个体化板层角膜移植治疗蚕蚀性角膜溃疡

目的探讨依据蚕蚀性角膜溃疡病变形态施行不同形状的个体化板层角膜移植治疗的疗效。方法回顾性系列病例研究。2008年1月至2011年6月中山眼科中心确诊的蚕蚀性角膜溃疡患者26例（31眼）,根据溃疡累及周边部角膜范围和形态选择不同手术方式,分为新月形板层角膜移植组（14眼）、D形板层角膜移植组（7眼）、指环型板层角膜移植组（3眼）和全板层角膜移植组（7眼）。术后随访6～36个月,评价患者术后视力、植片透明性、角膜散光变化规律以及并发症发生种类。结果术后6个月最佳矫正视力为0．3～0．5的患者中,新月形板层角膜移植组3例,D形板层角膜移植组4例．全板层角膜组5例：最佳矫正视力为0．6～1．0患者新月形板层角膜移植组11例．D形板层角膜移植组3例,指环形板层角膜移植组3例,全板层角膜移植组2例。术后视力提高患者比例为54％,视力不变比例为40％,视力下降比例为6％。术后6个月指环形板层角膜移植组角膜散光最低,为（2．30＋0．40）D：D形板层角膜移植组散光最高,为（3．70＋1．03）D。术后主要并发症为植片上皮愈合不良4例（13％）,蚕蚀性角膜溃疡复发2例（6％）,缝线脓肿1例（3％）,植片排斥4例（13％）。结论依据蚕蚀性角膜溃疡累及周边部角膜的部位和形态施行不同形状的板层角膜移植,可以在切除病灶的同时避免正常角膜组织的损失,减轻角膜散光程度,恢复患者的有效视力。     

羊膜接触镜输送人表皮干细胞重建兔角膜上皮

目的 利用眼表生物膜固定装置(BMFD)与羊膜(AM)制成接触镜,输送人表皮干细胞至角膜缘干细胞缺损(LSCD)的兔眼表,并评价其重建角膜上皮的效果.方法 制作去角膜上皮及角膜缘干细胞的雌性LSCD兔模型,分为3组:羊膜加人表皮干细胞移植组(n=20),将男性人表皮干细胞悬液注射到BMFD-AM接触镜(简称羊膜接触镜)与眼表之间;羊膜遮盖组(n=20),戴羊膜接触镜;对照组(n=20),单纯药物治疗.裂隙灯显微镜结合角膜荧光素钠染色观察并评价角膜修复情况.随访至角膜完全上皮化后,取角膜组织行病理学检查和免疫组织化学鉴定,PCR检测人Y-STR基因鉴定细胞来源.结果 羊膜加人表皮干细胞移植组角膜上皮修复快,平均(5.60±0.46)d达到完全上皮化,另外两组角膜上皮修复迟缓.羊膜遮盖组(9.25±0.51)d、对照组(12.45±0.65)d才完成角膜上皮化(P均<0.05).组织病理学示羊膜加人表皮干细胞移植组角膜上皮细胞形态接近正常,K3/K12(+)、Mucin 5AC(-)、K4(-).并可检测到人Y-STR基因.组织病理学示另外两组角膜上皮结膜化,K4(+)、Mucin 5AC(+)、K3/K12(-).结论 羊膜接触镜联合人表皮干细胞悬液注射能够重建LSCD兔角膜上皮.     

猴表皮干细胞的分离和培养

目的： 探索猴表皮干细胞分离纯化和培养方法。 方法: 将猴皮肤标本剪成皮条,加入0.25％胰酶浸泡过夜；然后去除角质层，刮上皮面获取表皮细胞进行培养。取第2-4代的细胞,经消化后，用Ⅳ型胶原黏附法获得为快吸附的表皮细胞。对快吸附的表皮细胞行流式细胞仪、免疫组化和RT-PCR检测。 结果: 快吸附细胞从mRNA转录水平及蛋白表达水平均呈现表皮干细胞的特性：β1整合素、K15和α6整合素阳性，而CD71和K1/K10阴性。 结论: 所采用的分离纯化方法和培养条件适合猴表皮干细胞的分离纯化及生长。     

显微板层角膜移植术后形态学改变及对角膜透明度的影响

目的 了解显微板层角膜移植术后的组织学改变及对角膜透明度的影响。方法 利用光镜、电镜和分光光度计观察了显微板层角膜移植术后不同时期角膜基质的组织学变化、透光度和吸光度，对比观察了显微角膜切刀和准分子激光切削的角膜剖面形态。结果 准分子激光切削的角膜表面有许多变性胶原碎屑。显微角膜切开刀切削的角膜表面光滑，术后１个月，光镜下无明显的瘢痕，透射电镜仅见２～３个角膜板层厚度的界面瘢痕，其下３～４个板层内的角膜细胞有较多伪足，但无炎性细胞浸润。术后１，３个月角膜的透光率和吸光度与未手术角膜比较无显著性差异。结论 显微板层角膜移植术后界面瘢痕轻微，不影响角膜透明度。     

球结膜松弛矫正术的疗效分析

目的：探讨球结膜松弛矫正术治疗Ⅲ～Ⅳ级球结膜松弛症的疗效.方法：回顾分析本院2006年1月至2009年12月11例（16眼）经球结膜松弛矫正术手术治疗的Ⅲ～Ⅳ级球结膜松弛症患者,从肿胀或沉重感,疼痛,溢泪,眼红,视疲劳,瘙痒,视力模糊/下降,烧灼感,异物感,瘢痕形成等方面评价其疗效.结果：11例球结膜松弛症患者手术治疗后,除了结膜瘢痕外,由重度结膜松弛症引起的各种症状均得到改善,有效率达85%以上.无术中或术后并发症发生.术后随访6月～ 3年,未见复发.结论：球结膜松弛矫正术能很好地切除多余结膜组织,解除泪道的阻塞环节,固定结膜,加深穹窿,恢复正常的眼表泪液存储与排泄功能,明显改善不适症状,治疗效果好.     

