肝癌相关抗原Kinectin的多克隆抗体制备、鉴定及初步应用

目的制备本课题组报告的肝癌相关抗原Kinectin的多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性。方法以本课题组前期构建的人MBP-Kinectin融合片段重组质粒为基础,原核表达和亲和层析大量纯化MBP-Kinectin融合蛋白,并免疫新西兰兔制备多克隆抗体;用间接ELISA法测定抗体效价,用Western blot鉴定抗体的特异性。同时用Kinectin多克隆抗体检测Kinectin在正常成人肝细胞HL-7702和人肝癌细胞株SMMC-7721内的表达。结果通过免疫新西兰兔获得抗Kinectin抗体,ELISA测定纯化的Kinectin抗体效价最高为1∶12 800,Western blot结果显示Kinectin抗体具有较好的特异性。免疫细胞化学和western blot检测发现Kinectin蛋白在肝癌细胞株内的表达显著高于正常成人肝细胞株。结论制备的抗Kinectin抗体具有较高的效价和特异性,能满足Western blot和免疫细胞化学检测Kinectin蛋白的要求,为进一步深入研究Kinectin在肝癌发生发展中的作用奠定基础。     

黑色素瘤相关抗原MAGE-C2:肿瘤免疫治疗新靶点

癌睾丸抗原(Cancer testis antigen,CTA)是一类在多种肿瘤组织表达、而在睾丸或胎盘以外的正常组织几乎不表达的抗原。CTA其表达的独特性,被认为是一类能用于肿瘤免疫治疗的理想抗原。目前一些CTA疫苗已用于临床试验,并收到了一定的疗效,显示了良好的开发前景,如NY-ESO-1[1]、MAGE-A3[2]等。黑色素瘤相关抗原(Melanoma-as-     

睾丸组织中ACRBP的表达及启动子CpG位点的甲基化分析

目的了解人睾丸组织中ACRBP的表达及其启动子CpG位点的甲基化状态,为探讨该基因表达机制奠定基础。方法运用免疫组化法研究睾丸组织中目的蛋白定位;结合生物信息学分析该基因启动子CpG位点序列;通过Bisulfite PCR测序法（BSP）分析目的基因CpG位点的甲基化状态。结果免疫组化显示精子与精子细胞及部分的精原细胞和精母细胞表达目的蛋白。对ACRBP启动子序列（转录起始点-127～＋110 bp）进行BSP扩增测序,发现该区域共有24个CpG位点,其中仅有3个出现甲基化,其甲基化频率为1.67%。结论生精小管中ACRBP蛋白呈区域性的阳性反应,可能与生精小管内精子发生的不同步性有关;ACRBP启动子CpG位点低甲基化可能与该基因表达的机制有关。     

组织学与胚胎学双语教学的探索与实践

医学专业课程的双语教学已在我校推行,由于涉及教与学两方面诸多问题,在推行的过程中会遇到不少的困难与问题,但实施双语教学是势在必行的趋势~([1-3]).为适应这一发展趋势,使教学质量得到不断提高,在广西壮族自治区教育厅和学校领导的支持下,作为国家教育部2008年度双语示范课程和自治区重点课程及精品课程的学科,本教研室在新形势下对组织学与胚胎学课程的双语教学进行了探索和实践,在对2005级～2007级5年制本科及7年制本硕的双语教学实践中,取得了一些初步的认识和经验.     

凝胶阻滞检测核蛋白-DNA结合方法的探讨

目的：探讨改良的凝胶阻滞法用于核蛋白-DNA结合的检测。方法：培养人真皮成纤维细胞，用维甲酸刺激不同时段，抽提其核蛋白，与32P-标记维甲酸反应元件（RARE）及维甲类X受体α、β（RXRα、β）抗体结合，进行凝胶阻滞分析。结果：细胞于不同状态可出现迁移率不同的条带，加入RXRβ抗体可产生新的上移条带。结论：改良后的凝胶阻滞法较简单灵敏，可用于核蛋白-DNA结合的检测。     

应用SEREX技术筛选与鉴定鼻咽癌相关抗原

目的:应用SEREX技术筛选与鉴定鼻咽癌相关抗原,为鼻咽癌的早期诊断、免疫治疗和预后监测提供候选的生物学指标和理论基础。方法:从鼻咽癌新鲜活检组织中提取mRNA,构建cDNA表达文库。用鼻咽癌患者的血清筛选所构建的cDNA表达文库,获得的阳性克隆经扩增后提取噬菌粒DNA进行测序。所得序列与GenBank数据库中已知基因进行同源比较,分析其生物学特性。结果:所构建的cDNA原始文库含1×106个重组体,蓝白斑试验显示重组率为93%。用鼻咽癌血清对表达文库进行筛选,共获得21个阳性克隆,分别代表14个不同的cDNA插入片段。12个插入片段的DNA序列分别与基因库上的基因有不同程度的同源性,其中6个基因与鼻咽癌或其它肿瘤的发生、发展关系密切;另6个基因的生理功能未见文献报道。2个插入片段未发现有同源基因,推测可能为新发现的基因。结论:SEREX技术是目前筛选肿瘤抗原最简便、有效的手段之一。本文研究发现的抗原将为鼻咽癌的研究提供进一步的理论基础。     

癌-睾丸抗原与胶质瘤

目前对胶质瘤的传统治疗手段未能提高患者的生存率。免疫治疗作为一种辅助治疗手段具有一定的发展前景。寻找特异性的肿瘤抗原是开展肿瘤免疫治疗的前提。癌-睾丸抗原非常适用于肿瘤特异性免疫治疗。本文对癌-睾丸抗原在胶质瘤中表达规律、表达机理等作一综述,并对其应用于胶质瘤免疫治疗的前景作了展望。     

鸡胚心室小梁发育与肌性室间隔的形成

用显微解剖术和扫描电镜方法观察第２０－２９期鸡胚心室小梁的发育及肌性室间隔的形成过程。心脏外部观，原始心室左右部无明显的囊袋样扩张。在原始心室内部，小梁完全形成后即呈出出左右部分的形态差异。小梁在原始心室中线偏右处开始聚集，随后渐融合在一起，形成肌性室间隔。本研究表明，心室小染不仅是一种有规律排列的结构，而且与肌性室间隔的形成有关。     

精子蛋白32研究进展

1989年,Baba等[1]从猪精子中分离出一种相对分子质量为32000的蛋白,该蛋白能特异性地结合顶体素原和顶体素中间体,参与顶体素的形成,称其为精子蛋白32(sperm protein 32, sp 32).本文从sp32生物学特性、基因表达和生物功能等方面的研究进展作一综述.