培养环境的温度变化与人MⅡ期卵母细胞纺锤体形态学变化的关系

目的:观察环境温度的改变对MⅡ期人卵纺锤体结构的影响.方法:40例非男性因素的不孕妇女,将常规体外授精后未受精的MⅡ期卵子置于室温(23～25℃)直至纺锤体消失.于纺锤体消失后,将卵子分成3个实验组:1组纺锤体消失后立即复温(n=8);2组纺锤体消失后室温下静置5 min再复温(n=6);3组纺锤体消失后室温下静置10 min再复温(n=6).卵子复温后5 min,10 min,2 h分别观察纺锤体的复现情况.结果:20个未受精的MⅡ期卵子置于室温下5 min内纺锤体均消失.1组中的8个卵子,2组中的6个卵子复温后再次观测到了MⅡ期纺锤体.3组中的6个卵子只有3个卵子再次出现了MⅡ期纺锤体.对照组的18个卵子放置于37℃恒温板上观察30 min,纺锤体均未见消失.结论:MⅡ期卵子纺锤体对环境温度的改变非常敏感.温度降低将导致纺锤体消失,随着时间的延长,纺锤体复现几率明显减少.     

瘦素受体蛋白在人卵巢黄素化颗粒细胞的表达

目的　通过检测人卵巢卵泡液中瘦素 (leptin)的浓度及瘦素受体蛋白在人卵巢黄素化颗粒细胞的表达 ,探讨瘦素对人卵巢的作用。方法　体外受精胚胎移植 (IVF -ET)患者经阴道超声引导下取卵时留取卵泡液 ,采用酶联免疫吸附测定 (ELISA)方法检测血清与人卵泡液中瘦素浓度并分离颗粒细胞体外培养 ,采用免疫细胞化学方法检测瘦素受体蛋白的表达。结果　人卵巢黄素化颗粒细胞检测到瘦素受体蛋白的表达 ,即荧光显微镜下观察到颗粒细胞发出黄绿色荧光 ;卵泡液中瘦素浓度平均为 ( 19 2 8± 4 2 2 )ng/ml,与血清中瘦素浓度 ( 2 0 0 2± 3 45 )ng/ml比较差异无显著性(P >0 0 5 )。结论　卵泡液中检测到瘦素的存在 ,并在人卵巢黄素化颗粒细胞上检测到瘦素受体蛋白的表达 ,提示卵巢为瘦素作用的靶器官 ,瘦素可能参与卵巢功能的调节。     

控制性超促排卵治疗与子宫内膜

生理情况下人类胚胎着床大约发生在排卵后第7d左右,在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)等辅助生殖技术中应用药物进行控制性超促排卵(COH),来得到较多的卵子数.但控制性超促排卵使子宫内膜着床窗发生改变,影响胚胎着床率.超促排卵对子宫内膜的影响可能出现在以下方面:①使子宫内膜组织学分日与生理不符、腺体发育和间质发育的同步性发生改变.②扫描电镜观察子宫内膜超微结构-胞饮突表达异常,导致内膜种植窗开放与胚胎发育不同步.③子宫内膜的激素受体表达异常,改变内膜对激素的反应.控制性超促排卵治疗使子宫内膜形态学、组织学、激素受体发生变化,导致子宫内膜种植窗开放异常,影响辅助生殖技术的成功率.     

第一极体不能精确定位人卵母细胞纺锤体

目的 观测人卵母细胞纺锤体的确切位置，从而指导今后的生殖医学临床工作。方法 应用纺锤体成像系统观测体外成熟及体内成熟组人卵母细胞纺锤体，测量卵子中心、纺锤体与第一极体之间形成的角度。比较两组结果的差异。结果 体外成熟组纺锤体与第一极体形成角度和体内成熟组存在显著差异(P=0．006)。结论 人卵母细胞的位置并不能准确定位卵母细胞纺锤体的位置。体外成熟组纺锤体与第一极体形成的角度要明显小于体内成熟组。应用纺锤体成像系统可以安全、有效地观察人卵母细胞纺锤体。     

口服避孕药在体外受精周期中的应用进展

目前口服避孕药(Ocs)在体外受精(IVF)周期中广泛应用,但各位学者研究结果不一.多数文献认为,口服避孕药应用于卵巢高反应和低反应患者可以改善体外受精临床结局,而口服避孕药应用于卵巢正常反应患者,除在促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRHA)周期可通过其对月经周期进行控制,有计划地安排工作以外,并不改变体外受精临床结局.口服避孕药停药后5 d或月经第3天给促性腺激素(Gn)优于停药后2 d给促性腺激素.选择合理的口服避孕药用药方案和临床适应症对改善体外受精临床结局起着重要作用.     

