脐带采集液中抗生素的合理选择

目的:了解脐带采集过程中脐带污染菌的种类,为脐带采集液中合理添加抗生素提供实验依据。方法:采用BacT/Alert 3D240培养系统进行微生物培养;采用梅里埃API鉴定系统鉴定菌种;采用ATB药敏系统进行药敏试验;采用油红O染色和茜素红染色,测定人脐带组织间充质干细胞（HUCMSCs）的成脂分化和成骨分化潜能。结果:采集1 562份脐带,微生物培养阳性的386份脐带采集液共检出细菌及真菌438株,其中革兰阴性菌193株（44.1%）,主要为大肠埃希氏菌,其对头孢西丁的敏感率为90.3%;革兰阳性菌210株（48.0%）,主要为肠球菌,其次是葡萄球菌和链球菌,三者对青霉素的敏感率分别为93.1%、19.7%、92.9%;真菌35株（8.0%）,主要为白假丝酵母菌,真菌对两性霉素B的敏感率为100%。进一步的结果显示,与对照组比较,头孢西丁、青霉素、两性霉素B和三者混合使用对HUCMSCs生长、增殖和多向分化均无影响（P>0.05）。结论:脐带采集污染优势菌株依次为大肠埃希菌、粪肠球菌、白假丝酵母菌;脐带采集液中加入头孢西丁、青霉素和两性霉素B可以显著减少细菌和真菌污染。     

外源性IL-6 通过STAT3 通路促进卵巢癌细胞对顺铂 耐药

目的:探讨外源性白细胞介素-6（IL-6）诱导卵巢癌（OvCa）对顺铂（Cisplatin）耐药的作用。方法:6孔板接种A2780 细胞, 分为对照（Control）组、AG490 组、重组人IL-6（rhIL-6）组和rhIL-6+AG490 组,应用Western 印迹检测rhIL-6 对A2780（顺铂敏 感OvCa 细胞株）的磷酸化信号转导与转录激活因子3（p-STAT3）蛋白表达的影响。96 孔板接种A2780 细胞,分为Control 组、 AG490 组、顺铂（Cisplatin）组、AG490+Cisplatin 组、rhIL-6 组、rhIL-6+AG490 组、rhIL-6+Cisplatin 组和rhIL-6+AG490+Cisplatin 组,CCK8 实验检测rhIL-6 对A2780 细胞增殖的影响。12 孔板接种A2780 细胞, 分为Control 组、AG490 组、Cisplatin 组、 AG490+Cisplatin 组、rhIL-6 组、rhIL-6+AG490 组、rhIL-6+Cisplatin 组和rhIL-6+AG490+Cisplatin 组, 细胞凋亡实验检测rhIL-6 对A2780细胞顺铂耐药的影响。以36 只雌性裸鼠为研究对象,随机分为Control 组、rhIL-6 组、Cisplatin 组、AG490 组、rhIL-6+ Cisplatin 组和rhIL-6+AG490+Cisplatin组, 每组6只。腹腔注射A2780细胞, 给药4 周后颈椎脱臼处死小鼠, 检测rhIL-6 对 OvCa 腹腔种植瘤耐药的影响。结果:Western 印迹结果显示,与Control 组相比,rhIL-6 组p-STAT3 蛋白表达显著增加（t=6.55, P<0.01）;CCK8 实验结果显示,与Control 组相比,rhIL-6 组细胞增殖增加（t=4.148,P<0.05）;细胞凋亡实验发现,与Cisplatin 组 相比,rhIL-6+Cisplatin 组细胞凋亡显著降低（t=20.03,P<0.001）,与rhIL-6+Cisplatin 组相比,rhIL-6+Cisplatin+AG490 组细胞凋 亡显著增加（t=22.16,P<0.001）;小鼠体内实验结果发现,与Cisplatin 组相比,rhIL-6+Cisplatin 组瘤结节数量和重量显著增加（t= 2.783,P<0.05）,与rhIL-6+Cisplatin组相比,rhIL-6+Cisplatin+AG490 组瘤结节数量和重量显著降低（t=3.306,P<0.05）。结论:外 源性IL-6通过STAT3通路诱导OvCa 对顺铂耐药。     

