人白细胞介素15基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的 克隆人白细胞介素（IL）15全长cDNA,并在大肠杆菌中表达。方法从人外周血分离的淋巴细胞中提取总RNA,通过RT—PCR扩增出hIL-15全长cDNA。构建到原核表达载体pET28a（＋）中,通过卡那霉素平板筛选及PCR鉴定,挑出阳性克隆进行扩增,DNA测序正确后,转化到大肠杆菌BL21（DE3）中,扩增后IPTG诱导表达。通过SDS-PAEG及Western-blot方法鉴定表达的融合蛋白。结果 成功构建人IL-15表达载体,并表达于大肠杆菌中。SDS—PAEG及Western-blot分析显示表达的融合蛋白分子量为16．1ku,与理论值相符。结论 获得了hIL-15融合蛋白,为hIL-15单克隆抗体的制备及其功能研究奠定了基础。     

急性尿潴留增加患者经尿道前列腺电切术后早期并发症的风险

【摘要】〓目的〓探讨前列腺增生患者(BPH)术前伴有急性尿潴留(AUR)经尿道前列腺电切术(TURP)后早期并发症。方法〓回顾性分析我院2010年1月~2011年12月因BPH行TURP术的患者临床资料,年龄大于50岁的BPH患者仅行TURP术为我们的研究对象,将其分为两组,一组术前AUR(+),另一组术前AUR(-),神经源性膀胱、前列腺癌、药物或尿道狭窄所致AUR患者不纳入本研究。对比两组患者术后早期并发症:尿路感染(UTI)、血尿、重置尿管、尿失禁、休克、输血率、败血症、下尿路症状(LUTS)。结果〓AUR(+)组144例,AUR(-)组116例,AUR(+)组与AUR(-)相比,术后尿路感染(45.83% vs 10.34%, OR:7.33, 95% CI:3.71~14.50)、血尿(19.4% vs 6.9%, OR: 3.25, 95% CI: 1.41~7.50)、重置尿管(8.33% vs 2.59%, OR: 3.42, 95% CI: 0.94~12.44),差异具有统计学意义;尿失禁(1.39%)、休克(0.69%)、输血(4.17%)仅发生在AUR(+)组,LUTS症状、败血症在两组差异无统计学意义。结论〓术前伴有AUR患者TURP术后早期并发症的风险较不伴有AUR的患者更高。     

输尿管镜在急性梗阻性无尿中的应用

目的:探讨输尿管镜在急性梗阻性无尿的临床应用价值。方法:回顾性分析46例急性梗阻性无尿患者输尿管镜治疗的临床资料。结果:本组46例输尿管镜碎石取石术或输尿管镜检,术中留置单侧或双侧输尿管双J管,成功42例,失败4例,成功率91%。术后39例肾功能恢复正常,7例无好转,其中2例需要定期血液透析治疗。结论:输尿管镜在处理急性梗阻性无尿中具有重要作用,可迅速解除梗阻,保护肾功能。     

低剂量阿司匹林在产科及辅助生殖中的研究进展

阿司匹林是一种具有抗炎和抗血小板特性的环氧化酶抑制剂。近年来低剂量阿司匹林（low-dose aspirin,LDA）在产科及辅助生殖中的应用范围不断拓展,尤其是用于预防子痫前期已被多个国家指南推荐。LDA主要通过抑制环氧酶活性发挥抗血小板聚集作用,可有效改善胎盘浅着床引起的胎盘灌注不良,在胎儿生长受限、早产、产科抗磷脂综合征、辅助生殖等领域的适用指征也逐渐拓宽。本文就LDA在产科及辅助生殖应用的指南推荐意见和研究进展进行综述。     

