金氏补肾活血方对卵巢储备功能减退大鼠TGF-β1/Smads信号通路及性激素的影响

目的 观察金氏补肾活血方对卵巢储备功能减退模型大鼠的性激素、卵巢组织形态的作用及其调节转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路的可能机制。方法 将50只SD雌性大鼠随机分为5组:空白组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组均给予环磷酰胺75 mg/kg腹腔注射,复制卵巢储备功能减退(DOR)大鼠模型。经灌胃治疗后,阴道涂片观察大鼠动情周期变化、酶联免疫法(ELISA)检测血清性激素、苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织形态、荧光定量聚合酶链反应法(RT-qPCR)检测大鼠卵巢转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3、Smad7的基因表达。结果 与空白组比较,膜型组大鼠的动情周期丧失规律性,血清雌二醇(E₂)、抗缪勒管激素(AMH)水平显著降低(P<0.01),促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)水平显著升高(P<0.01),卵巢指数、子宫指数明显降低(P<0.05),卵泡发育出现闭锁,卵巢中TGF-β1、Smad2、Smad3的表达量均减少(P<0.01),Sma...     

脂肪间充质干细胞移植对环磷酰胺诱导的大鼠卵巢功能损伤的影响

目的：探讨脂肪间充质干细胞对化学药物治疗(以下简称化疗)药物环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导的卵巢功能损伤的影响及其作用机制。方法：从雌性SD大鼠脂肪组织中分离脂肪间充质干细胞并进行体外培养,将其分为空白对照组和CTX组,每组15只;再选取45只正常动情周期的SD大鼠,用CTX 75 mg/kg腹腔注射给药1次的方式建立模型,再随机分为对照组(不再予其他处理,A组)、尾静脉注射组[尾静脉注射脂肪间充质干细胞0.6 mL(6×105个细胞),B组]和卵巢原位注射组[经卵巢原位注射脂肪间充质干细胞40 µL(每侧20 µL,2×104个细胞),C组],每组15只。比较A,B,C 3组大鼠用药前后生存质量、体重变化;ELISA法测定血清卵泡刺激素、雌二醇水平;HE染色观察卵巢组织及卵泡计数;免疫组织化学法、real-time PCR法及蛋白质印迹法测定骨形态发生蛋白-15(bone morphogenetic protein 15,BMP-15),Bcl-2和Bax的表达;TdT介导的脱氧尿嘧啶缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测A,B,C 3组大鼠卵泡细胞凋亡率。结果：尾静脉注射或卵巢原位注射脂肪间充质干细胞后,与A组比较,B组和C组大鼠生存质量提高,移植前后的体重增长值明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.01);与A组比较,B组大鼠血清雌二醇水平明显升高,卵泡刺激素水平明显下降(均P<0.01),C组大鼠血清雌二醇水平升高,卵泡刺激素水平明显下降(分别P<0.05,P<0.01);B组和C组大鼠卵巢组织切片HE染色见颗粒细胞层明显增多,黄体数量增多,各级卵泡计数均增加,可见多个新生卵泡及成熟的卵母细胞;与A组比较,B组大鼠的原始卵泡数、窦状和排卵前卵泡数以及总卵泡数均明显增加,窦前卵泡数也增加(分别P<0.01,P<0.05),C组大鼠的原始卵泡数、窦前卵泡数、窦状和排卵前卵泡数以及总卵泡数均明显增加(均P<0.01);与A组比较,B组和C组大鼠卵巢组织BMP-15和Bcl-2的表达明显增多,Bax的表达明显减少(均P<0.01),大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡率明显降低(P<0.01);B组与C组之间比较,大鼠体重增长值,血清雌二醇及卵泡刺激素水平,各级卵泡计数,BMP-15,Bcl-2及Bax的表达水平,卵巢颗粒细胞凋亡率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论：脂肪间充质干细胞移植能够有效地修复CTX化疗所致的卵巢功能损伤,该作用可能是通过抑制颗粒细胞的线粒体凋亡途径实现的。     

