深低温冷存的吻合血管同种异体长骨移植的实验研究

目的：探讨深低温冷存的吻合血管异体长骨治疗大块骨缺损的效果。方法：32只兔随机分成3组：A组12只，用深低温冷存的吻合血管作异体骨移植；B组12只，深低温冷存的吻合血管异体移植术后4周用免疫抑制剂环孢素A（Cyclosporine A CsA);C组8只作新鲜的吻合血管异体骨移植。术后2、4、8、12周摄X线片，第3周取外周血栓测自发性淋巴母细胞生成率，第8周取外周血检测白细胞介素2（IL－2），并于12周通过灌注墨汁等检测吻合血管的通畅情况，并对移植骨进行组织学检测。结果：A、B2组术后12周两端可达骨性连接（愈合），而C组仅1例近端达骨连接且明显延迟。术后3周A、B2组自发性淋巴母细胞生成与未移植兔比值均＜2。术后8周外周血IL－2活性，C组最高，A组次之，B组最低，且任意2组之间均有显著性差异（P＜0．01）。术后12周，A、B2组血管通畅率无显著性差异（P＞0．05）。组织切片中可见移植骨与受区两端有骨小梁连接。结论：深低温冷存吻合血管异体长骨可修复大块骨缺损；深低温冷存和CsA可协同抑制吻合血管异体长骨移植的排斥反应。     

反义c-myc对增强顺铂引起骨肉瘤细胞凋亡作用的实验研究

目的：通过反义基因治疗降低人骨肉瘤MG-63细胞c-myc的表达，并探讨顺铂对c-myc低表达的人骨肉瘤MG-63细胞凋亡作用的影响。 方法： 以腺病毒为载体，构建表达反义c-myc的重组腺病毒（Ad-Asc-myc），并在体外转染骨肉瘤MG-63细胞，降低MG-63细胞c-myc的表达，与不同浓度的顺铂作用后，采用MTT、蛋白免疫印迹（Western blot）、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、流式细胞仪（FCM）、透射电镜等检测顺铂对骨肉瘤MG-63细胞体外增殖抑制、凋亡相关基因的表达和凋亡作用。 结果： 构建的Ad-Asc-myc体外转染MG-63细胞48 h后，可明显降低c-Myc蛋白表达，并与浓度为2.0 mg/L的顺铂作用2 h后 ，对MG-63细胞的体外增殖抑制率可达38.0%；转染的细胞Bcl-2表达降低，Bax表达增加，而E2F-1的表达无变化；FCM、电镜等显示Ad-Asc-myc转染后可诱导骨肉瘤细胞凋亡，并增加顺铂对骨肉瘤细胞的凋亡作用。 结论： 降低c-myc表达能诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡并增加顺铂对MG-63细胞的促凋亡作用。     

吻合血管的同种异体骨、关节移植

吻合血管的同种异体骨体骨关节移植在治疗大段骨关节缺损有着较大的应用前景,也是目前修复重建外科、骨移植领域的研究重点。本就吻合血管的同种异体骨关节移植的抗原性、排斥反应、免疫抑制剂的作用,冷冻的影响等方面研究现状作一综述。     

Survivin反义寡核苷酸诱导人卵巢癌耐药细胞株COC_1/DDP凋亡的实验研究

目的 :探讨经脂质体介导的survivin反义寡核苷酸诱导人卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP凋亡的作用。方法 :将脂质体介导的survivin反义寡核苷酸 (survivin ASONs)作用于COC1/DDP细胞 ,采用一步法RT PCR检测survivin、bcl 2mRNA的表达 ,并进行细胞核DNA梯形电泳 ,检测caspase 3活性 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。结果 :经survivin ASONs作用后COC1/DDP细胞中survivin等抗凋亡基因的表达下降 ,细胞核DNA电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带 ,caspase 3活性增加且呈时间依赖性 ,细胞凋亡率达33.18% ,细胞周期G2 /M及S期明显下降而多阻滞于G0 /G1期 ,与对照组差异有显著性(P <0 .0 5 )。结论 :survivin ASONs反义寡核苷酸能诱导人卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP细胞凋亡 ,且效果显著     

恶性骨肿瘤靶向性治疗研究进展

本文从病毒增殖溶瘤、肿瘤血管靶向、基因治疗载体靶向导入和靶向性基因表达等方面,对近年来恶性骨肿瘤靶向性治疗的研究进展作一综述。     

无贫血胸椎旁髓外造血组织瘤样增生一例报告

患者 女,70岁,发现胸椎旁肿块半个月入院.患者半个月前因颈部酸痛向左上肢放射,门诊摄胸部CT示T_8,9,椎旁占位性病变.     