基因表达谱分析肝细胞癌的特征基因

目的:生物信息学方法建立全面的肝细胞癌（HCC）差异表达基因谱以及初步筛选基于该恶性肿瘤样本的特征 基因。方法:利用R语言中的edgeR包分析不同组之间差异表达的基因（DEGs）。利用STRING数据库分析预测蛋白质的 功能联系和蛋白质相互作用。R语言的clusterProfiler包做GO（gene ontology）（包括biological process、 molecular function和cellular component）及KEGG（kyoto encyclopedia of genes and genomes）通路富集分析。 筛选差异基因显著富集的GO和KEGG分子途径。利用SLC7A11（solute carrier family 7 member 11）和CCDC14 （coiled-coil domain-containing 14）基因作为肝细胞癌的标志物,利用ELISA法进行检测（确诊的HCC阳性患者为 HCC组,共195例;HCC阴性正常人群为对照组,共107名）,计算阳性率。结果:与癌旁对照样本相比,一共鉴定出454 个差异表达基因,其中高表达基因234个,低表达基因220个。PPI方法进一步筛选出排名前10的重要潜在基因,其中 SLC7A11和CCDC14两个基因排名靠前。利用富集分析,差异基因主要集中在neuroactive ligand-receptor interaction通路中。与对照组相比,HCC组SLC7A11和CCDC14存在显著的高表达[SLC7A11:（70.12±14.3） ng/mL比 （23.12±7.11）ng/mL,t=6.17,P<0.001;CCDC14:（6.17±2.31）pg/mL比（2.13±0.84）pg/mL,t=5.35, P<0.001]。SLC7A11针对HCC检测阳性率达到80.2%,而CCDC14达到68.8%。结论:SLC7A11和CCDC14可以作为HCC的两个 潜在的有效临床生物标志物。     

胃癌局部神经侵犯的临床意义

目的探讨胃癌患者根治术后病理局部神经侵犯(PNI)的临床意义。方法对110例行胃癌根治术患者的病理组织行苏木素-伊红(HE)染色,当肿瘤细胞侵犯神经束或神经束膜时,判断为PNI阳性,分析PNI与胃癌临床病理特征之间的关系。结果 PNI阳性49例。PNI与肿瘤大小、浸润深度、区域淋巴结转移、TNM分期、脉管癌栓、断端阳性有显著相关性,但与性别、年龄、肿瘤部位及远处转移无相关性。虽然PNI与胃癌患者预后密切相关,但不是影响预后的独立因素。结论胃癌周围神经侵犯与肿瘤的进展密切相关,其有可能作为新的标准完善胃癌的分期。     

腔镜下交通静脉离断术治疗严重下肢静脉曲张

目的探讨腔镜下交通静脉离断术治疗严重下肢静脉曲张的效果。方法将我院2010年5月～2011年5月收治的39例(47条患肢)严重下肢静脉曲张患者随机分成3组,A组行传统手术,B组行腔镜筋膜下交通支离断术(SEPS)+传统手术。C组行腔镜筋膜外交通支离断术(ELPS)+传统手术。分别比较3组患者疼痛时间、下地时间、住院时间、术后并发症、溃疡愈合及色素沉着好转时间。结果 47条患肢经手术治疗后肢体症状及浅静脉曲张消失,溃疡愈合,色素沉着好转。B、C组住院天数、手术时间、术后局部肿胀、胫前麻木及3个月后色素沉着、皮下脂肪硬化程度优于A组。随访3个月,各组均未出现新生溃疡及浅静脉曲张复发。结论腔镜深筋膜下及腔镜筋膜外交通静脉离断术是治疗下肢静脉性溃疡的重要手术方式,治疗严重下肢静脉曲张安全有效,损伤少,并发症少,优于传统手术。     

浙江省乐清市2007-2009年肺结核患者新发糖尿病情况调查

糖尿病易并发结核病,但许多糖尿病/结核患者并无血糖异常症状,而以结核病为首诊（首发）主诉[1-2].如果医生在接诊时未查血糖,则可能为以后的结核病治疗工作增加难度.本研究调查浙江省乐清市2007年1月至2009年12月结核病门诊所有病例档案,统计结核患者在诊治过程中新发糖尿病情况,为临床检查治疗方案提供依据.     

