f潜在的靶基因,构建野生型/突变型白细胞介素6 3’UTR报告基因载体,分别与let-7f/let-7f inhibitor共转染293T细胞系,测定荧光素酶活性。 结果与结论：let-7f转染上调组较未转染组及阴性转染组细胞增殖能力及克隆能力明显增强,G1期细胞数明显减少,S期明显增多,凋亡减少(P < 0.05);转染下调组结果与其相反。let-7f转染上调组细胞培养液中的白细胞介素6表达水平低于未转染组及阴性转染组(P < 0.05);转染下调组细胞培养液中的白细胞介素6则明显升高(P < 0.05);Western blot、定量PCR显示let-7f转染上调组Cyclin D1蛋白及mRNA表达上调(P < 0.05);转染下调组表达均下调(P < 0.05);未转染组与阴性转染组所有结果无明显差异(P > 0.05)。野生型白细胞介素6 3’UTR报告基因载体与let-7f共转染细胞的荧光素酶活性显著减低(P < 0.05)。结果表明上调let-7f表达水平可显著促进骨髓间充质干细胞增殖活性及克隆形成能力,减少凋亡,而下调let-7f表达水平则出现抑制作用。白细胞介素6过表达可抑制骨髓间充质干细胞增殖,考虑白细胞介素6是let-7f的靶基因,let-7f可能通过抑制白细胞介素6表达而促进细胞增殖。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程      

肝动脉化疗栓塞联合三维适形放射治疗对肝癌并门静脉癌栓近期疗效

目的 研究肝动脉化疗栓塞(TACE)联合三维适形放射治疗(3DCRT)对原发性肝癌(PHC)合并门静脉癌栓(PVTT)的近期疗效及不良反应.方法 72例晚期肝癌患者随机分为A、B两组,A组单纯行TACE,B组行TACE联合3DCRT,观察两组近期疗效及毒性和不良反应情况.结果 *A组原发肿瘤有效率为55.6％(20/36),门静脉癌栓(PVTT)消失率为25.0％,1、2年生存率分别为27.8％(10/36)、13.9％(5/36),B组原发肿瘤有效率为77.8％(28/36),PVTT消失率为50.0％(18/36),1、2年生存率分别为52.8％(19/36)、44.4％(16/36).两组差异有统计学意义(P ＜0.05或＜0.01).放射性肝脏毒性反应是最常见的并发症,两组发生率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TACE联合3DCRT治疗PHC并PVTT近期疗效显著,不良反应可耐受,是PHC并PVTT治疗有效可行的手段.     

颅内囊性肿瘤伽玛刀治疗的容积效应探讨

目的：探讨颅内囊性肿瘤伽马刀治疗的容积效应,为临床提高此类患者治疗效果及预后提供可靠依据,保障患者治疗安全性及生命安全。方法根据颅内囊性肿瘤患者实际情况确定囊液抽吸方式（直接穿刺抽吸或置入Ommaya储液囊）,待囊液抽出后实施伽马刀治疗,应用Logistic综合方程分别计算颅内囊性肿瘤患者抽囊前后风险概率,并对所得结果进行对比,得出结论。结果颅内囊性肿瘤患者抽液后肿瘤体积明显缩小,且风险概率显著降低,提示颅内囊性肿瘤内容物容积与风险呈正比,即内容物容积越大,则风险越高,对比结果具有统计学意义（P＜0.05）。结论临床医师对颅内囊性肿瘤患者进行伽马刀治疗时,应于治疗前首先对其颅内肿瘤囊液抽取,从而有效降低其治疗风险,保障治疗安全性,利于患者达到理想疗效,提高其生活质量及生命安全,值得临床推广应用。     

伽马刀治疗多发脑转移瘤预后的影响因素分析

目的:了解伽马刀治疗多发脑转移瘤预后的影响因素,从而提高多发脑转移瘤患者的生存率.方法:选择使用伽马刀治疗的多发脑转移瘤患者238例并回顾性分析各种因素对于患者生存率的影响.结果:多发脑转移瘤的中位生存时间为206天,单因素分析伽马刀治疗多发脑转移瘤与KPS、放射剂量、中枢外转移以及原发病灶控制等4个单因素有关;多因素回归分析最后得出,KPS(P=0.003,Wald=9.100)、中枢外转移(P=0.019,Wald=6.542)以及原发病灶控制(P=0.002,Wald=11.492)是影响伽马刀治疗多发脑转移瘤预后的因素.结论:影响多发脑转移瘤患者预后的主要因素包括KPS、中枢外转移以及原发病灶控制.     

