着色性干皮病两例ERCC2和ERCC5基因突变分析

【摘要】 目的 分析2例着色性干皮病患儿基因突变。方法 收集2例着色性干皮病患儿临床资料，提取患儿及其父母外周血DNA，采用高通量全外显子组测序方法对患儿进行全外显子组测序，确定致病基因突变位点，再用Sanger测序法对患儿及其父母的DNA进行双向验证，重点关注着色性干皮病相关候选基因XPA、ERCC3、XPC、ERCC2、DDB2、ERCC4、ERCC5及POLH的变异。结果 例1为3岁男孩，面、耳、颈、双手背散发褐色斑点伴色素减退斑2年，步态不稳1年，皮疹夏季加重，以光暴露部位为主。例2为1岁5月龄男孩，面部散发褐色斑点伴少许色素减退斑1年。基因检测显示，例1 ERCC2基因发生复合杂合突变，即父源c.1805G>A（p.Gly602Asp）和母源c.586C>T（p.Arg196Ter）突变，为XPD型。例2 ERCC5基因发生复合杂合突变，即父源c.2533+2T>C和母源c.2453C>T（p.Ala818Val）突变，为XPG型。c.586C>T（p.Arg196Ter）和c.2533+2T>C既往未见报道。嘱防晒、避光，随访2年，患儿皮损较前有所增多，未出现恶性肿瘤。结论 ERCC2基因复合杂合突变可导致XPD型着色性干皮病，表现出皮肤和神经症状；ERCC5基因复合杂合突变可导致XPG型着色性干皮病，表现为轻症表型。早期临床特点结合基因检测有助于着色性干皮病患者的准确诊断及分型。     

MIB2对HepG2肝癌细胞恶性生长的影响

目的：探讨Mindbomb E3泛素蛋白连接酶2（MIB2）对HepG2肝癌细胞恶性生长的影响,并分析其可能机制。方法：以HepG2肝癌细胞为研究对象,首先筛选过表达MIB2稳定株,利用细胞软琼脂克隆实验观察集落形成情况;使用炎性细胞因子TNF-α和RNA病毒SEV处理MIB2过表达稳定株和阴性对照4 h,免疫印迹法检测Notch1的表达水平;同时收取细胞培养上清,ELISA检测IL-6及TNF-α的分泌情况。其次通过小干扰RNA(siRNA)转染HepG2细胞,48 h后通过免疫印迹法验证MIB2敲低情况;同样使用TNF-α和SEV处理4 h,收取细胞培养上清,ELISA检测IL-6及TNF-α的分泌情况。结果：过表达MIB2对HepG2细胞的克隆形成有明显的抑制作用;过表达MIB2导致HepG2细胞IL-6本底水平的分泌和TNF-α及SEV诱导的分泌均下降,在上述各条件下均未检测到TNF-α的分泌,Notch1表达水平无显著变化。MIB2敲低后,HepG2细胞IL-6本底水平的分泌和TNF-α及SEV诱导的分泌均增强,反向验证上述效应。结论：MIB2能够明显抑制肝癌细胞的恶性生长,该效应可能和IL-6的表达下降有关。     

能谱CT双低剂量高清共轭采集在冠状动脉狭窄诊断中的价值

【摘要】目的：探讨能谱CT使用低管电压和低浓度对比剂结合高清共轭采集技术对冠状动脉CTA检查的图像质量和辐射剂量的影响。方法：选择临床拟诊冠心病及支架术后行冠状动脉CTA复查的患者152例,随机分成A、B两组,各76例。A组：使用管电压100kVp,对比剂浓度270mg I/mL,128层40mm的高清（HD）共轭容积数据采集。B组:使用管电压120kVp,对比剂浓度为320mg I/mL,采用128层40mm的标准（STD）共轭容积数据采集。两组其它扫描参数不变。对两组图像质量进行评分,并记录和计算图像主动脉根部对比噪声比（CNR）、冠状动脉各段CT值的均值及冠状动脉显示节段数,计算两组的辐射剂量(ED)和人均碘摄入量,对两组间上述指标进行统计学分析。结果：A、B组图像质量评分分别为（3.52±0.48）和（3.12±0.56）分,且差异具有统计学意义（t=5.01,P<0.05）; A组图像CNR高于B组（t=4.18,P<0.05）;两组冠状动脉各段CT值均无统计学差异（P均>0.05）,均可满足诊断需求;A组冠状动脉可评价节段数为1064,B组为1032;A、B组的ED值分别为（2.72±0.58）和（3.59±0.62）mSv,差异有统计学意义(t=9.66,P<0.05);A组人均碘摄入量［(234.42±10.23)mg I/kg］低于B组［(294.32±12.07)mg I/kg,t=33.09,P<0.001］。结论：能谱CT冠状动脉成像中,使用100kVp和低浓度等渗对比剂结合高清共轭采集技术,可有效降低辐射剂量,减少人体碘摄入量,同时提高整体图像质量,对冠状动脉狭窄病变的诊断提供了一定的帮助。     