补肾化痰方对多囊卵巢综合征大鼠性激素及卵巢形态学的影响

目的:观察补肾化痰方对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠性激素及卵巢形态学的影响。方法:采用皮下注射脱氢表雄酮造模法建立PCOS大鼠模型,60只造模大鼠随机分为模型对照组、二甲双胍组、补肾化痰方低剂量组、补肾化痰方高剂量组,另取15只大鼠为正常对照组,各组给予相应药物连续灌胃28 d。行阴道涂片、HE染色观察动情周期;用酶联免疫吸附测定法测定血清促黄体生成素、睾酮水平;行卵巢组织HE染色,光镜下观察卵巢组织形态学变化。结果:与对照组比较,模型组大鼠无规律的动情周期,血清促黄体生成素、睾酮水平升高,卵巢表面苍白、体积增大、黄体数目减少、呈多囊样改变。二甲双胍和补肾化痰方两个剂量组可明显降低模型大鼠血清促黄体生成素、睾酮水平,恢复大鼠动情周期,增加各级卵泡数目及黄体数目,改善卵巢形态学结构。与补肾化痰方低剂量组比较,补肾化痰方高剂量组降低睾酮水平更明显。结论:补肾化痰方可从总体上调节下丘脑-垂体-卵巢轴功能,降低多囊卵巢综合征大鼠促黄体生成素、睾酮水平,恢复大鼠动情周期,改善卵巢形态学结构。     

滋肾养心补血汤对卵巢储备功能低下模型大鼠性激素及排卵功能的影响

目的:观察滋肾养心补血汤对卵巢储备功能低下大鼠性激素水平及排卵功能的影响。方法:选取具有规律动情周期的大鼠60只,随机抽取15只为空白对照组,余45只制作卵巢储备功能低下模型。造模成功后将模型大鼠随机分为:模型对照组、滋肾养心补血汤组、补佳乐组。各组药物干预后检测血清促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E_2)水平及对卵巢组织窦卵泡和黄体计数。结果:与模型对照组比较,滋肾养心补血汤组能下调大鼠FSH、LH水平、上调大鼠E_2水平,能增加大鼠卵巢窦卵泡及黄体数目,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:滋肾养心补血汤可有效改善卵巢储备功能低下大鼠性激素水平和排卵功能。     

滋肾养心补血汤对卵巢储备功能低下模型大鼠性激素及排卵功能的影响

目的:观察滋肾养心补血汤对卵巢储备功能低下大鼠性激素水平及排卵功能的影响。方法:选取具有规律动情周期的大鼠60只,随机抽取15只为空白对照组,余45只制作卵巢储备功能低下模型。造模成功后将模型大鼠随机分为:模型对照组、滋肾养心补血汤组、补佳乐组。各组药物干预后检测血清促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E_2)水平及对卵巢组织窦卵泡和黄体计数。结果:与模型对照组比较,滋肾养心补血汤组能下调大鼠FSH、LH水平、上调大鼠E_2水平,能增加大鼠卵巢窦卵泡及黄体数目,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:滋肾养心补血汤可有效改善卵巢储备功能低下大鼠性激素水平和排卵功能。     

低强度脉冲超声对环磷酰胺诱导的大鼠卵巢损伤有修复作用

目的 探讨低强度脉冲超声对腹腔注射环磷酰胺引起的SD大鼠卵巢损伤的修复作用.方法63只清洁级雌性SD大鼠随机取13只为正常组,其余50只连续5 d腹腔注射环磷酰胺30 mg/kg,建立卵巢早衰动物模型.将造模成功的43只大鼠随机分为实验对照组(21只)、治疗组(22只).正常组、实验对照组不干预;治疗组给予低强度脉冲超声辐照.监测各组大鼠动情周期的变化,辐照结束后7 d处死大鼠,测定血清雌二醇(E2),卵泡刺激素(FSH),抗苗勒管激素(AMH)的变化,观察各组大鼠卵巢形态学及卵泡数量变化.结果 注射环磷酰胺后,与正常组相比,实验对照组动情周期紊乱,各级卵泡数明显减少,血清E2和AMH显著降低,FSH显著升高(P=0.01);超声辐照后,与实验对照组相比,治疗组动情周期恢复正常,卵泡数明显增加,血清E2显著增高(P=0.01),FSH显著降低(P=0.01),AMH变化不明显(P=0.50).结论 低强度脉冲超声对腹腔注射环磷酰胺引起的SD大鼠卵巢的损伤有修复作用.     

