PFKFB3参与脂多糖诱导肺成纤维细胞及肺组织有氧糖酵解的观察性研究

目的:观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肺成纤维细胞及肺组织有氧糖酵解关键酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)表达及其与有氧糖酵解的关系,探讨在LPS诱导肺纤维化过程中肺成纤维细胞和肺组织有氧糖酵解的潜在机制。方法:将人胚肺成纤维细胞MRC-5细胞系采用随机数字表法分为PBS对照组(PBS组)和LPS组(每组3孔),Western blot检测LPS刺激细胞6h后PFKFB3表达情况,同时免疫荧光显示PFKFB3在细胞内的定位情况;于LPS刺激后48 h采用海马细胞能量代谢仪检测细胞耗氧率(oxygen consumption rate,OCR)和产酸率(extracellular acidification rate,ECAR),并采用比色法检测有氧糖酵解产物乳酸产生情况,同时Western blot检测LPS刺激48 h后Ⅰ型胶原蛋白合成情况。将24只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组(C组)、LPS组(L组),每组12只,L组、C组连续5d分别腹腔注射5 mg/kg LPS、等容量生理盐水;每组各6只于造模后第7天无痛处死小鼠,取血浆和肺组织,Western blot和免疫荧光检测各组肺组织中PFKFB3表达情况,比色法检测各组小鼠血浆中乳酸的含量;剩余小鼠于造模后第28天取肺组织,一侧肺通过Western blot检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白合成情况,另一侧肺做石蜡切片进行病理学检测。结果:与PBS组比较,LPS刺激细胞6h后PFKFB3表达明显升高(P<0.05);LPS刺激细胞48 h后,与PBS组比较,LPS组细胞耗氧率降低、产酸率增加,代谢产物乳酸含量明显升高(P<0.05),同时细胞Ⅰ型胶原蛋白合成显著增加(P<0.05)。与C组比较,L组小鼠腹腔注射LPS 7 d后肺组织中PFKFB3表达明显升高(P<0.05),血浆乳酸含量明显升高(P<0.05);LPS注射28 d后,L组小鼠Ⅰ型胶原蛋白表达明显升高(P<0.05),肺组织出现明显纤维化。结论:在LPS诱导的肺纤维化过程中,LPS可诱导肺成纤维细胞和肺组织中PFKFB3蛋白表达,该过程与其有氧糖酵解过程相关,PFKFB3的表达上调可能是LPS诱导肺成纤维细胞和肺组织有氧糖酵解和肺纤维化的关键环节。     

寰枢关节半脱位的诊断与治疗

寰枢关节半脱位是骨折常见疾患之一，因解剖结构特殊一旦患病危害性及潜在危害性极大，临床诊疗较为棘手。近年来随着对本病解剖学、生物力学上认识的深入，诊疗手法和手段不断完善，疗效逐步提高。笔者从事基层医疗卫生工作，就其诊断与治疗提出一些认识。     

妊娠期高血压疾病胎儿纤维连接蛋白及人绒毛膜促性腺激素的定量变化

目的探讨妊娠期高血压疾病(HDCP)中胎儿纤维连接蛋白(fetal fibronectin,FFN)及血清人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)定量的变化,为临床治疗提供更有效的试验依据。方法 2010年1月至2011年1月在中山大学附属中山市人民医院利用前瞻性对照研究方法,采用酶联免疫吸附法检测妊娠期高血压疾病组(HDCP组38例,其中妊娠期高血压患者12例,轻度子痫前期患者15例,重度子痫前期患者11例)及正常妊娠组(45例)孕16～20周、24～28周、32～36周时FFN及血β-HCG定量。对照组(健康未孕的育龄期女性50例)于常规检查时抽血检测以上两值。结果对照组FFN均值为(225±76)mg/L;正常妊娠组在孕20周前与对照组比较FFN差异无统计学意义(P>0.05);孕24周后比较FFN差异有统计学意义(P<0.05),且有随孕周增加而逐渐升高的趋势;HD-CP组与对照组及同孕周正常妊娠组比较FFN差异均有统计学意义(P<0.05),且与病情进展程度及孕周增加情况呈一致性。对照组血β-HCG均为0;HDCP组中血β-HCG定量与同孕周正常妊娠组比较,孕16～20周时差异无统计学意义(P>0.05),孕24周后差异有统计学意义(P<0.05),且与病情进展程度及孕周增加情况呈一致性。结论孕早期孕妇联合检测FFN及血β-HCG定量对HDCP特别是重度子痫前期具有重要的预测价值,并可减少子痫前期的发生率。     

