两种不同染色法在流式细胞术中检测细胞周期的探讨

目的比较碘化丙啶（PI）和4,6-联脒-2苯基吲哚（DAPI）两种不同染色方法在流式细胞术中对细胞周期检测的影响。方法 A549细胞分别采用PI和DAPI染色法进行染色,于染色后0和24h进行流式细胞仪检测细胞G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较两种方法的测定结果,同时进行细胞计数,观察细胞浓度变化。结果PI和DAPI法染色后0h上机测定,结果分别为：CV值（7.72±0.19）、（5.92±0.09）,G0/G1期含量（69.63±1.16）%、（69.87±1.28）%,S期含量（24.53±0.47）%、（24.43±0.86）%,G2/M期含量（5.85±1.04）%、（5.72±0.65）%,两种方法检测细胞周期的结果基本一致（P〉0.05）;染色后24h重新测定,结果分别为：CV值（8.82±0.05）、（6.09±0.30）,G0/G1期含量（58.50±0.90）%、（70.47±0.81）%,S期含量（31.73±0.75）%、（23.67±0.45）%,G2/M期含量（9.51±0.47）%、（5.86±0.46）%,两种方法检测细胞周期的结果差异有统计学意义（P〈0.05）。DAPI法染色后0和24h测定结果基本一致（P〉0.05）,而PI法检测结果差异有统计学意义（P〈0.05）。细胞计数结果显示,放置24hPI法细胞损耗为63.14%,DAPI法细胞损耗为12.50%,两种方法结果差异有统计学意义（P〈0.05）。染色24h后PI法细胞开始崩解,镜下见较多的细胞碎片,而DAPI法细胞形态良好。结论应用流式细胞术检测细胞周期,DAPI染色法优于PI染色法。     

糖尿病合并冠心病冠脉介入后造影剂肾病相关因素的研究

目的研究糖尿病合并冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)治疗后发生造影剂肾病(CIN)的危险因素。方法在广东省人民医院选取2008年11月至2009年12月糖尿病合并冠心病患者行PCI患者383例。根据术后血清肌酐变化情况分为两组,即造影剂肾病组(CIN组)60例,非造影剂肾病组(非CIN组)323例,回顾性调查分析两组患者的临床资料,应用Logistic回归分析发生造影剂肾病的危险因素。结果 383例患有糖尿病合并冠心病并行PCI术患者中,术后有60例发生CIN,CIN的发生率为15.67%;应用Logistic回归分析发现术后发生CIN的危险因素为肾功能不全(P<0.01,OR=6.033)、手术前后使用速尿(P<0.01,OR=4.443)和高血压(P=0.001,OR=3.693)。结论肾功能不全,手术前后使用速尿和高血压是糖尿病合并冠心病患者PCI治疗后发生造影剂肾病的危险因素。在进行PCI治疗前后应进行充分的水化治疗并且做好预防护理措施。     

Effect of the baseline HbA1c on the MACEs in patients with coronary artery disease after percutaneous coronary intervention

Background The present studies evaluated the association between admission glucose and adverse outcomes of people with coronary artery disease(CAD) after primary percutaneous coronary intervention(PCI), but the effects of glucose control levels on these patients' outcomes are not fully studied, and the prognostic value of hemoglobin A1c(Hb A1c) for a better survival is still uncertain. Methods Our study included 440 patients with CAD undergoing the PCI therapy after admission, and who were divided into 2groups, one had Hb A1 c ≤ 6.5%(n = 309), the other 6.5%(n = 131). Then, we gave these patients clinical follow-ups at the first, third, sixth, twelfth month respectively after PCI. Results There were no significant differences between the two groups at the baseline characteristics and the drugs taken by the patients after PCI. But we found that the outcomes of major adverse cardiac events(MACEs) were significantly better in Hb A1 c ≤6.5% group than in Hb A1 c 6.5% group(P = 0.016) according to the COX multivariate regression analysis. Conclusion The MACE-free survival after PCI is significantly better when Hb A1 c is≤ 6.5% than Hb A1 c is 6.5%.     

