PACAP对培养大鼠海马神经元损伤的保护作用

目的　观察垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)对谷氨酸和葡萄糖缺乏所致海马神经元损伤的保护作用。方法　取新生SD大鼠海马 ,采用B2 7无血清培养基培养神经元 ,MTT法测定神经元存活率 ;分别给予谷氨酸、NMDA或葡萄糖缺乏处理 ,造成原代培养的海马神经元损伤。结果　谷氨酸、NMDA呈剂量依赖性降低海马神经元的存活率 ,葡萄糖缺乏也能明显降低海马神经元的存活率 ,而预先给予PACAP能明显增加海马神经元的存活率。结论　PACAP能保护原代培养的海马神经元 ,减轻谷氨酸和葡萄糖缺乏引起的损伤。     

PACAP对谷氨酸引起海马神经元损伤的保护作用

目的研究垂体腺苷酸环化酶激活肽（ＰＡＣＡＰ）对谷氨酸引起的海马神经元损伤的保护作用及其受体机制。方法海马神经元体外培养７ｄ，给予谷氨酸。结果当谷氨酸是０．１～１．０ｍｍｏｌ／Ｌ时，随着剂量的增加，神经元的存活率逐渐降低；１０－９ｍｏｌ／Ｌ～１０－１３ｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＣＡＰ，能减轻谷氨酸引起的海马神经元损伤；ＰＡＣＡＰⅠ型受体特异性拮抗剂ＰＡＣＡＰ６－３８能抑制ＰＡＣＡＰ减轻谷氨酸对海马神经元损伤作用。结论ＰＡＣＡＰ具有减轻谷氨酸引起的海马神经元损伤的作用，该作用是由ＰＡＣＡＰⅠ型受体介导的。     

Tenascin-C分子中重组Fibronectin各片段对胎鼠脊髓培养神经元的不同作用

用小鼠重组ｔｅｎａｓｃｉｎ－Ｃ（ＴＮ－Ｃ）结构域中类似Ⅲ型ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ（ＦＮ）的不同重复片段，分别作为基质或培养液成分，研究其对培养的胚胎小鼠脊髓神经突起生长、粘附力及神经元活性的影响。结果显示：无论作为基质还是培养液成分，ＦＮ６－８对神经突起生长及神经元活性均有促进作用；ＦＮ３－５对神经突起生长及神经元活性均有抑制作用。ＴＮ－Ｃ促进神经突起生长的功能区在ＦＮ６－８，ＦＮ３－５介导了神经元与ＴＮ－Ｃ的粘附。     

兔大脑皮质视区形态的生後发育

從個體發育方面研究動物中樞神經系統的形態,在本世紀之初已爲神經組織學者所注意。Brodmann(1909)作動物神經系統種族比較研究時,就作了個體發育的研究。His(1904)。有“人腦的發育”一書出版。此外還有Hatai(1902),Haller(1910),Mellus(1912)等人的工作。以後繼續作這種工作的却不甚多。     

NGF对烧伤大鼠血清引起纹状体神经元细胞毒性的影响

目的　观察NGF对烧伤大鼠血清引起神经毒性的影响 ,初步探讨NGF对烧伤后神经元损伤的保护作用及其机制。方法　测定烧伤大鼠纹状体组织NO和LDH含量 ;给予原代培养纹状体神经元不同浓度NGF 2 4h后 ,加入不同浓度烧伤大鼠血清 ,测定细胞存活率及培养液中NO含量。结果　大鼠烧伤后 ,纹状体组织NO和LDH含量明显升高 ,烧伤大鼠血清可引起培养的纹状体神经元存活率下降 ,培养液中NO含量升高。NGF能降低纹状体组织中NO和LDH的含量 ,提高培养的纹状体神经元的存活率 ,减少培养液中NO含量 ,其作用呈剂量依赖性 ,NGF对神经元存活率的影响与NO含量呈显著负相关。结论　NGF对烧伤大鼠血清引起的纹状体神经元损伤有保护作用 ,其作用机制可能是通过抑制NO的神经毒性。     

神经细胞培养中关于取材动物的年龄问题

神经系统不论在动物和人都是最复杂的结构,细胞种类多,数目大,相互种间关系很复杂。为进一步开展神经生物学的研究,神经组织体外培养技术便被选为一个简便和合适的方法。近年来国内或以实验动物的中枢和周围神经组织作体外培养的报道很多,并且开展了不少工作。可是值得提出的是:神经细胞培养得成功与否,虽然环节很多,但很大程度上和所取组织的部位与动物的年龄有关,这是一个关键性的问题。我们在多年的工作中积累了一些经验和体会,在此作一简短的介绍,为有志于神经组织培养者在开始工作时提供参考。神经组织培养成活的标志是:在分离细胞培养的标本中,当种植后24小时内贴壁,逐渐生长出几十微米的突起,神经细胞大多都能存活。器官培养的标本只要组织片薄,不飘浮,这就是贴壁,而后有生长晕     