乳酸-转化生长因子-β1途径促进肺成纤维细胞活化介导机械通气相关性肺纤维化的机制研究

目的探讨机械通气促进肺成纤维细胞活化及肺纤维化的机制,明确乳酸-转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)途径在该过程中的作用。方法①将C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术组(Sham组)和机械通气组(MV组),每组12只,其中Sham组仅行麻醉插管处理并保持自主呼吸,MV组采用20 ml/kg潮气量和70次/min通气频率行单次2 h机械通气,观察7 d后取材。采用H-E染色、Masson染色观察肺组织的损伤程度和纤维化程度,采用Western blot法检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白α1链(collagen typeⅠalpha 1 chain,COL1A1)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和TGF-β1的蛋白表达情况,采用比色法检测小鼠肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)和血清的乳酸浓度。②将人胚肺成纤维细胞MRC-5采用随机数字表法分为4组(每组3个孔):PBS对照组(Con组)、1 mmol/L乳酸组(Lac1组)、10 mmol/L乳酸组(Lac_(10)组)和20 mmol/L乳酸组(Lac_(20)组),于乳酸刺激MRC-5细胞24 h后采用ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1含量,同时采用细胞免疫荧光观察α-SMA的表达情况;于乳酸刺激MRC-5细胞72 h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况,并通过ELISA法检测细胞培养上清液Ⅰ型前胶原羧基肽(procollagen type I carboxyl peptide,PICP)的含量变化。③另取MRC-5细胞采用随机数字表法分为3组(每组3个孔):PBS对照组(Con组)、20 mmol/L乳酸组(Lac_(20)组)和20 mmol/L乳酸+TGF-β1受体抑制剂(SB431542)组(Lac_(20)+SB组),处理24 h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况。结果①与Sham组比较,MV组小鼠肺泡间隔增厚、胶原蛋白沉积、肺纤维化程度加重,伴有COL1A1、α-SMA和TGF-β1表达水平升高(P<0.05),血清和BALF乳酸浓度升高(P<0.05)。②与Con组比较,Lac_(10)组和Lac_(20)组细胞培养上清液中TGF-β1、PICP含量升高(P<0.05),细胞中COL1A1和α-SMA表达水平升高(P<0.05),免疫荧光观察到α-SMA在细胞内表达增多(P>0.05)。③与Lac_(20)组比较,Lac_(20)+SB组细胞COL1A1和α-SMA表达水平降低(P<0.05)。结论机械通气可以通过乳酸-TGF-β1途径活化肺成纤维细胞,引起胶原蛋白分泌,促进机械通气相关性肺纤维化进程。     

人附睾上皮分泌蛋白4联合糖链抗原125检测对卵巢癌诊断价值的初步探讨

目的 探讨人附睾上皮分泌蛋白4(HE4)对卵巢癌的诊断价值,及其与糖链抗原125(CA125)联合检测对其诊断价值的比较.方法 用ELISA试剂盒检测58例卵巢癌患者、41例其他妇科肿瘤患者和41例健康女性血清中的HE4和CA125水平.结果 卵巢癌患者组的HE4水平明显高于妇科其他肿瘤组和健康对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);单独检测HE4的ROC曲线下面积为91.4%,灵敏性和特异性分别为75.0%和97.5%;单独检测CA125的ROC曲线下面积为77.3%,灵敏性和特异性分别为71.2%和77.5%;二者联合检测时ROC曲线下面积为92.5%,灵敏性和特异性分别为78.8%和97.5%.结论 HE4的灵敏性和特异性均优于CA125,二者联合检测特异性无明显改变,但提高了检测的灵敏性,HE4对卵巢癌的诊断价值优于单独CA125检测.     

胎膜早破对母儿结局的分析

目的探讨胎膜早破对孕产妇及其新生儿结局的影响.方法对我院2004年1月至12月住院分娩的胎膜早破病历进行回顾性分析.结果住院分娩2918例的孕产妇中有397例单胎头位妊娠发生胎膜早破,占13.6%.其中孕产妇发生感染率为3.53%(14/397),感染部位以生殖道为主,占34.2%(6/13).难产率56%(222/397),其中包括阴道助产和剖宫产.新生儿感染率为3.02%(12/397),感染部位以下呼吸道为主.占52.13%(6/12).结论胎膜早破是造成孕产妇感染和难产及新生儿感染的高危因素,孕周越小、破膜时间越长对母儿结局的影响越大.     

中药周期疗法联合针灸治疗盆腔瘀血综合征30例临床观察

目的:运用中药周期疗法的基本原理,参考月经周期的不同阶段,观察中药周期疗法联合针灸疗法治疗盆腔瘀血综合征的临床疗效.方法:治疗组30例周期内服用药,经前后期联合针灸治疗共奏补气活血、活血化瘀之效.对照组30例则给予10%葡萄糖250ml加丹参注射液20ml,静脉注射1次/日;给予安定2.5～5mg,谷维素20mg,3次/日.每8天为1个疗程.结果:治疗组疗效明显优于对照组,两组比较有非常显著性差异(P＜0.01).结论:中药周期疗法联合针灸治疗盆腔瘀血综合征疗效较好,值得临床推广使用.     

龙胆泻肝汤治疗皮肤科疾病医案6则

龙胆泻肝汤最早出自李东垣《兰室秘藏》,后世应用的多是《医方集解》龙胆泻肝汤,由龙胆草、黄芩、栀子、泽泻、生地黄等组成,是主治肝胆实火上炎证和肝经湿热下注证的方剂.《医方集解·泻火之剂》载:"治肝经实火湿热、胁痛耳聋,胆溢口苦,筋痿阴汗,阴肿阴痛,白浊溲血."方中龙胆草大苦大寒,泻肝胆实火,利肝经湿热为君;臣以黄芩、栀子...