能量限制对化疗大鼠卵巢的形态结构与功能的保护作用

目的探讨能量限制对环磷酰胺处理大鼠卵巢的保护作用。方法将48只10周龄大鼠随机分为对照组、能量限制组、环磷酰胺组、能量限制加环磷酰胺组。观察各组动物的动情周期,实验结束时称取卵巢重量,并进行卵巢组织形态学观察及卵泡计数,测定血清雌二醇、促黄体生成素、促卵泡生成激素评估卵巢储备功能。结果经环磷酰胺处理的大鼠出现精神萎靡、体重下降、动情周期逐渐消失,卵巢体积缩小,颗粒细胞变性、坏死,各期卵泡数均明显减少,闭锁卵泡数增加（P〈0.01）。能量限制组大鼠卵巢的原始卵泡数比对照组明显增多（P〈0.01）,窦状卵泡数减少（P〈0.01）。能量限制加环磷酰胺组的原始卵泡和初级卵泡数比环磷酰胺组明显增多（P〈0.01）,且卵巢组织受损程度较单用环磷酰胺轻。环磷酰胺处理组大鼠血清雌二醇显著低于对照组和能量限制组,促黄体生成素和促卵泡生成素水平则显著高于对照组和能量限制组（P〈0.01）。结论能量限制模型可以抑制原始卵泡的的转化使其数量明显增多,并可以适度减轻化疗造成的结构与功能损伤,使卵巢保留有一定储备功能。     

PRP宫腔灌注联合宫腔镜检查在FET周期中的应用

目的 探讨予自体富血小板血浆(PRP)宫腔灌注联合宫腔镜检查对冻融胚胎移植(FET)患者妊娠结局的影响。方法 选择两次及以上胚胎种植失败史在此接受解冻移植的不孕患者150例,采用随机数字表法分为宫腔镜检查组、PRP灌注组和观察组各50例。宫腔镜检查组于移植前一周期宫腔镜检查1次;PRP灌注组于FET周期转化前3天宫腔灌注PRP1次;观察组于FET前一周期行宫腔镜检查,术后3天予宫腔灌注1次,FET周期转化前3天再宫腔灌注PRP1次。比较治疗后3组患者转化时内膜、激素水平、临床妊娠率、胚胎种植率、早期流产率。结果 三组患者FET周期转化日激素水平、移植胚胎数目、早期流产率比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组转化时内膜厚度、胚胎种植率、临床妊娠率显著高于宫腔镜检查组和PRP灌注组,差异有统计学意义(P<0.05)。PRP灌注组转化日内膜厚度、胚胎种植率、临床妊娠率稍高于宫腔镜检查组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PRP宫腔灌注联合宫腔镜检查可增加子宫内膜厚度,提高PIF患者FET周期中胚胎种植率、临床妊娠率,对转化日激素水平、早期流产率无明显影响;同时自体PRP宫腔灌注可稍增加子宫内膜厚度。     

靶向干扰睾丸支持细胞功能的重组避孕疫苗的构建与表达

目的 构建含小鼠卵泡刺激素(亚单位(FSH-β)与闭锁因子(Ocln )特定基因片段的重组质粒,以期获得靶向干扰睾丸支持细胞功能的重组避孕疫苗.方法 运用PCR 技术,分别扩增小鼠FSH-β亚单位特定基因序列和闭锁因子第二个胞外环序列片段;定向克隆到pET28b表达载体中;并运用免疫印迹法对重组蛋白的表达做初步鉴定.结果 通过双酶切分析、测序鉴定证实特定的FSH-β亚单位和Ocln基因片断被成功克隆到pET28b中,且诱导表达的重组蛋白能够被抗小鼠FSH-β及抗O cln抗体所识别.结论 重组分子具有两种靶分子的抗原性,为进一步研究其生物学活性及免疫避孕效应奠定基础.     

小鼠FSH-Occludin重组多价避孕疫苗的构建及表达

目的 构建FSH与Occludin重组基因的毕赤酵母分泌型表达载体.方法 利用RT-PCR技术,从小鼠新鲜脑组织中提取总RNA扩增获得FSH-β亚单位,同法从小鼠新鲜睾丸组织中提取总RNA扩增Occludin,通过双重PCR扩增,获得含FSH-β亚单位特定基因序列和闭锁因子第2个胞外环序列的耦合片段, 构建两种重组质粒pPIC9K FSH-Occludin;经酶切鉴定后电转化毕赤酵母菌株GS115,YPD-G418平板筛选高拷贝转化子,甲醇诱导后SDS-PAGE电泳鉴定.结果 通过双酶切分析、DNA测序鉴定明确特定的FSH-β亚单位和Occludin基因耦合片段序列与设计完全一致.目的蛋白相对分子质量分别约为14×103与12×103 ,与理论预测值相吻合;Western blot检测具有良好的免疫反应性.结论 耦合片段被成功克隆到巴氏毕赤酵母表达载体pPIC9K中并高效、正确的表达.     

