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文题释义:水凝胶三维培养:应用安全稳定的天然或合成聚合物材料为细胞提供一个空间、立体的生存环境,可增强细胞的黏附、增殖及分泌细胞因子能力。
旁分泌效应:以往研究认为干细胞应用于创面治疗的潜能是干细胞归巢分化为损伤组织,后来发现移植的干细胞大多停留在肝、脾,很少能到达损伤创面。目前研究证实间充质干细胞通过分泌某些营养因子作用于临近的靶细胞,起到促进创面愈合的作用。
背景:研究表明间充质干细胞在创面愈合中具有减轻炎症反应、促进创面愈合、减轻瘢痕形成的作用,然而以往的普通二维培养环境由于存在细胞间接触性抑制,可能导致细胞的基因表达、信号传导和形态学存在差异。
目的:观察人羊膜间充质干细胞旁分泌创面愈合相关因子的能力是否受二维培养环境与三维培养环境的影响。
方法:利用传统酶消化法获得人羊膜间充质干细胞后,分别接种于普通细胞培养瓶(二维培养)与ShakeGelTM 3D水凝胶中(三维培养),将水凝胶中的人羊膜间充质干细胞分别进行成脂、成骨、成软骨诱导分化,免疫荧光染色确定细胞分化方向;待两种培养环境中的人羊膜间充质干细胞融合至70%-80%,于倒置相差显微镜和激光共聚焦显微镜下观察细胞的生长特点及形态;培养24 h后,应用RT-qPCR技术测定细胞旁分泌创面愈合相关因子的mRNA相对表达量;培养48 h后,利用ELISA试剂盒检测细胞旁分泌创面愈合相关因子的蛋白表达量。
结果与结论:①二维培养组人羊膜间充质干细胞呈扁平状,为典型间充质样细胞形态;三维培养组人羊膜间充质干细胞呈圆形,均匀分散于水凝胶的每一层;②三维培养中的人羊膜间充质干细胞具有3系诱导分化潜能;③三维培养组白细胞介素6、白细胞介素8、表皮生长因子、碱性成纤维细胞因子、透明质酸、肝细胞生长因子、血管内皮生长因子mRNA相对表达量高于二维培养组(P < 0.001,P < 0.05),两组白细胞介素4、白细胞介素10、金属蛋白酶组织抑制因子、基质金属蛋白酶、转化生长因子、角化细胞生长因子mRNA相对表达量比较差异无显著性意义(P > 0.05);④三维培养组白细胞介素6、白细胞介素10、表皮生长因子、碱性成纤维细胞因子、白细胞介素8、肝细胞生长因子、转化生长因子β1、血管内皮生长因子蛋白表达量高于二维培养组(P < 0.001,P < 0.01,P < 0.05),两组白细胞介素4、金属蛋白酶组织抑制因子、基质金属蛋白酶、角化细胞生长因子蛋白表达量比较差异无显著性意义(P > 0.05);⑤结果表明,水凝胶三维培养环境中的人羊膜间充质干细胞可呈现更好的形态及创面修复相关因子旁分泌生物学效应。
ORCID: 0000-0002-9744-2176(王旗)
中国组织工程研究杂志出版内容重点:生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程 相似文献
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目的 观察中西医结合治疗小儿病毒性心肌炎的临床疗效及安全性.方法 收集30例住院患儿进行临床分析.结果 西药采取支持、保护心肌,对症治疗,中医按临床症状辨证分型治疗80例患儿治愈16例,显效9例,改善4例,无效1例.结论 中西药结合治疗本病疗效好,中药无毒副作用. 相似文献
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目的:探讨标本放置时间对儿童末梢全血血细胞计数的影响。方法采集来诊儿童无名指末梢血至专用EDTA-2K抗凝的采样管,分别于即刻,2 min,5 min,10 min,30 min,60 min,120 min,240 min,用ABX M60三分类血细胞分析仪测定各个结果。结果8组参数结果与均值组比较,除PLT外差异均无统计学意义(P值均>0.05),PLT即刻组与均值组比较差异有统计学意义(P<0.05),2~240 min。结果与均值组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ABX M60血细胞分析仪采用末梢血全血计数时,至少在2 min后检测其结果比较可靠,放置时间应该5~60 min之内完成最佳。 相似文献
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目的:了解某医院临床分离耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的菌株同源性及其耐药情况。方法收集2013年1月-2014年12月,某院临床分离到的48株耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌,采用 K -B 法进行药敏试验,肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应(ERIC -PCR)试验研究上述菌株的基因同源性和科室分布。结果48株耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌用 ERIC -PCR 方法可分为三个基因型,A 型2株,B 型43株,C 型3株,其中 B 型为主要的流行株,主要来自于重症监护病房、呼吸科和神经外科。结论耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的多重耐药性严重,该医院内存在耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的克隆流行,以 ICU 最为严重,应采取有效措施防止和延缓其院内交叉感染的发生和耐药性的进一步增高。 相似文献
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目的观察中西医结合治疗儿童支气管哮喘的疗效。方法将60例支气管哮喘患儿临床资料进行分析。结果经中西医结合治疗后临床控制率超过55%,总有效率达92%以上。结论中西医结合对儿童支气管哮喘的治疗效果满意,值得临床推广。 相似文献
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目的 比较阳离子交换层析法、胶乳增强法及酶法三种测定糖化血红蛋白的方法.方法 对阳离子交换层析法、胶乳增强法及酶法测定糖化血红蛋白的精密度、相关性进行比较.结果 阳离子交换层析法、胶乳增强法及酶法的低值批内CV值分别为2.26%、3.35%和3.84%,高值批内CV分别为1.57%、2.38%和2.88%;低值批间CV分别为3.06%、3.78%和7.99%,高值批间CV分别为2.06%、2.91%和4.72 %.以阳离子交换层析法作为对比方法,乳胶增强法与酶法线性方程式分别为Y=1.060 1X+0.069 4,r=0.998;Y=1.021 4X-0.108 5,r=0.989.结论 三种方法具有较好的可比性,但胶乳增强法更简便、价廉,值得广大医院推广使用. 相似文献
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