SARS冠状病毒S蛋白高保守性C区重组核酸疫苗肌肉免疫和黏膜免疫的研究

构建含SARS冠状病毒S蛋白基因高保守性C区基因的真核表达重组质粒pCDNA Sc作为DNA疫苗 ,其中C区位于SARS冠状病毒S蛋白S1亚基基因片段的 811～ 12 2 1bp区域的病毒外部羧酸端多肽肽段。将重组真核表达载体注射入实验小鼠肌肉 ,10 0 μl/只 ,疫苗滴鼻免疫组 ,每次以脂质体 -质粒混合液适量滴入鼻内 ,3次 /d ,连续 1周。抗SARS病毒S蛋白的特异性IgG滴度用ELISA法测定 :免疫后的小鼠分别在 15、30和 4 5d后采血并分离血清 ,用纯化SARS CoV全病毒裂解液抗原包被的微孔板进行ELISA测定血清抗SARS CoVIgG的效价 ,结果显示 :…     

地龙加桂枝茯苓丸干预脑梗死发病的临床研究

目的探讨以脑内微小病变为中风治未病的客观依据,观察中药干预脑梗死发病的效果。方法以120例头颅核磁共振成像（MRI）显示的基底节上部存在Ⅱ型（T1WI高信号,T2WI高信号,FLAIR等信号）和Ⅲ型（T1WI高信号,T2WI高信号,FLAIR低信号）的多发微小病变的病例为研究对象,随机分为中药治疗组（地龙加桂枝茯苓丸）、阿司匹林对照组和阴性对照组各40例;3个月为1个疗程,连续服药时间不少于3个月;随访各组脑梗死发病情况。结果120例研究对象平均随访（400.69±207.60）天,最长随访822d,至截点各组均无死亡病例;中药治疗组无脑梗死发病病例,其中4例复查头颅MRI,微小病变无变化;阿司匹林对照组脑梗死发病1例;阴性对照组脑梗死发病5例。中药治疗组与阴性对照组的发病率具有显著差异（P〈0.05）。结论中药可以控制脑内微小病变,进而预防脑梗死发生。     

SARS冠状病毒S蛋白C端片段基因的克隆及其DNA疫苗的免疫学研究

目的：构建抗原基因为SARS冠状病毒（Severe acute respiratory syndrome coronavirus，SARS-CoY）S蛋白C端片段基因的DNA疫苗，采用肌注和滴鼻的方法接种小鼠后观察肌肉注射途径和黏膜途径免疫使机体产生免疫应答的情况。方法：将S蛋白C端片段克隆至真核表达载体pcDNA3．1（-），随之将重组质粒进行小鼠肌肉和黏膜免疫，定期检测外周血中抗SARS-CoV的病毒特异性抗体水平，流式细胞仪观察其淋巴细胞表型变化，免疫组化检测抗原表达分布，脾细胞增殖实验评价CTL效果。结果：疫苗注射后15天就能在血清中检测出病毒特异性抗体。随着时问的延续，抗体水平逐步升高，至30天后达到稳定，以CTL为主的CD8^＋T淋巴细胞的百分比含量增加极显著，引起强大的体液免疫和细胞免疫；疫苗滴鼻后45天可在鼻黏膜检测到抗原表达；而空载体质粒对照组未检测出明显的特异性免疫应答。结论：以S蛋白C端片段基因为抗原基因的DNA疫苗通过肌注和滴鼻能诱导小鼠针对SARS病毒强大的免疫应答。     

Kupffer 细胞对奥美拉唑在小鼠体内药代动力学的影响

目的: 观察在采用Kupffer 细胞选择性阻断剂-GdCl3封闭小鼠肝Kupffer 细胞活性后,奥美拉唑在小鼠体内的代谢动力学变化,以进一步探讨Kupffer 细胞对药物代谢的影响.方法: 雄性昆明种小鼠一次性给予GdCl3(ip, 20 mg·kg-1),于阻断后6 d, 碳粒廓清法测定小鼠的吞噬功能;免疫组化法观察CD68在肝脏中的表达;取血清测定ALT活性,尿素氮及肌酐含量,观察Kupffer 细胞阻断对肝、肾功能的影响.另取同样处理的小鼠,给予奥美拉唑(iv, 10 mg·kg-1),分别于给药后5,15,30 min和1,2,4,6,8,12,24 h眼眶采血,高效液相色谱法测定血药浓度,3P87软件计算药代动力学参数.结果: ip GdCl3后,能明显阻断Kupffer细胞活性,肝、肾功能未见受损.奥美拉唑在小鼠体内药动学符合一房室模型.与正常鼠相比,奥美拉唑在Kupffer细胞活性阻断的小鼠体内的消除受到明显抑制.K,CL分别下降18.7%,2.9%,t1/2延长18%.结论: 阻断Kupffer细胞活性可明显改变奥美拉唑在小鼠体内的代谢与处置, 提示Kupffer细胞在药物代谢中的作用,其机制有待进一步阐明.