2型糖尿病患者血清超氧化物歧化酶与颈动脉内中膜厚度的相关性

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清超氧化物歧化酶(SOD)水平与颈动脉内膜中层厚度(CIMT)的关系。方法收集T2DM住院患者共165例,根据CIMT值分为内膜正常组59例,增厚组51例,斑块组55例,记录3组患者的年龄、性别、糖尿病病程、吸烟史、高血压史、体质量指数(BMI)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血脂、血清超氧化物歧化酶(SOD)水平,并进行统计学分析。结果正常组血清SOD水平[(158.51±12.02)U/mL]及增厚组血清SOD水平[(152.00±15.04)U/mL]较斑块组[(145.24±10.30)U/mL]增高,且增厚组血清SOD水平高于斑块组,差异有统计学意义(P0.05)。Spearman相关分析显示,血清SOD水平与年龄、低密度脂蛋白(LDL)和CIMT呈负相关(r=-0.26、-0.16、-0.32,P0.05)。Logistic回归分析显示,血清SOD是T2DM患者颈动脉粥样硬化保护因素(OR=0.938,P=0.003)。血清SOD诊断T2DM患者颈动脉病变的受试者工作特征曲线(ROC曲线)曲线下面积为0.717[95%CI(0.638,0.797)],最佳截断点为159.9U/mL,灵敏度为79.2%,特异度为52.5%,阳性预测值为74.5%,阴性预测值为60.8%。结论 T2DM患者血清SOD水平随颈动脉动粥样硬化病变程度加重而降低,是CIMT增厚的保护因素,同时对合并颈动脉病变早期筛查提供一定的指导价值。     

心肌型脂肪酸结合蛋白在急性心肌梗死早期诊断中的应用

目的　评定脂肪酸结合蛋白 (H FABP)在急性心肌梗死 (AMI)早期诊断中的应用。　方法　采用自行开发的H FABP酶联免疫吸附试验一步夹心法对 12 6名健康体检者和 5 3例AMI患者血清H FABP进行检测 ,同时测定肌红蛋白 (MYO)、肌酸激酶同工酶 (CK MB)、肌钙蛋白I(cTnI) ,并对AMI进行动态观察 ,对早期诊断的敏感性、特异性、时效性等进行分析。　结果　H FABP在AMI后 (1 84± 0 6 4 )h血浆浓度即开始升高 ,比CK MB、cTnI早 (P <0 0 1) ;时间浓度动态曲线与MYO相似 ,与CK MB、cTnI相比曲线前移。AMI后 2h的敏感性和特异性分别为 76 4 7%、80 4 1% ;4h的敏感性和特异性分别为 89 16 %、91 2 6 %。　结论　AMI后 2、4hH FABP检测对AMI早期诊断具有较高的敏感性和特异性 ,可望成为重要的早期和排除诊断的血清心肌标志物的手段之一。     

性激素与冠心病及超敏C反应蛋白关系的研究

目的:探讨性激素与hs-CRP的关系及对男性冠心病的发病影响。方法:根据WHO诊断标准选择了68例男性冠心病病人和15例健康男性,采用放射免疫法测定E2、T与hFSH,计算出E2/T比值。并用同一标本采用ELISA法测定hs-CRP。结果:发现男性冠心病E2,E2/T比值明显高于对照组,T水平降低(P<0.05～<0.01);在男性冠心病中E2与hs-CRP呈正相关(r=0.332,P<0.01),hFSH、T及E2/T比值与hs-CRP无相关性。结论:性激素平衡失调是冠心病的独立易患因素,性激素水平与炎症因子C反应蛋白有着密切互为因果的关系。     

白介素-6对人冠脉平滑肌细胞表达妊娠相关血浆蛋白-A的影响

目的探讨炎症因子白介素-6(IL-6)对人冠脉平滑肌细胞表达妊娠相关血浆蛋白A的影响。方法实验于2005年5月至2006年8月在解放军305医院老年病中心实验室完成。人冠脉平滑肌细胞37℃、5%CO2条件下常规培养。实验用5~7代的细胞,按2.5×105/mL密度接种于25cm2的培养瓶中,24h后换液,生长接近80%融合时进行如下处理:(1)应用质量浓度为10ng.mL-1的IL-6刺激人冠脉平滑肌细胞,分别在共同培养0,2,4,8,24,36h后收集细胞。(2)应用不同质量浓度的IL-6(0,5,10,50ng.mL-1)刺激人冠脉平滑肌细胞,共同培养6h后收集细胞。应用实时荧光定量聚合酶链反应的方法检测细胞内妊娠相关血浆蛋白A基因的表达量。应用SPSS10.0软件进行统计学描述与分析,所得数据用x-±s表示,多组间比较用onewayANOVA检验,两两比较应用SNK法检验,并进行pearson相关分析,P<0.05为差异有显著性意义。结果同剂量白介素-6刺激下,妊娠相关血浆蛋白A的表达量在2h时就开始发生上调,8h达高峰,而后开始下降;在不同剂量白介素-6刺激下,妊娠相关血浆蛋白A的表达量在实验剂量范围内随着白介素-6的剂量加大呈上升趋势。除5ng.mL-1和10ng.mL-1组之间差异无显著性意义(P=0.065),其余组间差异均有显著性意义(P<0.05)。结论炎症因子白介素-6能促进冠脉平滑肌细胞中斑块稳定相关标志物妊娠相关血浆蛋白A的表达,可能是炎症在急性冠脉综合征的发生发展中起重要作用的机制之一。     

