国家级中药类实验教学示范中心建设经验与实践研究

安徽中医药大学国家级中药类实验教学示范中心围绕“一中心”“两突破”“三结合”“四层次”“五能力”的建设思路,始终以加强学生综合素质和创新能力的培养为核心,整合实验教学资源,优化实验教学平台配置;改革管理模式,塑造服务窗口;着力内涵式发展,孵育中药学“五能”人才。通过近10年的建设,中心在整合资源、塑造窗口、加强内涵建设等方面不断进行综合改革与实践创新,取得了较好的效果,极大地推动了实验教学中心优质特色发展。     

中药熏洗治疗骨折后期关节功能障碍的体会

采用中药熏洗,配合有力的功能锻炼,可以加快关节功能的恢复。多年来我们采用此法,效果较好,现将1983～1984年509例骨折病人中,筛选出230例,对膝、肘、踝关节功能影响较大的病例,加以分析。临床资料 230例骨折中:手术治疗130例、闭合治疗100例。 1.固定材料:手术治疗130例中,内固定采用钢板35例,克氏针54例,螺丝钉16例,钢丝粗丝线25例。外固定:石膏110例,牵引20例。闭合治疗100例中:石膏28例、小夹板72例,其中配合牵引58例(骨牵引30例,皮牵引28例)。     

黄连多糖不同组分抗氧化活性比较研究

目的研究黄连粗多糖和带电量不同的黄连多糖组分的抗氧化活性。方法用二乙氨乙基纤维素(阴离子交换柱层析)分离纯化除蛋白后的黄连粗多糖,用Fenton法、邻苯三酚自氧化法和2,2-二苯基-1-苦味肼基(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)分析法测定黄连粗多糖及纯化后带电量不同的多糖组分体外抗氧化作用。结果经阴离子交换柱层析,可获得4种带电量不同的黄连多糖组分,且这4种组分和黄连粗多糖对羟自由基、超氧阴离子和DPPH都有一定的清除作用,其中带电量高的组分对不同抗氧化模型均具有较高的清除作用。结论黄连多糖有一定的抗氧化活性,其抗氧化活性和其带电量具有正相关性。     

四物汤对血管性痴呆大鼠的神经保护作用及其机制研究

目的 探讨四物汤对血管性痴呆（vascular dementia,VD）大鼠的保护作用及其机制。方法 将SD大鼠随机分为假手术组,模型组,四物汤高剂量（6 g/kg）、低剂量（3 g/kg）组,尼莫地平组（20 mg/kg）,每组12只。采用大脑中动脉阻塞再灌注法复制大鼠VD模型,术后连续给予相应药物14 d。采用水迷宫实验观察VD大鼠学习能力和记忆能力;酶联免疫吸附法测定海马组织中乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase,AChE）、5- 羟色胺（5- hydroxy tryptamine,5- HT）、内皮素- 1（endothelin- 1,ET- 1）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的含量。腹主动脉取血检测血液流变学指标。苏木精- 伊红染色观察海马CA1区神经细胞形态学变化。结果 与模型组比较,四物汤高剂量组大鼠逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）,在目标象限距离百分比显著增加（P<0.05）,海马AChE、ET- 1含量显著降低（P<0.05）,5- HT、VEGF含量显著升高（P<0.05）,全血黏度、血浆黏度和红细胞聚集指数显著降低（P<0.05）。四物汤高、低剂量组比较,仅血浆黏度和红细胞聚集指数的差异具有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较,四物汤组海马CA1区锥体细胞缺失减轻,神经纤维排列整齐,仅少数细胞核固缩。结论 四物汤对VD具有一定的改善作用,其机制与改善神经递质,调节海马ET- 1、VEGF含量,改善血流状态有关。     