TLR7激动剂Gardiquimod上调BxPC-3细胞中IL-15 mRNA表达

目的：研究TLR7在胰腺癌BxPC-3细胞中表达,并探讨TLR7激动剂激活TLR7后细胞因子白介素15( IL-15)的表达。方法通过 Western blot 和 Real-time PCR 分析TLR7在细胞内的表达水平;BxPC-3细胞经过不同时间点Gardiquimod(3μg/ml)的处理后,Real-time PCR 分析 TLR7激活后 IL-15 mRNA 水平表达变化;Western blot 分析Gardiquimod刺激细胞后,磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶( PI3K-AKT)信号通路的变化。结果 Western blot和 Real-time PCR结果显示：与外周血单核细胞( PBMC)相比, TLR7在 BxPC-3中弱表达;Real-time PCR分析显示：Gardiquimod处理细胞后能刺激细胞中IL-15的表达;TLR7激动剂能够激活 PI3K-AKT信号通路。结论 Gardiquimod激活TLR7后能够上调 IL-15的表达,并且其激活与 PI3K-AKT信号途径相关。     

改良加压注水尿道结石回推技术处理后尿道结石的安全性和疗效分析(附30例报告)

目的:探讨改良加压注水尿道结石回推技术处理后尿道结石的安全性和疗效。方法:回顾性分析2016年1月~2017年10月我院30例经改良的加压注水尿道结石回推技术处理的后尿道结石患者的临床资料,年龄21~50岁,平均(41.2±8.7)岁;结石大小平均12mm×10mm。嵌顿时间3h~2周。结果:30例后尿道结石均成功回推入膀胱,回推过程中无明显尿道损伤和滴血。随访1~6个月,未见泌尿生殖道感染和尿道狭窄。结论:改良加压注水尿道结石回推技术处理后尿道结石简便、安全、有效,能迅速解除尿道被结石嵌顿导致的梗阻和疼痛,并使结石的下一步治疗更便利。     

早产的诊治现状和面临的问题

近20年来，我国为降低早产发病率，改善早产儿结局不懈努力，取得了令人瞩目的成就，但由于中国人口基数庞大，早产的数量仍不容小觑。加之早产和分娩启动的机制至今仍未完全阐明，区域内早产诊疗水平和早产儿救治水平存在较大差异，在一定程度上制约了早产诊治水平的提高。对我国围产医学工作者而言，进一步降低早产率，改善早产儿远、近期结局，依旧任重而道远。     

IL-10对HaCaT细胞中VEGF-A表达的影响

目的 探讨白介素-10(IL-10)对皮肤角质形成(HaCaT)细胞中血管内皮生长因子A(VEGF-A)表达的影响及其可能机制.方法 培养HaCaT细胞,用不同剂量IL-10刺激后,通过荧光定量PCR(Real-time PCR)在mRNA水平上分析IL-10对HaCaT细胞中VEGF-A表达的影响;通过Western...     

子痫前期胎盘组织环状RNA表达谱的鉴定、验证与分析

目的：描绘人胎盘组织中环状RNA（circular RNA,circRNA）的表达谱,发现并验证子痫前期胎盘组织异常表达的cir－cRNA,研究分析其可能的调控网络。方法：利用高通量测序技术对子痫前期和正常胎盘组织中RNA进行测序和鉴定分析,并利用DeSeq2进行差异性分析。然后利用qRT-PCR在组织水平上对分析结果进行验证。随后利用生物信息学对验证的差异性circRNA进行GO分析和KEGG通路分析。结果：测序结果显示,与正常胎盘组织相比,重度子痫前期胎盘共检测出300种异常表达的circRNA,包括151种高表达和149种低表达。qRT-PCR验证结果显示,hg38_circ_0014736（1.418 0±0.106 5 vs. 1.044 0±0.127 1,P=0.035）和hsa_circ_0015382（0.895 8±0.180 2 vs. 0.688 8±0.025 3,P=0.025）在子痫前期胎盘组织中高表达,hsa_circ_0007121（0.395 8±0.200 4 vs. 1.301 0±0.240 7,P=0.000）在子痫前期胎盘组织中明显下调。生物信息学分析显示这些异常表达的circRNA与预测到的靶miRNA及靶基因可能参与调节细胞增殖、缺氧应激、转录后调控等功能。结论：与正常胎盘组织相比,子痫前期胎盘组织存在异常表达的circRNA。生物信息学分析显示,这些异常表达的circRNA或可以通过某些通路参与子痫前期发病。