线粒体功能损伤在NOD样受体家族蛋白3炎症体激活中的调控机制

NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)炎症体的激活多由各种外源性或内源性刺激产生,进一步激活caspase-1,促使IL-1β和IL-18的成熟分化及分泌,从而引发炎症反应。激活过度的NLRP3炎症体可造成组织损伤及器官功能失调,甚至导致多种疾病。但目前对其激活机制的具体调控并不十分清楚。越来越多的证据表明,线粒体功能障碍与多种疾病中的NLRP3激活有关,且多作为上游激活因子提供ROS促使NLRP3寡聚化,并作为炎症体聚合的重要场所,或者乙酰化α-tubulin使线粒体位置靠近NLRP3。其分子机制多与K+外流及胞内失平衡有关。本文将着眼于NLRP3炎症体激活的机制以及线粒体功能障碍与其激活的相关研究。     

HLA与中国南方人群鼻咽癌的相关性研究进展

HLA即人类白细胞抗原又名人类主要组织相容性复合体．是迄今已知基因中等位基因多态性最高的基因复合体，其多态性与鼻咽癌的遗传易感性有明显关系，同时HLA在免疫系统中的抗原处理作用使其在鼻咽癌的发生发展中有重要意义。文章主要综述HLA与中国南方人群鼻咽癌的相关性研究进展。     

时间–空间相关成像技术评价胎儿右心室功能的临床研究

目的：探讨四维时间–空间相关成像(spatio-temporal image correlation,STIC)技术评价胎儿右心室功能的 优越性、可行性及临床意义。方法：应用三维容积探头采集180例24+0~37+6孕周正常胎儿的STIC心脏动态图像, 并结合虚拟器官计算机辅助分析(virtual organ computer-aided analysis,VOCAL)软件进行后期脱机分析,以获得右 心室舒张末期容积(right ventricular end-diastolic volume,RVEDV)和右心室收缩末期容积(right ventricular end-systolic volume,RVESV),计算出右心每搏量(right stroke volume,RSV)、右心输出量(right cardiac output,RCO)和右心射血 分数(right ejection fraction,REF);且根据产前常规超声检查时所测量头围(head circumference,HC)、腹围(abdominal circumference,AC)、股骨长度(femur length,FL)和胎儿估测体质量(estimated fetal weight,EFW)来标准化RCO,然 后将所有测量参数进行统计学分析。结果：本研究整体采集分析成功率为83.89%,且可重复性较好。正常胎儿的 RVEDV,RVESV,RSV,RCO和根据胎儿生物学参数(HC,AC,FL)分别标准化后的RCO均随孕周增长呈增加趋势, REF和RCO/EFW测值则在一定范围内波动。结论：应用STIC技术能够比较准确、客观地测量胎儿心室容积,有望成 为临床评价胎儿心脏功能的重要方法。     

羟基红花黄素A对脑缺血再灌注后缺血半暗带自噬活性的调节作用

目的:探讨脑缺血再灌注后羟基红花黄素A(hydroxysafflor yellow A,HYSA)对缺血半暗带自噬活性的调控机制。方法:构建雄性SD大鼠脑缺血90 min再灌注模型,分为假手术组、脑缺血再灌注(cerebral ischmia/reperfusion,I/R)组、I/R+HSYA组和假手术+HSYA组,分别在再灌注后6 h、1 d、3 d和7 d对大鼠进行改良神经功能缺损评分(modified neurological severity score,m NSS),同时检测缺血半暗带的自噬活性、凋亡及干扰素β(IFN-β)表达。结果:与假手术组比较,I/R组缺血半暗带在6 h~7 d内可见LC3-Ⅱ蛋白表达增高及SQSTM1/P62蛋白降解,提示自噬激活;与I/R组比较,I/R+HSYA组的自噬活性在1 d和3 d时明显升高(P0.05),7 d时则明显降低(P0.05)。同时,I/R组的IFN-β表达较假手术组在6 h时升高(P0.05),1 d和3 d时降低(P0.05),7 d时恢复正常;而I/R+HSYA组的IFN-β表达在1 d和3 d时明显高于假手术组和I/R组(P0.05),并且3 d时的细胞凋亡少于I/R组,m NSS评分自4 d起明显低于I/R组(P0.05)。结论:HSYA可动态调节缺血半暗带的自噬活性和IFN-β表达,从而改善脑缺血再灌注损伤。