来曲唑诱导的多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织中角质细胞生长因子的表达

目的:探讨角质细胞生长因子(KGF)在多囊卵巢综合征(PCOS)发病机制中的作用.方法:40只雌性SD大鼠随机分为2组,PCOS组应用来曲唑诱导大鼠PCOS模型,对照组不作任何处理.阴道涂片观察大鼠动情周期变化;应用放免法测定大鼠血清促黄体生成素(LH)、促卵泡刺激素( FSH)、雌二醇( E2)、孕酮(P)和睾酮(T)水平;取卵巢组织行HE染色和免疫组织化学SABC染色分别观察组织学变化及卵巢组织中KGF的表达.结果:PCOS组大鼠失去规律性动情周期变化,血清T、LH浓度高于对照组(P<0.05),血清P浓度低于对照组(P<0.05);PCOS组KGF在窦前卵泡膜细胞的表达明显强于对照组(P<0.05),在囊状卵泡膜细胞的表达明显弱于对照组(P＜0.05).结论:来曲唑诱导的大鼠动物模型是理想的PCOS模型;KGF与PCOS的发病密切相关.     

慢性精神应激对雌性大鼠卵巢储备功能的影响研究

目的观察慢性精神应激对雌性大鼠卵巢储备功能的影响。方法性成熟的雌性Wistar大鼠24只,随机分为实验组及对照组。实验组采用慢性温和不可预知应激(CUMS)法,模拟慢性精神应激,引起大鼠情绪改变;对照组不给予任何干预,光照规律,食水随意,安静饲养。观察大鼠血清中雌二醇(E_2)、促卵泡生成素(FSH)的表达水平,以及卵巢组织病理形态变化。结果与对照组比较,实验组大鼠体质量增加较少,活动减少,糖水偏好度下降,动情次数减少,差异有统计学意义(P<0.05),血清E_2水平降低,FSH水平升高,差异亦有统计学意义(P<0.05)。实验组大鼠卵巢中各级卵泡数、黄体数、卵泡液中颗粒细胞层数较对照组明显减少,并伴有不同程度血管扩张。结论慢性精神应激可导致雌性大鼠卵巢储备功能下降。     

长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响

目的探讨长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响。方法 6月龄雌性SD大鼠30只,分为正常饮食组、能量限制(CR)20%组和CR40%组,记录正常饮食(NC)组每日摄食量,并将此摄食量的80%和60%分别喂养CR20%组和CR40%组大鼠,监测大鼠体重及动情周期变化,12个月后取大鼠卵巢。卵巢组织切片由苏木精-伊红染色,观察卵泡储备数量和不同发育阶段的卵泡比例。结果 NC组体重持续上升,而CR20%组体重小幅增加,CR40%组体重持续下降。CR40%组大鼠的卵泡储备数量(105.7±9.5)和原始卵泡数(55.0±6.8)与NC组(51.2±5.4,18.3±3.7)相比差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.001),原始卵泡比例(52.1%±2.9%)与对照组(35.8%±5.5%)相比差异有统计学意义(P<0.001),而成熟卵泡比例(6.8%±1.9%)和发育卵泡比例(41.2%±3.0%)与NC组(15.6%±6.2%,48.9%±4.2%)相比差异亦有统计学意义(P<0.001,P<0.05)。CR20%组卵泡储备数量和不同发育阶段的卵泡比例与NC组相比差异无统计学意义。结论长期能量限制可能通过抑制卵泡发育启动、减少发育卵泡和成熟卵泡的数量,从而减少卵泡的消耗,有益于生殖寿命延长。     

环磷酰胺对大鼠卵巢功能的影响

[目的]探讨环磷酰胺(CTX)对大鼠卵巢功能损害的影响,建立CTX对卵巢功能损害的大鼠模型,观察检测CTX作用下卵巢功能变化的相关指标及观察CTX作用后大鼠卵巢储备功能变化的相关因素.[方法]60只60～70 d的清洁级成年雌性SD大鼠分为空白对照组(生理盐水组)和CTX组(CTC 75 mg/kg),分别于用药后3 d、1周、2周、4周、8周观察动情周期、称取卵巢重量、卵巢组织形态学观察及卵泡计数、测定血清雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH),评估卵巢储备功能.[结果]成年大鼠用药后3 d、1周、2周、4周、8周卵巢原始卵泡数分别与对照组比较,原始卵泡数均减少(P<0.05).用药后3 d、1周、2周、4周血清E2分别与对照组比较,E2降低(P<0.05).用药后3 d、1周血清FSH分别与对照组比较,FSH升高(P<0.05).成年CTX组大鼠第1、2周阴道涂片显示动情周期发生改变,规则的动情周期变化消失,周期延长为8～17d,绝大多数停止于动情间期.用药后1周、2周、4周、8周卵巢重量分别与对照组比较,卵巢重量减轻(P<0.05).[结论]①本研究采用CTX 75 mg/kg单次腹腔注射用药建立CTX对卵巢功能损害的大鼠模型,成本低,手术操作简便,建模成功率高.②CTX作用下卵巢形态学改变最显著的是原始卵泡数目减少,提示这可能是其减少卵巢储备量,致卵巢功能受损的主要机制之一.     