吻合血管的同种异体骨关节移植的免疫反应

近 3 0年来 ,随着显微外科技术的不断发展 ,吻合血管的骨移植在修复重建外科作用也日益重要 ,特别是在因外伤、恶性骨肿瘤切除以及先天性骨缺损引起的大段骨关节缺损治疗中的作用优势明显。吻合血管的自体骨关节移植因其缺乏抗原性 ,愈合过程类似于骨折而受到外科医师的青睐 ,但自体骨关节来源有限 ,且有供骨区损伤的问题 ;目前多采用同种异体骨关节移植 ,而非血管化的同种异体骨关节移植修复缺损时 ,常因病理骨折、骨不连接、感染、移植骨吸收等并发症而不理想〔1〕。吻合血管的同种异体骨关节移植 ,作为血管化的骨关节移植有供源广、形状…     

腺病毒介导反义c-myc联合咖啡因在骨肉瘤化疗中增效作用的实验研究

目的： 构建重组反义c-myc腺病毒并探讨其与咖啡因对人骨肉瘤MG-63细胞顺铂化疗的影响。方法: 应用基因重组技术，将约750 bp的人c-myc cDNA反向克隆到腺病毒载体，构建表达反义c-myc的重组腺病毒（Ad-Asc-myc），与咖啡因、顺铂单独或联合体外作用于人骨肉瘤MG-63细胞，采用蛋白免疫印迹（Western blotting）、MTT、流式细胞仪（FCM）、透射电镜等检测c-Myc蛋白、bcl-2、bax、E₂F-1等基因表达、瘤细胞体外增殖抑制、凋亡及细胞周期，分析Ad-Asc-Myc、咖啡因对人骨肉瘤MG-63细胞顺铂化疗的影响。结果: 成功构建Ad-Asc-myc，滴度可达2×10¹²pfu/L，体外转染MG-63细胞48 h后，可降低c-Myc蛋白表达，并抑制其体外增殖；Ad-Asc-myc、2.0 mol/L咖啡因分别与浓度为2.0、5.0 mg/L顺铂共同作用后 ，可增加顺铂对MG-63细胞的体外增殖抑制率；Ad-Asc-myc联合2.0 mol/L咖啡因能明显加强顺铂的体外抗肿瘤作用，凋亡相关基因bcl-2基因表达下降，bax表达上升，而E2F-1表达无明显变化；FCM检测显示Ad-Asc-myc的转染可诱导骨肉瘤细胞凋亡，并增加顺铂诱导瘤细胞凋亡作用；单独咖啡因不能诱导瘤细胞凋亡，但能增加顺铂诱导瘤细胞凋亡作用；Ad-Asc-myc联合2.0 mol/L咖啡因能明显加强顺铂诱导瘤细胞凋亡作用。细胞周期分析显示顺铂作用后瘤细胞出现S期阻滞，而咖啡因则能逆转这种阻滞；Ad-Asc-myc转染的骨肉瘤细胞出现G₂/M期阻滞。结论: 腺病毒介导反义c-myc联合咖啡因能明显增强顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞的诱导凋亡及化疗作用。     

膝关节周围骨折、脱位伴血管损伤的诊疗分析

目的 探讨早期诊治膝关节周围骨折损伤的效果及影响因素.方法 回顾性分析2002年3月至2007年11月31例膝关节周围骨折、脱位伴血管损伤患者的临床资料.其中男性24例,女性7例,年龄21～62岁,平均41岁.结合临床体征,运用彩色超声、CTA、手术探查等明确血管损伤,分别采用外固定支架、钢板、螺钉固定骨折脱位,并根据具体情况对损伤血管进行取栓、修补、自体静脉或人造血管移植重建血循环,分析保肢指数(predictive salvage index,PSI评分)、早期诊断、治疗方法对预后的作用.结果 本组病例1例死亡,截肢6例,手术成功修复31例股动脉、胭动脉、胫前及胫后动脉,24例肢体存活患者分别随访1～4年,平均24.2个月.6例骨不连或感染骨缺损经二期植骨、骨转运骨折愈合,7例膝关节脱位患者进行二期韧带修复重建,功能优良率为71.4%.结论 PSI评分≤10分的膝关节周围骨折、脱位伴血管损伤患者应积极实施治疗,早期明确诊断、手术重建血循环是治疗成功的关键因素.