抗人IgG单克隆抗体的研究——Ⅰ.分泌抗人IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

本文报道用人IgG免疫BALB/c 小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞系SP2/O融合,获得 3株分泌抗人 IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为 SIBPH1、SIBPH2和 SIBPH3。现重点报道SIBPH1株。用琼脂双扩散和免疫电泳等方法,证实该株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体,对IgG具有良好的专一性,注入同系小鼠腹腔可诱生含较高效价抗IgG的腹水(双扩散1:256～512),单克隆抗体属小鼠IgG_1亚类,该杂交瘤细胞株经组织培养传代逾半年,冻存12个月,复苏良好,分泌抗IgG性能稳定。本文还对杂交瘤细胞建株的若干问题进行了讨论。     

HCG 酶免疫诊断试剂和血球诊断试剂的制备和应用

目前国内妊娠诊断主要采用乳胶凝集抑制试验(LAIT),只能测出2500IU/L 浓度以上的人绒毛膜促性腺激素(HCG),故大多数停经40天以内和部分停经40～60天、HCG 分泌偏低的妊娠,以及宫外孕等不能及时确诊。我们在建立β-HCG 单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株后,选择与黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)交叉反应低,但能识别明显不同的抗原位点的两种McAb(C_3和C_4),制备成HCG     

前驱期嗜酸性肉芽肿性多血管炎1例

<正>嗜酸性肉芽肿性多血管炎(EGPA),过去称为变应性肉芽肿性血管炎，是抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎(AAV)中最罕见的类型，其特征包括富含嗜酸性粒细胞的肉芽肿性炎症，与支气管哮喘、嗜酸性粒细胞增多相关的中小血管炎^[1]。EGPA的全球发病率和流行率均较低，     

小鼠IgG类单克隆抗体三种纯化方法的比较

单克隆抗体纯化技术目前仍在发展中,为适应其在临床诊断、治疗等方面日益广泛的应用,本文详细介绍了辛酸硫酸铵二步沉淀、羟基磷灰石层析和葡萄球菌A蛋白亲和层析纯化小鼠IgG类单克隆抗体的技术及其重要改进,为规模性制备纯化单克隆抗体制剂提供了经验。     

雷帕霉素在脓毒症致肺纤维化大鼠中应用研究

目的 探讨雷帕霉素在脓毒症致肺纤维化大鼠中的应用效果及其可能作用机制.方法 选取90只SD大鼠,采用随机数字表法将其分为对照组、脓毒症组与雷帕霉素组,每组各30只.对照组大鼠给予生理盐水腹腔注射;脓毒症组大鼠给予脂多糖(LPS)腹腔注射;雷帕霉素组大鼠给予LPS、雷帕霉素腹腔注射.采用Ashcrof评分评估大鼠肺纤维化程度;分光光度法测定大鼠肺组织羟脯氨酸(HYP)含量;应用免疫印迹法检测α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达;实时定量聚合酶链式反应检测大鼠肺组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)的表达.结果 实验第7、14、21、28、35天,脓毒症组、雷帕霉素组大鼠肺组织Ashcrof评分,HYP含量,α-SMA、TGF-β1表达水平,MMP-2、TIMP-1的mRNA表达水平均明显高于对照组;雷帕霉素组大鼠肺组织Ashcrof评分,HYP含量,α-SMA、TGF-β1表达水平,MMP-2、TIMP-1的mRNA表达水平均明显低于脓毒症组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 雷帕霉素可能通过降低TGF-β1、α-SMA、MMP-2及TIMP-1的表达,减轻脓毒症致肺纤维化的进展程度,从而发挥对肺损伤的保护作用.     

用A蛋白亲和层析法分离人和狗的IgM

本文叙述一种提纯正常人和狗IgM的方法,其步骤如下: 一、G-200柱层析:用含有0.1M醋酸(pH3.0)的Sephadex G200柱(2.0×90cm),将3ml正常人或狗血清中所     

小鼠IgG_1抗血清的制备

<正> 小鼠IgG分有IgG_1、IgG_(2a)、IgG_(2b)和IgG_3四种亚类,现用B淋巴细胞杂交瘤所分泌的单克隆抗体(McAb),均属一定的Ig及其亚类,因此需用相应的抗血清进行鉴定。这类抗血清制备较难、国内尚无产品供应。我们利用杂交瘤细胞在培养液中分泌的McAb为原料,经纯化和免疫家兔,制得较为满意的兔抗鼠IgG_1血清,鉴于本法操作简便、经济实效,特介绍如下。     

雷帕霉素对脂多糖诱导急性肺损伤的保护作用及可能机制研究

目的 探讨雷帕霉素对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤的保护作用及可能机制.方法 将90只大鼠随机分为对照组、LPS组和雷帕霉素处理组.HE染色观察肺组织病理学改变.酶联免疫吸附方法检测血清IL-6、IL-10和TNF-α的表达.硫代巴比妥酸方法、黄嘌呤氧化酶方法和酶促反应谷胱甘肽消耗方法分别测定血清MDA、SOD和GSH-Px活力.实时荧光定量PCR方法检测肺组织mTOR和P70S6K mRNA表达变化.结果 雷帕霉素处理能降低LPS诱导的大鼠血清IL-6和TNF-α浓度,升高IL-10浓度;降低大鼠血清MDA含量,增加血清SOD和GSH-Px含量.此外,雷帕霉素明显降低IPS导致的大鼠肺组织mTOR和p70S6KmRNA表达升高.结论 雷帕霉素可能通过抑制mTOR和p70S6K的表达,减轻炎症因子和氧化应激损伤,从而对LPS诱导的急性肺损伤发挥保护作用.     

抗人IgG单克隆抗体的研究 Ⅲ.8株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体特性分析和初步应用

本文报道8株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体的血清学特性,其中4种属抗全IgG,3种是对IgG_4无反应的抗IgG,1种是对IgG_3无反应的抗IgG。各单克隆抗体之间的效价和结合抗原的能力有所差异。根据组合试验,选出A_2与B_1二种单克隆抗体进行组合,用以检测正常人血清中IgG含量,与常规抗血清相比较呈良好的相关性(r=0.90)。用以制备亲和层析柱,纯化人IgG,得率比常规抗血清高7.3倍。据此认为,研制这类单克隆抗体将为临床免疫检测提供有效的试剂。