胚胎小鼠脊髓源性与纹状体源性神经干细胞的培养及分化特点

目的 探讨小鼠脊髓源性神经干细胞与纹状体源性神经干细胞的分离培养方法 及增殖特点,比较两种来源的神经干细胞发育时期上的异同,寻找更有利于脊髓损伤修复的种子细胞.方法 利用显微解剖、无血清培养和单细胞克隆技术在孕14 d小鼠的胎鼠的脊髓及纹状体中分离培养具有单细胞克隆能力的细胞,免疫荧光染色检测克隆细胞的神经巢蛋白(nestin)抗原和诱导分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达,并比较两种来源的干细胞在培养及分化方向上的异同点.结果从胎鼠的脊髓和纹状体中成功分离出神经干细胞.两种来源的干细胞均具有连续克隆能力可传代培养,表达nestin.脊髓血清诱导分化后脊髓源性神经干细胞β-tubulinⅢ阳性细胞(13.5±0.8)较纹状体源性神经干细胞(17.4±1.1)减少,而nestin、GFAP阳性细胞明显增多(45.7±0.3vs 39.2±1.2;25.2±1.3 vs 18.8±0.9),差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 依据细胞增殖特点和分化结果的区别,证实纹状体源性神经干细胞更适合用于移植修复脊髓损伤.     

补肾健脾壮骨方对绝经后骨质疏松症患者骨代谢及疗效的影响探究

目的:探讨补肾健脾壮骨方联合唑来膦酸对绝经后骨质疏松症患者骨代谢及疗效的影响。方法:将94例绝经后骨质疏松症患者,依据随机数字表法随机分为观察组与对照组,每组各47例。对照组患者给予唑来膦酸治疗,观察组在对照组基础上结合补肾健脾壮骨方治疗,2组疗程均为1年。比较2组治疗效果,治疗前后主要症状积分、骨密度(BMD)和骨代谢指标变化。结果:观察组治疗总有效率91.49%,高于对照组的70.21%(P<0.05)。2组治疗后胫膝痠耎和腰背疼痛积分较治疗前降低(P<0.05);观察组治疗后胫膝痠耎和腰背疼痛积分低于对照组(P<0.05)。2组治疗后股骨颈与腰椎L2~4BMD较治疗前增加(P<0.05);观察组治疗后股骨颈与腰椎L2~4BMD高于对照组(P<0.05)。2组治疗后血清I型胶原羧基末端肽(CTX)、骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)和I型前胶原N端前肽(PINP)水平较治疗前降低(P<0.05);观察组治疗后血清CTX、B-ALP和PINP水平低于对照组(P<0.05)。结论:补肾健脾壮骨方联合唑来膦酸对绝经后骨质疏松症患者疗效良好,可改善患者骨代谢,增加骨密度。     

Cobb法测量先天性脊柱侧凸角度的可信度研究

目的评价Cobb法测量先天性脊柱侧凸角度的可靠性和可重复性。方法选取第四军医大学西京医院脊柱外科2010年1月—2013年12月收治的78例先天性脊柱侧凸患者的标准前后位全脊柱X线片。由5名医生利用Digimizer软件对全脊柱X线片测量Cobb角度,每人测量2次,2次测量间隔3周。记录测量的Cobb角度以及两次测量的差值。应用组内相关系数（ICC）判定可靠性和可重复性。结果Cobb法测量先天性脊柱侧凸角度的可信度范围为0．84—0．98,5名测量者两次测量间最大差值的范围为20°-57°,其中差值〉10°的例数范围为13～46例,同一测量者两次测量间的误差约8．5°;测量者之间的可信度为0．947,5名测量者在81°～110°组和〉110°组之间的ICC为0．623和0．822。结论Cobb法测量先天性脊柱侧凸可以获得较好的可靠性和可重复性,但是测量者内部以及测量者之间仍然出现较多且较大的误差,尤其在侧凸角度较大时,Cobb法测量先天性脊柱侧凸的准确性缺乏稳定性。     

标准化病人情景模拟与模拟病动物结合的外科教学模式初探

目的 探讨以标准化病人情景模拟与模拟病动物结合的外科教学模式在《外科手术学基础》带教中的效果,以提高临床课的教学质量。方法 将第四军医大学2009级五年制在西京医院进行《外科手术学基础》学习的学生100人,随机分为传统教学组和情景模拟实验教学组,每组各50人,比较两种教学方法的效果差异。结果 情景模拟实验教学组6项能力自我评定结果均明显优于传统教学组（P〈0.01）。结论 标准化病人情景模拟与模拟病动物结合的外科教学方法显著提高了学生的学习积极性,训练了临床思维,全面提高了本课程教学质量。     

Spine Decide软件在脊柱外科临床实习教学中的应用

背景：脊柱,因其复杂的结构和其特殊的功能,一直以来是临床教学的难点和重点,如何将现代化软件应用于脊柱外科临床教学是目前研究的热点。目的：探索SpineDecide软件在脊柱外科临床教学中的应用。方法：通过SpineDecide软件,带教教师可以主动引导实习生自己学习脊柱疾病的诊断,设计手术方案,通过实际手术的参与,充分理解脊柱外科疾病的诊疗过程和疾病发生发展过程。结果与结论：学员通过主动的学习以及与SpineDecide软件的积极互动,能够在短时间内系统化、条理化的理解脊柱疾病的发生机理、诊断、治疗以及预后。SpineDecide应用于教学后,实习生的临床思维能力、自学能力等明显提高,学生学习脊柱相关疾病的主动性和积极性显著优于传统教学方法,创新性和探索性也有了突破性的提高,切实提高了教学质量。     

