两种人工激活剂对卵胞浆内单精子注射后未受精卵母细胞激活效果的比较

目的观察两种不同的人工激活剂对行卵胞浆内单精子注射（ICSI）后未受精卵母细胞的激活作用及效果。方法收集ICSI后24h未受精的人类成熟卵母细胞,分别采用乙醇和离子霉素进行激活处理。16～18h后观察第二极体排出及原核形成情况。激活后正常受精的胚胎继续培养3～5d。统计两组的激活率、原核形成情况、卵裂率及后期胚胎发育情况。结果乙醇处理组的激活率为65．6％（21／32）,离子霉素处理组的激活率为83．7％（36／43）,离子霉素处理组的激活率显著高于乙醇处理组（P〈0．05）;乙醇激活处理后共有10个卵母细胞表现为2PN＋2PB,占被激活卵母细胞的47．6％（10／21）,离子霉素激活处理后有24个卵母细胞表现为2PN＋2PB,占被激活卵母细胞的66．7％（24／36）,两组差异无统计学意义（P〉0．05）;乙醇激活组卵母细胞有4个发育到2～4细胞,2个发育到5～8细胞,1个发育到8细胞以上阶段,获1枚桑葚胚;离子霉素激活组卵母细胞有9个发育到2～4细胞,5个发育到5～8细胞,3个发育到8细胞以上阶段,最终获得2枚囊胚和1枚桑葚胚。结论两种激活剂均能激活ICSI后24h未受精的人类成熟卵母细胞恢复受精,并继续发育成胚胎;离子霉素比乙醇更适宜对ICSI后未受精卵母细胞的激活。     

未见原核的卵母细胞发育形成的优质胚胎的移植价值分析

目的分析优质的未见原核胚胎(0PN-E)在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中的移植价值。方法回顾性分析接受IVF助孕且无2原核胚胎(2PN-E)或2PN-E极少的98个新鲜周期,于取卵后第2天或第3天全部或部分移植优质的0PN-E,随访其生化妊娠率、临床妊娠率、着床率及继续妊娠率。结果全部或部分移植0PN-E的生化妊娠率为41.84%,临床妊娠率为35.71%,着床率24.22%,继续妊娠率75.61%。结论在IVF-ET治疗周期中,对于2PN-E极少或无2PN-E的周期,0PN-E可作为备选移植胚胎。     

3种不同载体对卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响

目的以小鼠成熟卵母细胞(MⅡ期)为试验对象,应用3种不同载体对其行玻璃化冷冻,旨在分析载体对冷冻效果的影响。方法采用玻璃化冷冻技术冻存昆明种小鼠成熟卵母细胞,设新鲜对照组和玻璃化冷冻组,玻璃化冷冻组又分为开放式脉管(OPS)组、自制麦管组和Cryoleaf组。比较冻融后鼠卵的存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果新鲜对照组和玻璃化冷冻组的受精率、卵裂率差异无统计学意义,但囊胚形成率差异有统计学意义(P<0.05);OPS组与自制麦管组的鼠卵存活率、受精率、卵裂率、囊胚形成率差异均无统计学意义;OPS组与Cryoleaf组比较,存活率差异有统计学意义(P<0.05),受精率、卵裂率、囊胚形成率差异均无统计学意义;自制麦管组与Cryoleaf组比较,存活率差异有统计学意义(P<0.05),而受精率、卵裂率、囊胚形成率差异均无统计学意义。结论载体的不同会对卵母细胞玻璃化冷冻效果形成一定程度的影响。     

慢速冷冻中糖浓度对卵母细胞纺锤体和染色体构型的影响

卵母细胞冷冻是目前人类体外受精（IVF）和生殖科学的前沿技术，人卵母细胞对冷冻有特异的敏感性，与是否实施慢速冷冻法还是玻璃化冷冻法无关。在实施慢速冷冻过程中，细胞内冰晶的形成、冷冻保护剂的毒性、渗透压、pH值、活性氧等因素均可以破坏卵母细胞的发育潜能。由于目前尚不能解决卵母细胞的安全性问题，所以研究旨在比较运用两种不同糖浓度的非渗透性冷冻保护剂进行慢速冷冻对MⅡ期卵的纺锤体形态及染色体构型的影响。     