儿童角膜炎-鱼鳞病-耳聋综合征一例及GJB2基因突变检测

患儿男，4岁2个月，因全身皮肤干燥、粗糙伴反复感染4年，于2017年11月13日就诊。患儿出生时发育正常，听力筛查无异常。1个月时头部、颈部、腹股沟出现红斑、丘疹并长期不愈，先后诊断为鱼鳞病、湿疹、间擦疹等……     

TRIML1 对肝癌细胞恶性生长的影响

目的:探讨TRIML1对肝癌细胞恶性生长的影响。方法:在HepG2肝癌细胞中筛选鉴定过表达TRIML1稳定株。利用CCK8法检测过表达TRIML1稳定株的生长增殖活性;软琼脂克隆形成实验分析过表达TRIML1稳定株的克隆形成能力。裸鼠成瘤实验分析过表达TRIML1稳定株的动物体内成瘤能力。使用炎症细胞因子TNF-α刺激过表达TRIML1稳定株和阴性对照8 h,收取细胞上清,ELISA检测IL-6分泌情况。在Huh7肝癌细胞中用小干扰RNA(siRNA)敲低TRIML1,spheres形成实验检测敲低TRIML1对Huh7生长状况的影响,并且收取上清检测IL-6的分泌。结果:成功筛选出过表达TRIML1的稳定株;过表达TRIML1稳定株细胞增殖活性明显高于对照组(P0.01);过表达TRIML1稳定株的软琼脂集落数明显高于对照组(P0.01);过表达TRIML1稳定株组的裸鼠瘤体体积和重量明显高于对照组(P0.01);过表达TRIML1稳定株的IL-6本底水平的分泌和TNF-α诱导的分泌均高于对照组(P0.01)。TRIML1敲低后,Huh7细胞spheres形成能力显著下降,IL-6的分泌量也降低,反向验证上述效应。结论:TRIML1能明显促进肝癌细胞体内和体外的恶性增长,效应可能与IL-6的表达上升有关。     

介入性治疗食道恶性狭窄的临床观察

目的探讨介入治疗在食道恶性狭窄中的治疗价值。方法利用球囊导管扩张术和内支架置入术对31例食道恶性狭窄进行成型治疗。结果本组31例食道恶性狭窄复通率100%,提高了患者的生活质量,延长了生存期。结论介入性治疗是治疗食道恶性狭窄安全、有效的方法。     

小鼠ACADL对巨噬细胞表达炎症因子的影响

目的探讨长链酰基辅酶A脱氢酶(Acyl-CoA dehydrogenase,long chain,ACADL)对巨噬细胞分泌炎症因子的影响。方法在体外诱导的小鼠骨髓来源巨噬细胞中加入脂多糖(LPS)以及白细胞介素4(IL-4)分别诱导M1和M2极化,在极化0、12、24、36、48 h时用Western blot检测ACADL在M1和M2极化中的蛋白表达量。构建ACADL-pEGFP-N1质粒,使用G418筛选和鉴定过表达ACADL的RAW264.7细胞稳定株。LPS刺激过表达ACADL稳定株和对照组细胞4 h后,通过ELISA和qRTPCR检测TNF-α、IL-6、IL-10的表达情况。在RAW264.7细胞中加入beta氧化抑制因子etomoxir预处理,ELISA检测TNF-α、IL-6、IL-10的表达情况。结果在巨噬细胞极化过程中ACADL蛋白量先减少再增加;过表达ACADL的细胞中,IL-6和IL-10分泌量及mRNA水平均显著高于对照组(P0.001):beta氧化抑制因子etomoxir能够减少RAW264.7细胞分泌炎症因子。结论 ACADL能增强巨噬细胞IL-6和IL-10的分泌,其作用机制可能是通过beta氧化影响炎性细胞因子的表达。