电刺激加快大鼠10mm股神经缺损自体神经修复后的运动功能恢复

以往大量研究表明电刺激可促进外周神经损伤后的神经再生。然而，电刺激对神经损伤，尤其是长节段神经缺损后的运动功能恢复研究较少。因此，本研究拟利用大鼠10mm股神经缺损模型，确定电刺激（1h，20Hz）对神经缺损后运动功能恢复的影响。     

脊髓爆震伤后神经细胞的形态学变化及凋亡细胞的时空分布特点

目的:研究脊髓爆震伤后神经细胞的形态学变化及凋亡细胞的时空分布特点.方法:90只家兔随机分为正常组(A组,n=6)、Allen's撞击组(B组,n=42)和爆震损伤组(C组,n=42).用改良Allen's法造成B组不完全性急性脊髓损伤模型;而用0.7g单质金属炸药黑索金(cyclotrimethylene trinitramine)在垂直距离动物T9～T10节段4cm处引爆造成C组脊髓爆震伤模型,5h后B、C组动物均用诱发电位仪刺激下肢的MEP以筛选造模成功的动物.B、C两组分别于损伤后8h、1d、3d、7d、14d和30d取材(损伤段脊髓2cm).每组每个时间点取材7只,而A组动物不作任何处理,统一于30d取材.通过HE染色、透射电镜检测、DNA电泳分析和凋亡细胞原位末端标记法(TUNEL),观察各组脊髓中神经细胞的形态学变化及凋亡细胞的时空分布.结果:HE染色显示,A组为正常组织学表现;B组损伤后8h即出现大片的出血坏死灶,白质呈严重的脱髓鞘样改变,1、3d时前角运动神经元大量减少,7d时白质中空洞形成,而且空洞逐渐融合.到14、30d时,可见部分巨大空洞:而C组爆震后8h仅出现散在的小型出血点,但病变进展迅速,1d时前角运动神经元即明显减少并伴有大量微型空洞形成,3、7d时整个白质结构松散,可见液化坏死灶及广泛的脱髓鞘样改变,而且透射电镜证实这种髓鞘损伤还具有方向性特征,到14、30d时,脊髓可见巨大空洞及散在的小空洞,但面积明显小于B组.B组的前角运动神经元数目在8h时的降低幅度比C组要大(P＜0.05),而到损伤7d后.两组却无明显差异.DNA电泳显示B、C两组损伤后3d均出现明显的DNA梯形条带和Smearing现象,而且这种现象逐渐向邻近节段扩散.TUNEL检测显示,B、C两组于损伤后的灰质和白质中均能检测到阳性细胞,而且分布于灰质内的阳性细胞数均于1d时达到高峰(P＜0.001),但是在白质内的阳性细胞数量,B组于3d时达到高峰(P＜0.001),C组却于7d时才达到高峰(P＜0.001).结论:与脊髓Allen's撞击模型相比,脊髓爆震伤后同样存在神经细胞的凋亡现象,而且有其时间和空间分布特点.     

术中神经电生理监测和刺激尺神经治疗肘管综合征

目的 评估尺神经松解前置术结合术中超强电刺激治疗肘管综合征的治疗效果.方法 30例中重度肘管综合征患者首先进行尺神经松解前置术,测定并记录松解后小指展肌复合肌肉动作电位(CMAP)的潜伏期及波幅;然后给予尺神经超强电刺激治疗(80 mA,2Hz,10 min),按照同样的方法再次记录小指展肌CMAP的潜伏期及波幅,并将刺激前后的数据进行统计学分析.结果 患者尺神经外膜松解后与超强电刺激后小指展肌CMAP的波幅分别为(2.5±0.4) mV和(6.2±0.8)mV,潜伏期分别为(12.0±0.6)ms和(10.3±0.3)ms,经比较有统计学意义(P＜0.05).超强电刺激后小指展肌CMAP的潜伏期较前平均缩短15.7％,波幅平均增大约2倍.结论 术中超强电刺激对肘管综合征患者的尺神经功能恢复具有辅助治疗作用.     

髓磷脂蛋A活化淋巴细胞对神经元的攻击作用及其亚型特点

目的：观察髓磷脂蛋白活化的淋巴细胞对神经元的直接攻击作用并进一步鉴别攻击神经元的淋巴细胞类型。 方法：实验于2006—02／04在解放军第四军医大学唐都医院神经内科形态学实验室完成。将髓磷脂蛋白肽段活化的反应性淋巴细胞与人脑神经元混和培养，用扫描电镜和荧光显微镜观察淋巴细胞对神经元的攻击作用，并确定对神经元起攻击作用的淋巴细胞的亚型。 结果：由髓磷脂蛋白活化的淋巴细胞对神经元有明显的黏附和攻击作用，可使神经元的细胞膜和髓鞘产生损伤，导致神经元变性。CD4^＋细胞，CD8^＋T细胞和NK等细胞共同参与了对神经元及髓鞘的损伤过程。 结论：髓磷脂蛋白活化的CD4^＋T细胞，CD8^＋T细胞和NK细胞等淋巴细胞对神经元有直接攻击作用，这种直接作用可能是多发性硬化症早期的发病机制之一。