构建还原论式大鼠脊髓全横断损伤模型的性别影响

目的:建立保留血液供应的大鼠还原论式脊髓全横断损伤模型,探讨性别因素对其实验模型构建和应用的影响。方法:实验于2003-06/2004-12在解放军第四军医大学全军神经科学研究所实验室完成。选择一级SD大鼠90只,雄50只,雌40只,体质量225～250g。分成雄鼠1组40只,雄鼠2组10只,雌鼠组40只,用切割辅以吸除的方法全横断脊髓,保留脊髓腹、背动脉和背静脉,雄鼠2组致伤后即刻处死取材,雄鼠1组和雌鼠组观察6周后处死取材。雄鼠2组行苏木精-伊红染色观察损伤区脊髓离断情况,雄鼠1组和雌鼠组行苏木精-伊红染色、神经丝和胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学染色、生物素化的葡萄糖胺追踪实验观察损伤区脊髓离断情况,行Bas-so-Beattie-Bresnahan(BBB)运动功能评定并记录病死率、压疮发生率。结果:进入BBB运动功能结果分析雄鼠1组和雌鼠组分别为27只和37只大鼠,雄鼠1组脱失13只,雌鼠组脱失3只。①雄鼠2组苏木精-伊红染色显示大鼠脊髓完全横断且保留了脊髓腹、背动脉和背静脉。雄鼠1组和雌鼠组的苏木精-伊红染色、神经丝和胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学染色、生物素化的葡萄糖胺追踪实验均显示两组模型损伤区脊髓离断完全,无组织残留,两组间差异无显著性意义(P>0.05);两组BBB运动功能评分结果差异也无显著性意义(P>0.05)。②雄     

蛛网膜下腔连续注入环磷酸腺苷对脊髓损伤后神经再生的作用

目的：观察环磷酸腺苷(cAMP)在蛛网膜下腔内注入对脊髓损伤后神经再生的作用。方法：20只SD大鼠完全随机分为对照组(n=10)和cAMP组(n=10)，采用大鼠脊髓半切损伤模型，通过在体内埋入微泵和椎管内置管连续给入db-cAMP，作组织切片免疫组化染色，观察损伤区局部皮质脊髓束(CST)纤维及后肢运动功能BBB评分。结果：cAMP治疗组损伤区可见极少量可疑皮质脊髓束再生纤维，呈现出有利于神经再生的变化；后肢运动在四五周均恢复正常行走，与对照组无明显区别。结论：cAMP导致脊髓损伤区极少量皮质脊髓束纤维存在，可能有利于脊髓损伤的修复。     

安定对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的:探讨安定对大鼠挤压伤模型脊髓损伤后的作用,以及γ-氨基丁酸A型受体拮抗剂荷包牡丹碱和苯二氮受体拮抗剂氟马西尼对此作用的影响。方法:实验于2003-04/2004-11在解放军第四军医大学神经科学研究所完成。选择SD雄性大鼠36只,体质量180～200g,随机分为6组,每组6只。大鼠脊髓挤压伤模型建立后立即给药,对照组给予生理盐水2mL/kg腹腔注射;安定组给予安定10mg/kg腹腔注射;安定+荷包牡丹碱组同时给予安定10mg/kg及荷包牡丹碱2.1mg/kg;安定+氟马西尼组同时给予安定10mg/kg及氟马西尼5mg/kg;荷包牡丹碱组仅给予荷包牡丹碱腹腔注射2.1mg/kg;氟马西尼组给予氟马西尼5mg/kg。药物作用72h后采用脊髓原位末端标记法观察各组大鼠凋亡细胞分布情况,并比较每张切片平均凋亡细胞数。结果:36只大鼠全部进入结果分析。平均每张切片凋亡细胞数:安定组明显小于对照组犤(69.15±14.25)个,(130.08±30.40)个,卓艹(t=4.4457,P<0.01)犦;安定+荷包牡丹碱组及安定+氟马西尼组犤(89.75±14.45)个,(97.76±14.85)个犦均明显大于安定组(t=2.4868,3.4051,P<0.01),但小于对照组(t=2.93522.3399,P<0.01),而此两组结果比较差异无显著性意义(P>0.05)。荷包牡丹碱组及氟马西尼组犤(137.38±29.11)个,(131.53±28.68)个犦与对照组比较差     

一氧化氮／一氧化氮合酶与神经创伤

一氧化氮是一种简单的气体分子，可在哺乳类神经细胞内经一氧化氮合酶作用产生。ＮＯ在神经创伤修复中的多重作用近年来已受到越来越多的重视。本文对ＮＯ／ＮＯＳ与神经创伤和再生之间的关系作一综述。     