肝素接枝藤黄酸自组装胶束的制备及体外抗肿瘤活性研究

目的: 通过共价结合制备肝素-藤黄酸接枝物(GA-Hep), 考察GA-Hep胶束的性质及体外抗肿瘤活性。方法: 通过酰胺键将藤黄酸与肝素连接制备GA-Hep, 透射电镜观察胶束形貌、纳米粒度仪分析胶束的粒径及Zeta电位、荧光分光光度计检测临界聚集浓度(critical aggregation concentration, CAC)、噻唑蓝(MTT)法考察自组装胶束体外对肺癌细胞A549细胞的抑制作用。结果: GA-Hep胶束为球形, 平均粒径(163±1.16)nm, Zeta电位为(-29±0.91)mV, 取代度为(44.50±0.15)%, CAC值为(0.004±0.000 61)mg·mL^-1, 体外抗肿瘤试验结果表明GA-Hep对A549细胞的IC₅₀为(31.22±0.14)μg·mL^-1。结论: 该研究表明GA-Hep具有较高的载药量, 并形成稳定的胶束, 同时保留了藤黄酸的抗肿瘤活性。     

基于胆汁酸稳态干扰研究戊唑醇暴露对大鼠阿替洛尔口服吸收的影响

目的：基于胆汁酸（Bile acid,BAs）稳态干扰，探讨三唑类杀菌剂戊唑醇（Tebuconazole,TEB）对阿替洛尔（Atenolol,AT）口服吸收行为的影响及其机制。方法：连续28 d灌胃给予大鼠3 mg/kg TEB，建立大鼠TEB暴露模型；LC-MS/MS检测正常和TEB暴露大鼠小肠内容物中甘氨胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、牛磺胆酸与牛磺脱氧胆酸的水平；正常和TEB暴露大鼠分别灌胃给予AT(10 mg/kg)后于不同时间点经眼眶静脉丛取血，采用LC-MS/MS检测AT血药浓度变化，使用DAS药动学软件拟合获得AT的药动学参数；以正常大鼠建立肠循环灌注模型，分别以正常和TEB暴露大鼠小肠内胆汁酸水平配制含荧光黄肠灌注液，检测肠组织对荧光黄的吸收和渗透能力，以及肠灌注后的氧化应激和ZO-1表达水平。结果：TEB暴露增加了肠道甘氨胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、牛磺胆酸与牛磺脱氧胆酸的水平（P<0.001）；与正常大鼠相比，TEB暴露大鼠的AT峰浓度和药时曲线下面积显著增加（P<0.05），达峰时间显著延迟（P<0.05）;TEB诱导的BAs稳态变化使肠道通透性增加，该作用与...     

黄连粗多糖协同小檗碱改善溃疡性结肠炎肠黏膜屏障损伤的作用

目的 考察黄连粗多糖与小檗碱在溃疡性结肠炎小鼠治疗中的协同作用。方法 采用雄性BALB/c小鼠30只随机分为5组,除正常组6只外,其余在小鼠日常饮水中给予5%葡聚糖硫酸钠建立结肠炎模型。建模成功后,每组分别进行灌胃给药4 d,每日1次,小檗碱组（100 mg·kg^-1 BBR）、小檗碱+低剂量粗多糖组（100 mg·kg^-1 BBR+22.8 mg·kg^-1 CCP）、小檗碱+高剂量粗多糖组（100 mg·kg^-1 BBR+45.6 mg·kg^-1 CCP）,模型组和正常组灌胃同体积生理盐水。实验结束后处死小鼠提取结肠,通过蛋白免疫印迹法检测小鼠结肠组织紧密连接闭锁连接蛋白-1（ZO-1）、紧密连接蛋白-1（Claudin-1）和闭合蛋白（Occludin）蛋白的表达。以正常组为对照,评价各治疗组模型小鼠疾病活动指数（DAI）评分、结肠长度、结肠组织形态和结肠紧密连接蛋白的表达水平。结果 与正常组比较,模型组小鼠ZO-1、Claudin-1和Occludin蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,小檗碱组Claudin-1蛋白表达无明显差异,ZO-1和Occludin蛋白表达显著升高（P<0.01）,黄连粗多糖联合小檗碱组Claudin-1、ZO-1和Occludin蛋白表达显著升高（P<0.01）;与小檗碱组比较,黄连粗多糖联合小檗碱组紧密连接蛋白表达明显强于小檗碱单独给药（P<0.05）。结论 黄连粗多糖协同小檗碱给药能有效改善溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜屏障损伤。     

