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目的 构建靶向survivin基因的微小RNA(miRNA)真核表达载体,探讨其对人结肠癌细胞(HT-29)增殖、凋亡的影响.方法 设计合成针对survivin基因的miRNA序列,定向克隆至pcDNATM6.2-GW/Em GFP-miR真核表达载体上,构建靶向survivin的miRNA重组质粒.HT-29细胞接种于6孔板,分为空白对照组、转染试剂组、空质粒组(阴性对照组)以及目的基因组(阳性对照组)4组.瞬时转染后收集各组细胞,应用流式细胞仪检测各组细胞的增殖指数及凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应和免疫印迹法(Western blot)检测靶基因(survivin) mRNA和蛋白的表达.结果 HT-29细胞转染后,目的基因组增殖指数与正常组、转染试剂组、空质粒组相比明显降低(17.98%±2.35% vs 38.04%±2.11% vs36.73% ±2.51% vs36.57%±3.05%;t=20.05,P <0.01;t =18.75,P<0.01;t=18.59,P<0.01),凋亡率明显增高(19.54%±1.74% vs 3.13%±0.29% vs 3.70% ±0.44% vs 3.61%±0.50%; t=16.40,P<0.01;t=15.84,P<0.01;t=15.92,P<0.01).目的基因组survivin mRNA与其他各组相比明显降低(=0.68,P<0.01;=0.58,P<0.01;t =0.61,P<0.01),蛋白的表达亦明显降低(t=0.64,P<0.01;t =0.62,P<0.01;t =0.67,P<0.01).结论 靶向沉默结肠癌HT-29细胞的survivin基因可以明显抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡. 相似文献
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正直肠癌是胃肠道最常见的恶性肿瘤之一,新发病例逐年增加,术后平均生存时间往往只有5.5年左右~([1])。2015年1月"精准医学"的提出~([2]),标志着现代医学迈入"精准时代"。本文就目前直肠癌的精准治疗进展做一简要概述。1精准医学的内涵精准医学不同于以往的经验医学和循证医学,它更关注疾病的个体化,但与疾病的个体化治疗并不等同~([3])。本质上精准医学是通过基因组和蛋白质组等组学技术和尖端医疗技术,结合患者的生活环 相似文献
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目的:检测内源性硫氧还蛋白‐1(thioredoxin‐1,Trx‐1)在急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis ,ANP)大鼠模型血液、胰腺和肾组织的表达;并观察中药清胰Ⅱ号颗粒剂对ANP胰腺和肾脏的保护作用以及对肾脏组织Trx‐1表达的影响。方法将96只SD大鼠随机分为正常组(A组,n=24)、假手术组(B组,n=24)、ANP组(C组,n=24)及治疗组(D组, n=24)。在制模后1小时治疗组给予250 g/l清胰Ⅱ号颗粒剂灌胃(10 ml/kg),6 h 1次,共3次,正常组、假手术组、ANP组三组给予等量生理盐水灌胃。于制模后6 h、12 h、24 h测定各组血清中T rx‐1的水平;制模后24小时处死大鼠,应用免疫组织化方法对胰腺以及肾脏中Trx‐1的表达情况进行测定。结果24小时内正常组、假手术组血清中 Trx‐1的表达较稳定,ANP组呈现一个持续升高的趋势,而治疗组T rx‐1的表达则呈现一个先上升后下降的趋势,12 h治疗组T rx‐1的表达较其它三组明显升高(P<0.05),24 h ANP组血清中Trx‐1的表达较假手术组明显升高(P<0.05),而24 h治疗组血清中Trx‐1的表达又较ANP组降低(P<0.05),但仍高于正常组和假手术组(P<0.05);病理结果显示ANP组胰腺及肾脏组织损伤明显,Trx‐1的表达呈阳性,较正常组、假手术组、治疗组比较有统计学意义(P<0.05)。结论 Trx‐1在ANP模型大鼠肾损伤中可能具有重要作用,中药清胰Ⅱ号颗粒可提前促进胰腺、肾脏组织Trx‐1的表达,减轻ANP时胰腺和肾脏损害,对其有保护作用。 相似文献
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