肥胖通过抑制SIRT1信号加速大鼠卵泡的发育与消耗

目的：研究肥胖与能量限制（CR）对大鼠卵泡发育和卵巢寿命的影响及其作用机制。方法：雌性SD大鼠随机分为对照（NC）组（自由取食）、高脂（HF）组（自由取食添加20%猪油的标准饲料）、CR组（摄食NC组70%的饲料）,每周测重,每天检测进食量和阴道涂片观察大鼠动情周期;苏木精-伊红染色观察卵泡发育和各级卵泡计数,Western blot检测SIRT1和其下游靶分子FOXO3a蛋白表达水平。结果：HF组体质量、内脏脂肪和卵巢质量均高于NC和CR组（P〈0.05）。HF组存活卵泡总数与NC组比无统计学意义,但原始卵泡数（22.1±0.7）及比例（10.3%±0.2%）相对于NC组（43.6±0.6,23.0%±0.2%）显著减少（P〈0.05）,而发育卵泡数（106.8±2.5 vs 81.0±1.8;P〈0.01）、闭锁卵泡数（79.2±0.9 vs 63.6±1.0;P〈0.01）和黄体数（36.1±1.4 vs 20.5±1.8;P〈0.05）均增多。CR组存活卵泡总数（138.9±1.2）、黄体数（28.6±1.5）和原始卵泡数（62.8±1.4）及比例（32.7%±0.4%）均显著增加,闭锁卵泡数（53.2±0.9）及比例（27.4%±0.3%）均减少。Western blot结果显示HF组卵巢SIRT1和FOXO3a蛋白表达低于NC组（P〈0.05）,而CR组SIRT1和FOXO3a表达高于NC组（P〈0.05）。结论：肥胖可能通过抑制SIRT1信号加速卵巢卵泡的发育与消耗,从而导致卵巢早衰;相反CR可能通过激活SIRT1信号抑制原始卵泡的发育启动以及各级卵泡的发育与闭锁,保持卵巢中卵泡的储备量,以此延长卵巢寿命。     

1-磷酸-神经鞘氨醇干预化疗对荷瘤小鼠卵巢功能和抑瘤效果的影响

目的探讨凋亡抑制因子1-磷酸-神经鞘氨醇(S1P)对环磷酰胺(CTX)联合顺铂(DDP)诱导的S180荷瘤小鼠卵巢功能损害的干预作用及其对肿瘤化疗效果的影响。方法将52只C57BL/6雌性小鼠随机选取10只作为空白对照组,余皮下接种S180肿瘤细胞后随机分为3组,即荷瘤对照组、单纯化疗组、S1P+化疗组,每组14只。用药期间动态观察动情周期及肿瘤体积变化,于用药前、用药第11天左右的动情间期分批处死小鼠,分别称取体质量、卵巢质量及肿瘤质量;采用酶联免疫吸附(ELISA)法动态检测用药前后各组小鼠血清的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及雌二醇(E2)水平的变化;卵巢组织连续病理切片,计算原始卵泡、生长卵泡数量的变化。每组剩余小鼠与成年雄性小鼠合笼,观察生育情况。结果(1)血清基础性激素水平:给药前,各组血清FSH、LH、E2水平无显著性差异(P>0.05);用药第11天左右,单纯化疗组血清FSH水平明显高于其余3组、E2水平明显低于其余3组,其差异均有显著性意义(P<0.01),但血清LH水平各组间无显著性差异(P>0.05);S1P+化疗组血清FSH、LH、E2水平与两对照组均无显著性差异(P>0.05);(2)卵泡数量及卵巢质量:用药第11天左右,单纯化疗组原始卵泡数和卵巢质量明显低于其余3组(P<0.01),其生长卵泡数亦明显低于空白对照组、荷瘤对照组(P<0.01),但与S1P+化疗组的差别无显著性意义(P>0.05)。S1P+化疗组原始卵泡数、生长卵泡数及卵巢质量与空白对照组、荷瘤对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);(3)肿瘤质量和抑瘤率:给药第11天左右,与荷瘤对照组比较,单纯化疗组、S1P+化疗组的皮下肿瘤体积增长速度均受到明显抑制,两组的肿瘤质量与荷瘤对照组相比均有显著性差异(P<0.01),且两组的抑瘤率均高于60%。结论 S1P可以在不影响肿瘤化疗效果的同时,预防化疗对小鼠卵巢功能的损害。     