外周神经移植到中枢再生轴突的1种观察方法

在以往中枢神经元再生轴突在外周神经移植物中生长速度的研究中,利用了辣根过氧化物酶逆行追踪技术。这种技术的缺陷是不能直接测量所有再生轴突不同的生长长度,也不能观察再生轴突的形态,我们用抗神经丝单克隆抗体,将外周神经移植     

两种不同纯度的嗅鞘细胞在体外存活与生长的比较

比较80%和50%两种纯度的嗅鞘细胞在体外培养条件下的存活与生长,为嗅鞘细胞体内移植选用最佳纯度提供依据。分离、培养并纯化成年SD大鼠嗅鞘细胞,将纯化的嗅鞘细胞和收集到的贴壁成纤维细胞进行约80%和50%的比例混合后接种,继续培养1d或3d。所有细胞于不同时间点行P75免疫细胞化学荧光染色,以鉴定嗅鞘细胞的初始及其后培养过程中数量和纯度的变化。观察细胞状态,计数细胞总数和P75免疫阳性细胞数目,求得各组嗅鞘细胞数量和纯度并行统计学分析。结果显示:两种不同纯度嗅鞘细胞在培养1d时形态正常,3d时纯度为50%的嗅鞘细胞胞体依然饱满,突起更加纤长,数量和纯度亦无明显下降。而纯度为80%的嗅鞘细胞在培养3d时已出现胞体萎缩和突起变短,数量从1d时每一观察区域内的35±13显著下降为23±5(P=0.02),但纯度未发生明显变化。结果表明50%纯度嗅鞘细胞的存活及生长状态优于80%者,提示细胞体内移植时应考虑选取50%纯度的嗅鞘细胞。     

臂丛神经下干不同损伤诱发神经病理性疼痛大鼠后足的痛行为学特征

目的 比较颈胸椎前路和后路臂丛神经下干切断伤与根性撕脱伤诱发神经病理性疼痛大鼠术侧后足的痛行为学特征.方法 18只成年雌性SD大鼠随机接受右侧前路下干切断、前路及后路下干根性撕脱手术(每组6只),另外6只健康大鼠作为对照组.臂丛损伤术前及术后3、7、14和28 d,检测大鼠术侧后足的机械痛缩足阈值、冷刺激诱发痛评分及热刺激缩足潜伏期.结果 对照组与3个损伤组之间术前三项痛行为学指标的差异无统计学意义.与术前相比,前路切断伤组冷刺激诱发痛评分明显增高(P<0.01),机械痛缩足阈值及热刺激缩足潜伏期则无明显变化;前路及后路撕脱伤组术后各时间点机械痛缩足阈值均显著降低(P<0.01),冷刺激诱发痛评分均明显增高(P<0.01),而热刺激缩足潜伏期则无显著变化.与切断伤组相比,两撕脱伤组术后各时间点热刺激缩足潜伏期则无显著差异,而后足机械痛缩足阈值均显著降低(P<0.05),冷刺激诱发痛评分亦显著增高(P<0.01),这种痛行为学的变化可持续至28 d(最长观察期);两撕脱伤组间各痛行为学指标的差异无统计学意义.结论 大鼠前、后入路臂丛下干根性撕脱伤均可作为理想的神经病理性疼痛模型,而臂丛下干切断伤因致痛效果较差则不宜用作神经病理性痛模型.     

两种不同基质的联合应用对体外分散培养神经元的促贴壁作用

随着神经生物学的飞速进展,神经细胞原代培养成为神经药理、病理生理及活性物质等方面研究的一个很好模型。为此,观察和分析神经元体外特性神经元存活、突起生长以及神经元形态变化等的一些指标也相继出现。由于分散的单一细胞培养能够比较理想地反映在体情况,现多选用这一方法进行体外调控和观察。但是培养中细胞脱落和细胞重聚现象又给结果分析造成一定困难,影响了实验结果的客观性。因此,需选择合适的细胞外基质来解决这些问题。常用的细胞外基质有胶原和多聚赖氨酸。胶原ＩＶｃｏｌｌａｇｅｎＩＶ是一种细胞支持物,它是细…     

炎性痛大鼠脊髓背角内神经激肽B受体的动态变化

目的：观察神经激肽B受体（NK3）与大鼠髓内伤害性信息和调控的可能关系。方法：用免疫组织化学技术观察完全弗氏佐剂（CFA）诱发慢性性大鼠脊髓背角神经激肽B受体的运动变化。结果：炎症侧腰髓氏脊髓背角NKB受体样免疫反应结构的染色强度有明显升高,背角浅层尤为显著。经进观察与图像分析有明,注射CFA2d后脊髓背角内免疫染色强度即开始升高21d左右抵达高峰,28d后渐恢复至正常水平。结论NKB受体可能参与炎性慢性痛状态下伤害性信息在脊髓水平的传递与整合过程.