HP-hMG在卵巢次高反应患者体外受精周期中的临床应用效果

目的:探讨卵巢次高反应患者体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)周期应用高纯度尿促性素(HP-hMG,贺美奇)与重组人卵泡刺激素(r-FSH,果纳芬)促排卵的临床结局。方法:选择IVF-ET助孕的卵巢次高反应患者310例,随机分为A组和B组,分别给予r-FSH+HP-hMG(A组,n=124)和r-FSH(B组,n=186)促排卵,统计促性腺激素(Gn)总用量、Gn使用天数、获卵数、受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率以及因卵巢过度刺激综合征(OHSS)周期取消率及ET后OHSS发生率。结果:患者的基本情况组间无统计学差异(P0.05),B组Gn使用天数明显多于A组(P0.05),Gn总用量明显多于A组(P0.05),hCG注射日E_2、LH组间无统计学差异(P0.05),B组hCG注射日孕酮(P)值显著高于A组(P0.05);获卵数B组显著多于A组(P0.05),受精率、卵裂率、移植胚胎数组间无统计学差异(P0.05),但优质胚胎率B组却显著低于A组(P0.05),移植患者临床妊娠率组间差异无统计学意义(P0.05),A组仅稍高于B组。A组预防OHSS周期取消率较B组明显下降(P0.05),B组移植患者OHSS发生率略高于A组(P0.05)。结论:在卵巢次高反应患者人群中从启动日添加HP-hMG能改善胚胎质量,增加子宫内膜容受性,降低OHSS发生率。     

不同冷冻载体对小鼠MⅡ期卵母细胞玻璃化冻、融技术影响

目的比较不同冷冻方法对小鼠成熟卵母细胞的冻存率和冻后发育潜能的影响,试图建立玻璃化冷冻技术平台,为人类卵母细胞玻璃化冷冻提供理论与技术参考。方法以昆明品系小鼠为实验材料、以玻璃化冷冻技术为基本方法冻存小鼠成熟卵母细胞。实验分为新鲜周期对照组和玻璃化冷冻组,玻璃化冷冻组又再分为开放式拉长麦管(OPS)组、自制麦管组和冷冻叶片(cryoleaf)组,比较其存活率、受精率、卵裂率和囊胚形成率。结果新鲜周期对照组和玻璃化冷冻组之间受精率差异无显著性,卵裂率差异亦无显著性(P>0.05),但是囊胚形成率之间差异有显著性(P<0.05);OPS组与自制麦管组之间存活率、受精率、卵裂率、囊胚形成率之间差异均无显著性(P>0.05);OPS组与cryoleaf组比较存活率之间差异有显著性(P<0.05),受精率、卵裂率、囊胚形成率之间差异均无显著性(P>0.05);自制麦管组与cryoleaf组之间存活率之间差异有显著性(P<0.05),而受精率、卵裂率、囊胚形成率之间差异无显著性(P>0.05)。结论OPS法和cryoleaf法均可以用于冷冻昆明小鼠卵母细胞,但cryoleaf法更安全可靠。     

人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值.方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射一胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力.根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P＞0.05),但是受精率存在显著性差异(P＜0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P＞0.05),但受精率存在显著性差异(P＜0.05).成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P＜0.05).程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例.获得1例生化妊娠.结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力.玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势.     

人卵母细胞第一极体活检对胚胎发育影响的研究

目的 建立第一极体(1PB)的活检方法 ,研究极体活检是否会对胚胎的发育造成不良影响.方法 利用激光打孔法对85枚成熟卵母细胞1PB进行活检,活检后行序贯培养至囊胚阶段.成功活检者和对照组186枚卵母细胞比较,分析受精率、卵裂率及囊胚形成率有无差异.将不同形态的极体分级,比较不同形态的极体活检对胚胎后续发育的影响.结果 成功活检81枚,成功率95.3%.活检组和对照组在两原核形成率、卵裂率及囊胚形成率上均无统计学差异(P>0.05).不同级别形态极体的活检和对照组相应级别相比较,囊胚形成率差异无统计学意义(P>0.05).结论激光打孔法活检极体安全有效.1PB活检不会对胚胎发育造成不良影响,对不同形态极体进行活检也不会影响胚胎后续的发育情况.     

IVF与ICSI周期实验室及临床结果观察

目的比较常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)与卵胞浆内单精子注射(ICSI)两种助孕技术的临床妊娠结局及产科结局。方法对843个IVF-ET及ICSI治疗周期的流产、异位妊娠、多胎妊娠的发生率及新生儿出生体重、胎儿孕龄、先天性畸形的情况进行回顾性分析;并对两组单胎、双胎妊娠的结局分别进行比较。结果ICSI组的受精率显著高于IVF组,IVF和ICSI两组早期胚胎的发育情况、产科结局、围生情况及出生后婴儿的健康情况差异无显著性(P>0·05)。但是双胎妊娠和单胎妊娠两组低体重儿、小于胎龄儿、早产的发生率之间有显著性差异,双胎妊娠组低体重儿、小于胎龄儿、早产的发生率均明显高于单胎妊娠组(P<0·05)。结论IVF与ICSI两组的妊娠结局、围生儿结局相似;ICSI不增加胎儿畸形率及新生儿并发症几率,双胎妊娠是引起低体重儿、小于胎龄儿及早产的主要原因。