1-磷酸-神经鞘氨醇预防化疗大鼠卵巢功能损害的实验研究

 【目的】探讨1-磷酸-神经鞘氨醇(S1P)对环磷酰胺(CTX)导致的大鼠卵巢功能损害的保护作用及可能机制。【方法】40只雌性SD大鼠随机分为4组,即实验对照组(生理盐水组)、CTX组、S1P+NS组及S1P+CTX组,每组10只,于结束用药的第1～2周内的动情间期处死,观察卵泡数量的变化,并采用半定量RT-PCR检测卵巢组织Bcl-2及Bax的mRNA变化。【结果】S1P+CTX组的原始卵泡、初级卵泡和生长卵泡数与S1P+NS组、对照组的差别不显著(P>0.05),而CTX组的所有卵泡数均少于其余3组,其差异均有显著性意义(P<0.01)。卵巢组织中,S1P两组Bcl-2 mRNA的表达明显高于对照组及CTX组(P<0.01),Bax mRNA表达明显低于对照组及CTX组(P<0.01);而CTX组的Bcl-2 mRNA表达明显低于对照组及S1P两组(P<0.01),BaxmRNA表达明显高于对照组及及S1P两组(P<0.01)。【结论】S1P能预防CTX导致的大鼠卵巢功能损害,其抗凋亡作用可能是通过调节Bcl-2家族成员表达而实现。     

化疗同步应用丙氨瑞林（GnRHa）对化疗所致卵巢功能损伤影响的实验研究

[摘要] 目的: 研究注射环磷酰胺(CTX)大鼠同时应用促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对注射环磷酰胺(CTX)大鼠的卵巢功能的影响.方法: 40只大鼠分为4组:空白对照组(10只),GnRHa组(10只),CTX组(10只), CTX + GnRHa组(10只)分别接受0.9%生理盐水、CTX、GnRHa和CTX + GnRHa注射。采用放射免疫分析法测定各组大鼠血清卵泡刺激素( FSH)和雌二醇（E2）浓度的变化.在停药时及停药后两周, 正常对照组各处死5只大鼠,其余三组分别处死4只大鼠. 观察卵巢重量、卵泡数量及卵泡直径的变化。结果:停药后两周,联合治疗组大鼠的血清雌二醇和FSH浓度分别为（43.39±4.40）pg/ml与（3.48±0.16）mIU/mL;与正常对照组比较,差异无统计学意义( P ＞ 0.05);而CTX组大鼠在血清雌二醇和FSH浓度分别为（26.97±5.58）pg/ml与（3.92±0.35）mIU/mL ,与其余3组分别比较,差异均有统计学意义( P < 0.05)。在停药时和停药后两周处死大鼠的卵巢中,CTX组卵泡总数最少,各组间比较,差异均有统计学意义( P < 0.05) ;结论: 注射CTX同时应用GnRHa能够减少CTX对大鼠的卵巢功能的损伤。 [关键词] 促性腺激素释放激素激动剂 环磷酰胺 卵巢 大鼠;     

应用PK刀和热能刀行腹腔镜下卵巢囊肿剥离术对卵巢储备功能的影响

目的:探讨应用PK刀和热能刀两种不同刀具行腹腔镜下卵巢囊肿剥离术对术后卵巢储备功能的影响。方法:选取采用PK刀和热能刀两种不同刀具行腹腔镜下卵巢囊肿离的患者80例,其中PK刀组(A组)40例,热能刀组(B组)40例。所有患者于术前、术后1个月及3个月分别抽血检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、血清基础抑制素B(INHB)及阴道超声探测窦状卵泡数(AFC)以判断卵巢储备功能。结果:两组病例在术后1月均出现E2、INHB下降及FSH、LH增高,AFC的比较差异有统计学意义(P<0.05)。PK刀组与热能刀组术后3个月E2、INHB、FSH、LH、AFC的比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:腹腔镜下采用PK刀行卵巢囊肿剥除术较热能刀易造成卵巢储备功能降低。     