IL-1β对人冠状动脉平滑肌细胞妊娠相关血浆蛋白A分泌的影响

目的探讨IL-1β对人冠状动脉平滑肌细胞（HCASMC）分泌妊娠相关血浆蛋白A（PAPP-A）的影响。方法培养HCASMC,至第5～7代时,分别加入20μg/L和0μg/L的IL-1β（0μg/L组为对照组）,分别孵育2、4、8、24、36 h后,收集细胞培养上清液;采用IL-1β（0、5、20、4μg/L）刺激HCASMC 6 h后分别收集细胞和细胞培养上清液。用ELISA法检测细胞培养上清液内PAPP-A的表达量。结果IL-1β组PAPP-A表达量在2 h时开始增加,8、24和36 h时其浓度显著高于对照组（P均〈0.05）;随着IL-1β剂量增加,PAPP-A的表达量不断升高,其中20μg/L和40μg/L组的浓度均显著高于0μg/L组的浓度（P均〈0.05）。结论IL-1β可使HCASMC分泌PAPP-A增加,并呈时间和剂量依赖性。     

缬沙坦对人脐动脉平滑肌细胞妊娠相关蛋白-A、基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨缬沙坦对人脐动脉平滑肌细胞PAPP-A、MMP-9表达的影响。方法分别在10^-5mol／L的Ox—LDL的基础上,给予AngⅡ以及AngⅡ、缬沙坦混合培养人脐动脉平滑肌细胞,以普通培养基培养为对照,应用RT—PCR法检测PAPP—A、MMP-9的表达量。结果AngⅡ组PAPP-A与MMP-9的表达量均显著高于对照组、Ox—LDL及缬沙坦组（P〈0．01）,缬沙坦组PAPP—A的表达量高于对照组（P〈0．01）,而与Ox—LDL组无明显差异（P〉0．05）．缬沙坦组MMP-9的表达量与Ox—LDL组及对照组均无明显差异（P〉0．05）。结论AngⅡ可促进人脐动脉平滑肌细胞PAPP—A和MMP-9的表达,缬沙坦可以抑制AngⅡ的这种作用。     

白细胞介素-1β和白细胞介素-6对妊娠相关血浆蛋白-A表达的影响

目的探讨炎性因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)表达妊娠相关血浆蛋白-A(pregnancy-associated plasma pro-tein-A,PAPP-A)的影响。方法应用20μg/L的IL-1β、10μg/L的IL-6各自刺激HCASMC,共同培养0、2、4、8、243、6 h后收集细胞。应用不同浓度的IL-1β(0、5、20、40μg/L)I、L-6(0、5、10、50μg/L)刺激HCASMC,共同培养6 h后收集细胞。应用实时定量聚合酶链反应的方法检测细胞内PAPP-A基因的表达量。结果在同剂量IL-1βI、L-6刺激下,PAPP-A的表达量在2 h时就开始发生上调,8 h达高峰,而后开始下降;在不同剂量IL-1βI、L-6刺激下,PAPP-A的表达量在实验剂量范围内随着剂量的加大呈上升趋势(IL-1β:r=0.972,P=0.000;IL-6:r=0.941,P=0.000)。结论炎性因子IL-1βI、L-6能促进HCASMC中斑块稳定相关标记物PAPP-A的表达,可能是炎症在急性冠状动脉综合征发生发展中的重要作用机制之一。     