Raf激酶抑制蛋白增强卵巢癌细胞的化疗敏感性

摘 要　目的：探讨Raf激酶抑制蛋白（Raf kinase inhibitor protein,RKIP）对卵巢癌SKOV-3细胞化疗敏感性的影响。方法：以脂质体法将含有人全长RKIP基因的真核表达质粒pcDNA3.1-ssRKIP转染入SKOV-3细胞中,Western blotting检测SKOV-3细胞中RKIP蛋白的表达。不同浓度顺铂作用转染后的SKOV-3细胞,MTS法观察RKIP基因转染对顺铂处理后SKOV-3细胞增殖的影响,流式细胞仪检测RKIP基因转染对顺铂诱导SKOV-3细胞凋亡及细胞周期的影响。结果：pcDNA3.1-ssRKIP转染的SKOV-3细胞RKIP表达明显升高。不同浓度顺铂处理细胞24、48、72 h后,RKIP基因转染细胞增殖抑制率显著高于对照细胞（P<0.05）。用2.5 μg/ml顺铂作用SKOV-3细胞24 h后,RKIP转染细胞的凋亡率为（10.86±0.73）%,明显高于未转染细胞的（4.27±0.67）%和空质粒转染细胞的（4.02±0.43）%（P<0.01);在无顺铂作用情况下,RKIP转染细胞的凋亡率为（3.11±0.78）%,仍然高于未转染细胞的（1.51±0.13）%和转染空质粒细胞的（1.97±0.46）%（P<0.01)。细胞周期检测结果显示,RKIP转染细胞G0/G1期的比例下降,S期的比例增加,转染的SKOV-3细胞发生S期阻滞。结论：RKIP基因的转染可以增加卵巢癌SKOV-3细胞对化疗药物顺铂的敏感性。     

胆肠内引流术在胆道再手术中的临床应用

胆肠内引流术是胆道再手术中应用较多的手术。天津市南开医院1990年1月—2005年12月收治各种良、恶性胆道疾病的胆道再手术患者1689例，其中行胆肠内引流术1161例，报告如下。     

异基因骨髓源间充质干细胞对BXSB小鼠T、B细胞的影响

目的：探讨异基因骨髓源间充质干细胞（Bonemarrow derived mesenchymal stem cells，BMSCs）对BXSB小鼠T、B细胞增殖、活化及功能成熟等方面的影响。方法：采用。H．TdR掺入法、FACS法、EIJSA等方法检测BMSCs对BXSB小鼠T、B细胞的影响。结果：BALB／c小鼠的BMSCs在不影响BXSB小鼠T细胞诱导活化的基础上抑制其诱导增殖；可降低由ConA诱导的CD4^＋IL^＋细胞的数量，而提高由ConA诱导的CD4^＋IFN-γ^＋细胞数量。对于B细胞，BALB／c小鼠的BMSCs可以抑制其增殖、活化及IgG的分泌。另外，BALB／c小鼠的BMSCs可以抑制BXSB小鼠B细胞上CIMOL的异位表达。结论：异基因BMSCs对自身免疫病小鼠的T、B细胞有一定的调节作用。     

骨髓源间充质干细胞在异基因小鼠免疫器官内的分布及其免疫功能调节作用

目的：探讨骨髓源间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells，BMSC)在异基因小鼠免疫器官内的分布及其免疫调节作用。方法：以CM-Dil荧光染料示踪BMSC的体内分布情况，并辅以PCR检测Y染色体的方法进一步鉴定；体外实验采用MTT法、ELISA和FACS等方法检测BMSC的免疫调节作用。结果：BMSC可进入并较长期(30天)存在于异基因小鼠免疫器官内；在体外，BALB／C小鼠的BMSC对由ConA诱导的BALB／C和C57BL／6(B6)和BXSB小鼠的T细胞增殖均有抑制作用；而对前两种小鼠由12S诱导的B细胞增殖和分泌k方面表现为促进作用，对BXSB小鼠由IPS诱导的B细胞增殖和k分泌有抑制作用。BALB／C小鼠的BMSC对BALB／C和B6小鼠由ConA诱导的IL-4生成细胞的数量无明显影响，却可降低由ConA诱导的两种品系小鼠的IFN-γ生成细胞的数量；但对于BXSB小鼠却不同，BALB／C的BMSC可降低由ConA诱导的BXSB小鼠的IL-4生成细胞的数量，而提高由ConA诱导的IFN-γ生成细胞的数量。结论：异基因BMSC不但可进入受体的免疫器官，且可较长期(30天)存在；另外，BMSC对同基因正常、异基因正常和异基因自身免疫病的个体均有一定程度的免疫调节作用。