人类ART中卵巢反应性与子宫内膜容受性超声检查研究

人类生殖过程中女性能否成功妊娠的两个重要因素是卵巢的反应性和子宫内膜的容受性。超声波通过测定卵巢、卵泡的血流指数以及对子宫内膜的形态学(内膜回声类型、厚度、体积、子宫结构的改变等)和功能学(内膜、子宫动脉的血流指数和子宫收缩性的变化等)的评价,提供了大量信息,较普遍认为最好的妊娠条件是发育卵泡血供丰富,内膜呈三线征、厚度>7mm,子宫动脉搏动指数(PI)<3,内膜下可探及血流。但是一些学者尚有不同的观点,需要实验研究进一步证实。     

宫颈癌组织中HPV16 E7序列多态性分析

目的探讨广东地区宫颈癌组织中HPV16肿瘤相关性抗原E7基因序列的多态性.方法采用通用引物PCR直接测序法对宫颈癌标本中的HPV分型,从含有HPV16型的标本中采用自行设计的多重引物通过巢式PCR扩增出HPV16E7,经DNA序列测定法检测其基因变异,进而寻找其热点突变.结果50例宫颈癌组织HPV-DNA的检出率为78%,其中HPV16和HPV18型混合感染18例,单纯HPV16型感染15例.33例含有HPV16型的标本中扩增出25例HPV16E7,其中17例647位核苷酸“T”变异“C”,导致相应的蛋白质由天冬氨酸变异为丝氨酸.结论广东地区宫颈癌组织中HPV16E7DNA序列发生碱基替换的区域主要在647位至846位,热点突变点为Nt647和Nt846.     

hCG对JEG-3滋养细胞系表达细胞因子的影响

目的：揭示人类绒毛膜促性腺激素（hCG)是否通过改变细胞因子的生成而影响滋养细胞的侵袭性。方法：以永生化的滋养细胞系JEG－3为研究对象，采用逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）方法观察了hCG对JEG－3细胞与细胞侵袭力调节有关的多种因素因子表达的影响，结果：JEG－3细胞表达HGF，IGF－II，VEGF和TGF－β3，且VEGF的表达以VEGF121和VEGF165为主，而不表达IGF，TGF－1β，TGF－β2，IL－β1，25U／mL hCG处理50h可显著降低JEG－3细胞中HGF的表达，同时强烈诱导VEGF121和VEGF165的表达，而其它基因的表达未发生明显变化，结论：HGF对滋养细胞的侵入起促进作用，而VEGF则具有抑制效应，说明，高浓度的hCG可能通过两种细胞因子的自分泌机制对滋养细胞的侵入起抑制作用。     

白细胞介素及肿瘤坏死因子基因超家族在先兆子痫胎盘中的表达

为探讨白细胞介素和肿瘤坏死因子 (受体 )超家族基因表达与先兆子痫病理发生的关系 ,以包含 2 4 3种人类细胞因子相关基因cDNA片段的基因芯片 ,检测严格配对的先兆子痫和正常胎盘组织中基因表达谱的差异。结果显示受检的白细胞介素和 (或 )白细胞介素受体基因共 2 2种 ,绝大多数基因在先兆子痫胎盘中的表达增强 ,而IL 2受体 (IL 2Rα )基因 (Gen Bank :X0 10 5 7)在先兆子痫胎盘中的表达低于正常胎盘。肿瘤坏死因子 (GenBank :X0 2 910 )及其配体 (GenBank :U0 3398、U375 18、AF0 5 3712、AF0 5 5 872 )、受体 (GenBank :X6 0 5 92、X6 3717、M835 5 4、AF0 16 2 6 6、AF0 16 2 6 7、U812 32 )等 10余种肿瘤坏死因子 (受体 )超家族基因在先兆子痫胎盘中的表达也较高。说明 ,白细胞介素及肿瘤坏死因子 (受体 )基因超家族的高表达可能与先兆子痫的病理发生关系密切     

滋养层细胞侵入相关基因在先兆子痫胎盘中的表达

探讨与滋养层侵入有关的细胞外基质分子相关基因在先兆子痫胎盘中的表达，采用分别点样有220余种人细胞因子相关基因和人类激素相关基因cDNA片段的两款基因芯片，检测经过严格配伍的先兆子痫和正常胎盘组织的基因表达谱差异。结果显示：钙粘蛋白、胶原、整合素、选择蛋白等18种细胞外基质分子基因的表达在先兆子痫和正常胎盘组织间相差2倍以上，且全部表现为在先兆子痫胎盘中的表达增强。先兆子痫患者的胎盘组织中基质金属蛋白酶(MMP)-10、-13、-15和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-2、TIMP-3、纤溶酶原、纤溶酶原激活物等的表达均较正常者高。提示胎盘中细胞外基质分子及其降解酶基因表达异常可能与先兆子痫的病理发生关系密切。