改良液氮冻伤法建立易损动脉粥样硬化斑块模型

目的建立改良液氮冻伤法制作动脉粥样硬化(AS)易损斑块(VP)模型,验证改良法是否优于传统的造模方法。方法雄性新西兰白兔24只随机分为改良方法组(A组)和传统方法组(B组)各12只。分别按照改良方法及传统方法造模,6 w末各组随机抽取4只兔子(A1组=4只,B1组=4只)检测斑块形成状况。A组6 w末、B组10 w末剩余兔子(A2组=8只,B2组=8只)以液氮激发斑块破裂。激发48 h后取出右颈总动脉行HE染色及免疫组化检测斑块内基质金属蛋白(MMP)-1水平。不同时间点分别采集空腹静脉血检测兔血脂水平总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白(LDL)及血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果高脂3 d后兔血脂水平已明显升高,1 w后达基础水平的4¹5倍;血脂变化曲线可见第1周血脂上升最为明显。与基线水平相比,高脂喂养1 w后两组兔血清hs-CRP即明显升高,至激发前进一步升高,激发后hs-CRP较激发前明显升高;各时间点两组间比较无显著性差异。大体观察及HE染色可见6 w末A1组兔已形成明显的AS化斑块,而B1组兔斑块较小;激发后48 h两组兔子的右颈总动脉均可见AS表面内皮损伤,部分形成血栓;两组易损斑块在组织结构上无明显差异,免疫组化染色见两组斑块处均有MMP-1蛋白的大量表达。结论改良液氮冻伤法可构建易损/破裂粥样硬化斑块,较传统方法明显缩短成模时间,节约造模成本,更快速,更高效。     

生物人工肝用C3A细胞在零下非结冰时的保存

目的:探讨零下非结冰保存肝细胞的效果及其与细胞凋亡的关系.方法:UW液保存的C3A细胞悬液分为3组:-0.8℃组(零下非结冰组),0℃组(0℃非结冰组),4℃组(对照组).低温保存24、48及72 h后,采用流式细胞术分别测定细胞存活率及凋亡率,同时测定LDH、乳酸释放,细胞内ATP含量、尿素合成功能及白蛋白分泌功能,同时观察细胞形态.结果:零下非结冰组较0℃非结冰组及对照组明显提高了低温保存72 h的C3A细胞的存活率(86.49%±2.80%vs 81.50%±2.83%.77.83%±3.40%,均P<0.05),降低了细胞凋亡率(1.26%±0.84%vs 5.34%±1.20%,9.16%±1.99%,均P<0.05);明显抑制了低温保存72 h乳酸以及LDH释放(乳酸:10.38μg/106 Cells±1.40 μg/106 cells vs 12.02 μg/106cells±1.64μg/106 cells,17.41μg/10°cells±2.40μg/106cells:LDH:80.10 U/L±11.10 U/L vs 12004U/L±14.32 U/L,148.98 U/L±15.37 U/L,均P<0.05);更好地维持了低温保存72 h C3A细胞内ATP含量、尿素合成功能、及白蛋白分泌功能(均P<0.05).形态上,零下非结冰组保存细胞死亡比例少,细胞接触良好,未见对照组及0℃非结冰组细胞膜周围出现"毛刺"样改变及细胞内的"空泡样"改变.结论:在零下非结冰条件下保存肝细胞,建立一个"血库样"(ready to use)肝细胞库,可以有效促进生物人工肝的发展.     

急性冠状动脉综合征患者外周血妊娠相关血浆蛋白A水平的变化

目的:分析外周血妊娠相关血浆蛋白A水平与急性冠状动脉综合征的关系。方法:选择解放军总医院2004-10/2005-02住院的急性心肌梗死、不稳定型心绞痛、稳定型心绞痛患者及同期在解放军第三○五医院门诊查体的健康志愿者各30例,应用酶联免疫吸附方法测定各组的外周血妊娠相关血浆蛋白A,同时测定各组超敏C-反应蛋白、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油及心肌梗死和不稳定型心绞痛患者的肌酸激酶、肌酸激酶同工酶和肌钙蛋白T水平。应用SPSS12.0软件进行直线回归和多元线性回归分析,分析妊娠相关血浆蛋白A、超敏C-反应蛋白水平与心肌酶学标志物的关系,以及妊娠相关血浆蛋白A与冠状动脉粥样硬化性心脏病危险因素的关系。结果:120例受试者全部进入结果分析。①心肌梗死组和不稳定型心绞痛组妊娠相关血浆蛋白A水平显著高于稳定型心绞痛组和健康对照组[(6.23±7.38),(5.74±7.45),(1.23±0.70),(0.87±0.57)mU/L,P<0.05],前2组组间及后2组组间比较差异不显著(P>0.05)。②在心肌梗死与不稳定型心绞痛患者,妊娠相关血浆蛋白A与超敏C-反应蛋白水平呈直线相关(R2=0.285,0.779,P<0.01)。③急性冠状动脉综合征患者外周血妊娠相关血浆蛋白A水平与年龄、体质量指数、血脂、白细胞、吸烟等危险因素无关(P>0.05),与冠状动脉狭窄病变支数无关(P>0.05)。④心肌梗死患者外周血妊娠相关血浆蛋白A水平与心肌酶学指标间无相关性(P>0.05)。结论:急性冠状动脉综合征患者外周血妊娠相关血浆蛋白A水平明显升高,其升高水平与炎症标志物超敏C-反应蛋白相关。提示妊娠相关血浆蛋白A与动脉粥样斑块的稳定性密切相关,对急性冠状动脉综合征诊断、预测以及危险分层可能具有重要价值。