白藜芦醇烟酸酯抗炎、降脂和保肝药理作用研究

目的:通过对经白藜芦醇和烟酸进行酯化合成的白藜芦醇烟酸酯进行抗炎、降脂、保肝作用的筛选,为其进一步研究与开发提供实验依据。方法:采用二甲苯致小鼠耳肿胀法、10%蛋清诱导大鼠足肿胀模型,观察白藜芦醇烟酸酯的抗炎作用;采用小鼠腹腔注射75%蛋黄乳液建立高血脂模型,观察白藜芦醇烟酸酯的降血脂作用。采用小鼠腹腔注射0.1%CCl4造成急性肝损伤模型考察白藜芦醇烟酸酯保肝方面的药理活性。结果:白藜芦醇烟酸酯能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀,减少蛋清所致大鼠足肿胀的形成,并可显著降低高血脂动物模型血清中TG、TC浓度,但对0.1%CCl4造成急性肝损伤血清中ALT、AST升高无明显影响。结论:白藜芦醇烟酸酯在抗炎、降脂方面表现出一定的生物活性,本实验结果可为进一步进行白藜芦醇烟酸酯研究提供了实验依据。     

黄连水煎液中固体微粒对小檗碱在体肠吸收特性的影响研究

目的考察黄连水煎液中不同固体微粒组分对有效成分小檗碱在体肠吸收的影响。方法以高速离心法去除黄连水煎液中较大粒径固体微粒;以大孔弱碱性阴离子交换树脂对上清液中固体微粒进一步分离;以大鼠在体肠吸收模型评价黄连水煎液中固体微粒对小檗碱肠吸收特性的影响。结果小檗碱在小肠各肠段均有吸收,空肠段吸收最好,吸收速率常数(Ka)和有效渗透系数(Peff)分别为(3.587 9±0.005 2)×10-4/s和(4.529 4±0.009 7)×10-5 cm/s;黄连水煎液经高速离心分离和离子交换色谱柱分离后,得到粒径相近、电位差异较大的微粒P1[粒径(272.7±25.2)nm,电位(-6.85±0.16)m V]和P2[粒径(264.8±21.4)nm,电位(-18.20±0.71)m V];在体肠循环灌注实验表明,微粒P1可显著提高小檗碱的在体肠吸收[Ka为(5.853 6±0.970 1)×10-4/s、Peff为(8.082 4±1.004 2)×10-5 cm/s]。结论黄连水煎液中固体微粒可以显著增加小檗碱的肠吸收,其中微粒表面电位可能是微粒影响小檗碱肠吸收的因素之一。     

灵芝多糖对肾小球系膜细胞增殖的影响和体外抗氧化活性的研究

采用纤维素酶法提取灵芝多糖,获得两个组分cGLP1和cGLP2,以MTT法测定两组分对高糖诱导人-肾小球系膜细胞(HMC,human Mesangial Cell)增殖的影响,并通过对O2-、·OH两种自由基的清除作用以及总抗氧化能力来测定其抗氧化活性.进而考查酶法提取的灵芝多糖(Ganoderma Lucidump01ysaccharide)对高糖引起肾小球系膜细胞增殖的抑制作用及其体外抗氧化活性.结果显示 cGLP2对高糖所致的HMC增殖有显著的抑制作用.且cCLP2对羟自由基具有明显的清除作用,并具有较强的抑制过氧化脂质反应的能力.表明灵芝多糖酶提组分cGLP2能显著抑制高糖诱导的HMC增殖,这可能与cGLP2抗氧化活性相关.