骨髓基质细胞条件培养液对中脑神经干细胞分化的影响

目的 :探讨骨髓基质细胞条件培养液诱导中脑神经干细胞分化为高比例神经元的机制。 方法 :采用骨髓基质细胞条件培养液培养中脑神经干细胞 7d ,通过免疫细胞化学染色方法鉴别和计数神经元的数量 ,并与自然分化组、骨髓基质细胞膜片段组、骨髓基质细胞固定组以及骨髓基质细胞共培养组相比较。 结果 :用成年大鼠骨髓基质细胞的条件培养液体外培养新生大鼠中脑神经干细胞 ,神经干细胞分化为神经元比例 [(40 .5± 14 .5 ) % ]明显高于自然分化组 [(16 .6± 10 .5 ) % ]、骨髓基质细胞膜片段组 [(2 0 .8± 12 .5 ) % ]以及骨髓基质细胞固定组 ,但与骨髓基质细胞共培养组 [(36 .1± 9.7) % ]相比无统计学差异 (P >0 .0 5 )。 结论 :骨髓基质细胞条件培养液可明显提高神经干细胞分化为神经元的比例     

离体培养胎鼠背根神经节细胞的细胞内pH

用氢离子选择性玻璃微电极，测量了离体培养纯种胎鼠的背根神经节细胞的细胞内ｐＨ（ｐＨｉ），其值在７．０６～７．１２之间，不同大小的细胞ｐＨｉ值无显著差异，ｐＨｉ随培龄的延长逐渐增加，在培龄为１５ｄ时ｐＨｉ骤然升高，以后趋于稳定，结果表明，细胞的培龄达１４ｄ以上才能测得较稳定的ｐＨｉ值，本文还对如何测得稳定的ｐＨｉ值进行了讨论。     

NGF对烧伤大鼠血清引起纹状体神经元细胞毒性的影响

观察NGF对烧伤大鼠血清引起神经毒性的影响。初步探讨NGF对烧伤后神经元损伤的保护作用及其机制,测定烧伤大鼠纹状体组织NO和LDH含量;给予原代培养纹状体神经元不同浓度NCF24h后,加入不同浓度烧伤大鼠血清,测定细胞存活率及培养液中NO含量,大鼠烧伤后,纹状体组织NO和LDH含量明显升,烧伤大鼠血清可引起卢培养的纹状体神经元存活率下降,培养液中NO含量升高,NGF能降低纹状体组织中NO和LDH的含量,提高培养的纹状体神经元的存活率,减少培养液中NO含量,其作用呈剂量依赖性,NGF对神经元存活率的影响与NO含量呈显著负相关,NGF对烧伤大鼠血甭引起的纹状体神经元损伤有保护作用。其作用机制可能是通过抑制NO的神经毒性。     

垂体腺苷酸环化酶激活肽诱导PC12细胞突起生长的作用

目的　研究垂体腺苷酸环化酶激活肽（ＰＡＣＡＰ） ３８与ＰＡＣＡＰ２７ 在ＰＣ１２ 细胞突起生长中的作用，并探讨介导其作用的受体和细胞内第二信使机制。方法　采用ＰＣ１２细胞分散培养法，观察接种７２ ｈ 时ＰＣ１２ 细胞突起生长阳性细胞的百分比。结果　当ＰＡＣＡＰ３８ 和ＰＡＣＡＰ２７ 的浓度为１ ×１０－ ７ ～１ ×１０－ １１ ｍｏｌ·Ｌ－１ 之间时，均能诱导ＰＣ１２细胞突起生长，其中以１×１０ －９ ｍｏｌ·Ｌ－ １ 的浓度作用最明显，量效曲线呈“钟”形。ＰＡＣＡＰ Ⅰ型受体拮抗剂ＰＡＣＡＰ６～３８和ｃＡＭＰ依赖的蛋白激酶抑制剂ＲｐｃＡＭＰＳ 能显著地抑制ＰＡＣＡＰ诱导ＰＣ１２ 细胞突起生长的作用，而蛋白激酶Ｃ 抑制剂Ｈ７ 却没有这个作用。结论　ＰＡＣＡＰ３８ 和ＰＡＣＡＰ２７均能诱导ＰＣ１２ 细胞突起生长，该作用是由ＰＡＣＡＰ Ⅰ型受体介导的，是通过细胞内ｃＡＭＰ 依赖的蛋白激酶系统实现的