体外诱导胚胎干细胞定向分化为神经细胞的初步研究

目的 初步研究诱导胚胎干细胞ES－D3细胞系向神经细胞定向分化可能性,为青光眼等视网膜视神经疾病的治疗提供可能的途径。方法 以Buffalo大鼠肝细胞培养上清进行胚胎干细胞ES－D3细胞系培养,参照Bain等方法进行改良,以视黄酸对ES－D3细胞进行分化诱导,1d后加入阿糖胞苷,相差显微镜下观察细胞生长情况。结果 加入视黄酸后1d,相差显微镜下可见散在1个、2个或多个突起的神经样细胞。加入视黄酸后2d、阿糖胞苷后第1d,可见大量1条、2条或多条突起的神经样细胞,并相连成网络结构。结论 视黄酸辅以阿糖胞苷在体外可成功诱导胚胎干细胞ES－D3细胞系成为神经样细胞,并形成网络,结合我们裸鼠眼内接种ES－D3细胞分化为神经细胞样细胞研究结果,胚胎干细胞定向分化及移植,可望成为青光眼等视网膜视神经疾病治疗的一个新的途径。     

高频泪道浚通术治疗先天性泪囊炎

目的　采用高频泪道探通法治疗先天性泪囊炎。方法　用WZC -Ⅱ型泪道治疗仪行高频泪道探通法治疗先天性泪囊炎 69例 (73眼 ) ,所有患儿均为泪道探通失败 2次以上者。随访观察 8～2 0个月 ,平均 1 2个月。结果　治愈 97 62 %。结论　高频泪道探通法治疗先天性泪囊炎操作简便 ,手术安全可靠 ,治愈率高     

异种显微板层角膜移植术的实验研究

板层角膜移植术是目前临床常用的角膜移植手术 ,最大优点是术后排斥反应发生率低和手术不进入前房 ,但由于徒手剖切植片和植床 ,致术后界面瘢痕和散光较重。因此 ,术后视力不佳。显微板层角膜移植术是一种全新的板层角膜手术 ,术后界面瘢痕极轻[1,2 ]。由于手术损伤小、术后反应轻 ,降低了诱发排斥反应的可能性 ,为应用异种角膜材料创造了条件。鉴此 ,我们将异种角膜基质引入该手术 ,设计了异种显微板层角膜移植术 ,并进行了动物实验 ,报道如下。材料和方法一、实验动物及实验分组新西兰白兔 3 0只 ,由中山大学实验动物中心提供。新鲜猪眼球…     

原发性青光眼的皮肤纹理学研究

对18例原发性开角青光眼、44例原发性闭角青光眼病人和90例同种族正常人进行了调查、比较,结果显示青光眼病人与对照组间差异有显著性,两组病人间无显著性差异,提示原发性青光眼病人皮纹学的进一步研究,将有助于该病的普查、筛选,甚或提供诊断该病的参考依据。     

应用原瓶黏附分选表皮干细胞的方法学特点

目的:探索一种简单易行的方法分离表皮干细胞,为组织工程学的进一步研究奠定基础。方法:实验于2005-07/12在中山大学眼科中心国家眼科学重点实验室完成。健康3个月龄恒河猴2只,分离与培养猴表皮细胞,获取第2～4代的细胞,消化后,将细胞重新放回原瓶中,培养箱中静置20min,获得的贴壁细胞即为快吸附的表皮细胞。①于光学显微镜下观察分选前细胞和快吸附细胞。②对20min快吸附的表皮细胞进行整合素α6和CD71流式细胞仪检测,以未经吸附分选的细胞作为对照。③20min快吸附的表皮细胞和分选后未黏附细胞分别制作3组细胞爬片,进行整合素β1、K15、和K10的免疫组织化学染色。④20min快吸附的表皮细胞和分选后未黏附细胞进行K15、整合素β1和K1(K10对应角蛋白)的mRNA反转录聚合酶链反应的检测。结果:①分选后的细胞体积较小,核浆比例较大。②流式细胞仪的结果显示快吸附细胞以干细胞为主(α6briCD71dim为82.5±1.641),也含有少量的短暂扩增细胞(α6briCD71bri为4.9±2.125),有丝分裂后细胞及终末细胞则检测不到(α6dim)。③免疫组化可见快吸附细胞呈K15和整合素β1阳性,K10阴性;分选后未黏附细胞K10为阳性,而K15和整合素β1均为阴性。④反转录聚合酶链反应示吸附分选后的快吸附细胞高表达K15和β1整合素,K10没有表达;而分选后剩余的细胞只表达K10。结论:原瓶黏附分选方法是一种简单可行的分选表皮干细胞的方法。