经皮冠状动脉介入治疗术后支架内再狭窄的遗传学与表观遗传学研究进展

冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)是人类最主要的死亡原因之一,也是消耗巨大医疗资源的疾病.经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)是冠心病治疗的重大进展之一.然而,PCI治疗面临支架内再狭窄(in-stent restenosis,ISR)的重大挑战.尽管药物支架减少了ISR的发生,再狭窄发生率仍达5％～10％.支架后血管内皮细胞过度增生和平滑肌细胞移行是支架术后再狭窄的主要原因.再狭窄个体差异的确切机制还不完全明确,可能存在多种原因.除了高年龄、吸烟、糖尿病等可能增加再狭窄率外,越来越多的研究发现遗传因素和表观遗传学因素对疾病的进展有着重要影响.本文主要对冠心病患者PCI术后发生支架内再狭窄的遗传学和表观遗传学研究进行综述,以期初步确定冠心病患者PCI术后再狭窄发生的遗传危险因素.     

DNA混合池技术全基因组关联研究筛查主动脉夹层易感基因的研究

目的筛选主动脉夹层发病机制相关的遗传易感基因。方法选取主动脉夹层患者为病例组（150例）,按照性别、年龄、是否吸烟、合并高血压、糖尿病情况与病例组匹配的原则入选排除主动脉夹层、重大心血管疾病及肿瘤的志愿者为对照组（250例）,均从外周血提取基因组DNA,采用DNA混合池技术为基础的Illumina Human660W—Quad芯片扫描,筛选主动脉夹层发病相关的遗传易感基因。结果对照组女性数量明显多于病例组（P〈0．01）;在年龄、吸烟、高血压、糖尿病人数方面差异均无统计学意义（P〉0．05）。根据芯片扫描结果,挑选silhouettewidth计算值大于0．7,最小等位基因频率（MAF）大于0．05,且SNPs位于已知名称基因上的前5个SNPs位点。结果发现,遗传变异位点SNP rs2970873（位于PPARGClA基因）、SNP rs12678080（位于SGCZ基因）、SNP rs489526（位于UNCl3C基因）、SNP rs6928665（位于TRAM2基因）和SNP rs17837003（位于ACCNl基因上）可能与主动脉夹层的发病机制有关。结论SNPsrs2970873、rs12678080、rs489526、rs6928665和rsl7837003可能与主动脉夹层发病机制相关。     

婴儿口服地高辛醑剂后血药浓度监测结果分析

目的 探讨婴儿口服地高辛醑剂后血药浓度与临床疗效、给药剂量、合并用药情况、性别、年龄和体重的相关性.方法 查阅广东省人民医院2005 ～2009年口服地高辛醑剂的婴儿病历,记录疗效、用药情况、性别、体重、年龄、血药浓度监测结果等,用统计软件SPSS 13.0进行分析.结果 415例婴儿口服地高辛醑剂血药浓度测定值在治疗浓度0.8～2.2 ng/ml的共270例,占65.1％;低于治疗浓度范围下限(＜0.8 ng/ml)的共107例,占25.8％;高于治疗浓度范围上限(＞2.2 ng/ml)的共48例,占11.6％.婴儿地高辛血药浓度值与性别不存在明显相关性,但与给药剂量、年龄、体重、合并用药和具体病情有关.结论 地高辛血药浓度受个体因素与具体病情影响,药物剂量的制订和调整,应考虑可能影响地高辛血药浓度的各种因素,结合婴儿自身情况来决定最佳给药方案.     