FSH-occludin融合蛋白在毕赤酵母中的表达纯化及免疫原性检测

目的 纯化FSH-occludin融合蛋白,并检测其免疫原性.方法 将表达FSH-occludin 蛋白的酵母工程菌GS115/ pPIC9K接种到YPD培养基中多次传代后,用PCR 检测其目的 基因.该酵母工程菌在BMMY培养基中经甲醇诱导表达,上清液初步浓缩后上柱进行凝胶过滤层析,并将纯化蛋白免疫Balb/c 小鼠,检测其血清抗体水平 ,以免疫组化的方法分析各组织occludin的表达与定位.结果 该酵母工程菌经多次传代后外源基因不丢失,Western blot检测结果表明纯化蛋白具有很好的反应原性,免疫组化证实occludin在实验组高表达.结论 表达FSH-occludin蛋白的酵母工程菌具有很好的遗传稳定性,其表达产物可诱导小鼠产生特异性体液免疫应答.     

血浆同型半胱氨酸检测对2型糖尿病的预警价值

【目的】探讨血浆同型半胱氨酸（Hcy）含量与2型糖尿病（T2DM）发生发展的关系。【方法】分别检测42例T2DM患者（T2DM组）、64例空腹血糖受损患者（空腹血糖受损组）的Hcy、空腹血糖（FPG ）、糖化血红蛋白（HbA1c）及尿微量白蛋白（UMALB）,并与86名健康体检者（对照组）进行比较,同时比较分析 Hcy 与 FPG、HbA1c、UMALB的相关性。【结果】 T2DM组血浆中Hcy、HbA1c、FPG及UMALB水平均显著高于对照组（ P＜0．05）,空腹血糖受损组FPG、Hcy及UMALB的平均值显著高于对照组（ P＜0．05）,HbA1c略升高,但差异无统计学意义（ P ＞0．05）。Pearson相关分析显示血浆 Hcy的升高与FPG（ r ＝0．465）、HbA1c（ r ＝0．246）、UM-ALB（ r ＝0．775）呈正相关（均 P ＜0．05）。【结论】Hcy水平与T2DM的发生和发展密切相关,空腹血糖受损者检测Hcy对于预防T2DM有重要意义。     

下肢有关解剖学标志的测量与长围指数分型

目的　为临床下肢美容术及人类形态学积累资料。方法　对湖南地区 2 5 5例成人的下肢进行直接测量与观察研究 ,共测量 1 3项 ,并进行统计分析。结果　计算 1 3项测量值的均数、标准差、大腿长围指数、小腿长围指数 ,并根据指数进行分型。结论　男性与女性的下肢差异有显著性(P <0 .0 1 ) ,两种指数分型中均以较细长及中等多见。本文对分析人类特征 ,美容术等有一定参考价值     

能量限制对化疗大鼠卵巢的形态结构与功能的保护作用

目的探讨能量限制对环磷酰胺处理大鼠卵巢的保护作用。方法将48只10周龄大鼠随机分为对照组、能量限制组、环磷酰胺组、能量限制加环磷酰胺组。观察各组动物的动情周期,实验结束时称取卵巢重量,并进行卵巢组织形态学观察及卵泡计数,测定血清雌二醇、促黄体生成素、促卵泡生成激素评估卵巢储备功能。结果经环磷酰胺处理的大鼠出现精神萎靡、体重下降、动情周期逐渐消失,卵巢体积缩小,颗粒细胞变性、坏死,各期卵泡数均明显减少,闭锁卵泡数增加(P<0.01)。能量限制组大鼠卵巢的原始卵泡数比对照组明显增多(P<0.01),窦状卵泡数减少(P<0.01)。能量限制加环磷酰胺组的原始卵泡和初级卵泡数比环磷酰胺组明显增多(P<0.01),且卵巢组织受损程度较单用环磷酰胺轻。环磷酰胺处理组大鼠血清雌二醇显著低于对照组和能量限制组,促黄体生成素和促卵泡生成素水平则显著高于对照组和能量限制组(P<0.01)。结论能量限制模型可以抑制原始卵泡的的转化使其数量明显增多,并可以适度减轻化疗造成的结构与功能损伤,使卵巢保留有一定储备功能。     

能量限制下SIRT1高表达对大鼠卵巢生殖寿命的影响

目的观察能量限制后成年大鼠卵巢SIRT1高表达对卵巢功能和寿命的影响。方法 24只10周龄雌性SD大鼠,随机分为35%能量限制组和对照组。对照组不给予特殊处理自由取食,能量限制组予对照组食量的65%,每日调整饲料量,每周称体重。HE染色卵巢组织形态学观察及卵泡分类计数,免疫组织化学法观察SIRT1蛋白定位,Western blot检测SIRT1蛋白表达。结果能量限制组大鼠摄入能量少,体重的增长速度要低于对照组(P0.05),腹部脂肪明显少于对照组(P0.01);卵巢外观形态与对照组无异,原始卵泡数明显多于对照组(P0.01),窦状卵泡少于对照组(P0.01);SIRT1蛋白表达定位于卵母细胞的胞核,弱表达于胞浆,免疫印迹检测显示能量限制诱导大鼠卵巢组织SIRT1高表达,灰度值扫描与对照组有显著性差异(P0.05)。结论内源性SIRT1高表达可能是抑制原始卵泡的转化和发育,能量限制诱导SIRT1高表达可能对于延长卵巢的生殖寿命及提高卵巢的储备有积极作用。     

下肢的测量与分型

目前国内外关于正常人下肢的测量观察报道不多,医学在迅速发展,美容增高术等已广泛开展,为给美容医学、人类学等提供形态学基础,本文特对255例正常成人进行了测量和观察研究。