菟丝子总黄酮对大鼠卵巢储备功能减退的改善作用

【目的】探讨菟丝子总黄酮通过卵泡刺激素(FSH)-环磷酸腺苷(c AMP)信号轴对大鼠卵巢储备功能减退的改善作用。【方法】从68只雌性SD大鼠中抽取10只为正常组,其余构建卵巢储备功能减退模型。将成功建模的48只大鼠随机分为抑制剂组、模型组、抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组,每组12只。抑制剂组灌胃H-89 0.1 mg/kg,抑制剂+菟丝子总黄酮组灌胃H-89 0.1 mg/kg+菟丝子总黄酮530.1 mg/kg,菟丝子总黄酮组灌胃菟丝子总黄酮530.1 mg/kg,模型组、正常组灌胃等体积生理盐水,均连续4周,每周休息1 d。给药4周后,称取各组大鼠卵巢湿质量,计算卵巢指数,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测大鼠血清性激素水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织形态学变化,ELISA法检测卵巢组织中cAMP含量,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测卵巢组织卵泡刺激素受体(FSHR)、蛋白激酶A(PKA)及磷酸化PKA(p-PKA)表达。【结果】模型组大鼠进食、二便、毛色、动情周期出现异常,卵巢萎缩明显,卵泡数量、黄体减少;与模型组比较,抑制剂组大鼠进食、二便、毛色、动情周期异常情况更严重,卵巢萎缩更明显,卵泡与黄体数量更少,而抑制剂组+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组大鼠进食、二便、毛色、动情周期,卵巢、卵泡与黄体数量明显改善。与正常组比较,抑制剂组、模型组、抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数降低,FSH、FSH/LH、E;水平升高,卵巢组织中cAMP含量降低,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量降低(P<0.05);与抑制剂组比较,模型组、抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数升高,FSH、FSH/LH、E;水平降低,卵巢组织中cAMP含量升高,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量升高(P<0.05);与模型组比较,抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数升高,FSH、FSH/LH、E;水平降低,卵巢组织中c AMP含量升高,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量升高(P<0.05);与抑制剂+菟丝子总黄酮组比较,菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数升高,FSH、FSH/LH、E;水平降低,卵巢组织中cAMP含量升高,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量升高(P<0.05)。【结论】菟丝子总黄酮可能通过FSH-cAMP信号轴改善大鼠卵巢储备功能减退。     

GnRH激动剂和经血源性干细胞联合治疗对小鼠卵巢功能的影响

目的 探究促性腺激素释放激素（GnRH）激动剂和经血源性干细胞（MenSCs）联合治疗对小鼠卵巢功能的影响。方法 将45只SPF级实验小鼠随机分为Control组（腹腔注射生理盐水）、POF组（腹腔注射120 mg·kg-1·d-1 CTX）、MenSC+POF组（CTX损伤处理后注射移植含2×106 MenSCs的细胞悬浮液）、GnRHa+POF组（造模前14 d注射丙氨瑞林0.1 mg·kg-1·d-1,第15天开始CTX注射）、MenSC+POF+GnRHa组（按MenSC+CTX组和GnRHa+CTX组方案联合用药）,每组9只。HE染色观察小鼠卵巢组织病理变化情况,ELISA法检测小鼠血清中黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、抗苗勒管激素（AMH）和雌二醇（E2）的含量水平,Western blot检测小鼠卵巢颗粒细胞中KI-67、Bcl-2、BAX、caspase 9、caspase 3、cleaved-caspase 9、cleaved-caspase 3、p-PI3K、PI3K、p-Akt及Akt蛋白的表达情况。结果 与Control组相比,POF组小鼠卵巢纤维化明显,闭锁卵泡数增多,血清中LH和FSH的含量水平极升高（P<0.01）,AMH和E2含量水平降低（P<0.01）,BAX、cleaved-caspase 9/caspase 9、cleaved-caspase 3/caspase 3蛋白表达水平升高（P<0.01）,KI-67、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平降低（P<0.01）;与POF组比较,GnRH激动剂和经血源性干细胞联合治疗可抑制小鼠卵巢闭锁卵泡的产生,降低小鼠血清中LH和FSH的含量水平（P<0.01）,提高AMH和 E2的含量水平（P<0.05或P<0.01）,抑制小鼠卵巢颗粒细胞中BAX、cleaved-caspase 9、cleaved-caspase 3蛋白的表达（P<0.05或 P<0.01）,促进KI-67、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白的表达（P<0.05或P<0.01）。结论 GnRH激动剂和经血源性干细胞联合治疗可能通过上调PI3K-Akt信号通路表达,减少卵巢闭锁卵泡的产生,提高小鼠卵巢的储备功能,从而达到对卵巢修复和保护的目的。