CYP3A5、UGT1A1、UGT2B7基因多态性与肾移植受者 他克莫司血药浓度的相关性研究

目的:探讨CYP3A5、UGT1A1、UGT2B7基因多态性与肾移植受者他克莫司血药浓度的相关性.方法:共纳入124例肾移植术后采用他克莫司十霉酚酸酯+泼尼松三联治疗方案的患者.采用酶放大免疫测定法(Emit)检测他克莫司血药浓度;采用实时荧光定量PCR方法和Taqman基因分型技术测定CYP3A5*3、UGT1A1*6、UGT2B7*3、UGT1A1*28、UGT2B7*2基因多态性;应用Kruskal-Wallis H检验法分析5个SNPs基因多态性与他克莫司血药浓度的相关性.结果:CYP3A5*3突变型的他克莫司血药浓度GG/AG(7.75±2.56)/(6.75±1.85) ng· mL-1显著高于野生型AA (5.00±1.81)ng·mL-1 (P＜0.01);UGT1A1*6基因型GG/AG的血药浓度分别为(7.15±2.72)/(6.74±1.81)ng·mL-1,显著高于基因型AA(4.45±0.49)ng·mL-1(P=0.022).UGT2B7*3基因型GG/GT的血药浓度分别为(7.00±1.95)、(7.48±2.22)ng·mL-1,显著高于基因型TT(6.78+3.00)ng·mL-1(P=0.014).UGT1A1*28与UGT2B7*2基因多态性与他克莫司血药浓度无显著相关性(P＞0.05).结论:他克莫司血药浓度与CYP3A5*3、UGT1A1*6、UGT2B7*3基因多态性相关.     

白藜芦醇抑制人肝微粒体代谢色氨酸的研究

目的研究白藜芦醇对人肝微粒体代谢色氨酸生成犬尿氨酸的影响。方法分别考察孵育时间、色氨酸浓度、微粒体蛋白浓度,建立体外人肝微粒体孵育色氨酸代谢体系;采用高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测肝微粒体孵育体系中色氨酸和犬尿氨酸浓度。基于体外人肝微粒体孵育色氨酸代谢体系探讨白藜芦醇对色氨酸代谢影响。结果色氨酸在体外人肝微粒体中最佳孵育时间为90 min,色氨酸浓度为8 mg·L^-1,微粒体蛋白浓度为1 g·L^-1;酶反应速率常数K m为(95.91±22.29)μmol·L^-1,最大反应速率V max为(21.34±2.58)μmoL·g^-1·min^-1。与已知的吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂Epacadostat相比,结果显示白藜芦醇也能够抑制人肝微粒体中色氨酸代谢生成犬尿氨酸且具有浓度依赖性。结论白藜芦醇具有抑制IDO活性的作用,表明IDO可能是白藜芦醇发挥药理作用的一个潜在靶点,为进一步研究白藜芦醇的药理作用及色氨酸代谢提供重要依据。     

中国汉族196人红细胞谷胱甘肽硫转移酶的活性分布

目的采用分光光度法测定人RBC谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)活性,研究196名(男101名,女95名)健康汉族人的GSTs活性分布。方法制备人RBC裂解后,参照Habdous等的方法测定GSTs活性。反应体系如下:0.1 mol.L-1磷酸钠缓冲液(pH 6.5)2.6 mL,RBC裂解液0.1 mL,30 mmol.L-1谷胱甘肽0.1 mL,10 mmol.L-11-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)0.1 mL。结果方法的日内和日间精密度均<10%。RBC GSTs活性呈正偏态分布,196例健康汉族人的平均GSTs活性为(3.89±0.96)U.(gHb)-1。不同年龄组平均GSTs活性无差异,而女性的平均GSTs活性比男性的平均值高,但并不显著。结论确定了可供临床参考的健康汉族人GSTs活性分布范围。     

3种不同加工川贝母有效成分的比较

目的：通过对３种不同加工川贝母有效成分分析比较,为优化川贝母加工工艺提供理论依据。方法：提取不同加工方法处理的川贝母总皂苷和总生物碱并测定其含量。结果：测得传统加工法、水洗法、打硫法处理后川贝母的总苷含量分别为０．８８７％、０．９４９％、０．４８６％,总生物碱含量分别为０．０８２％、０．０９８％、０．０９５％。结论：单因素方差分析的两两比较显示水洗加工方法为优。