中药何首乌饮对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白bcl-2,bax表达的影响

目的通过测定不同剂量的中药何首乌饮含药血清作用后的大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡相关基因bcl-2、bax的蛋白表达及caspase-3活性,探讨何首乌饮对卵巢自身功能的影响。方法制备排卵前卵巢模型,收集颗粒细胞分别与雌性SD幼鼠空白血清及含不同剂量何首乌饮的药物血清在体外共同培养,Western blotting检测GC内凋亡相关基因bcl-2、bax的蛋白表达情况;分光光度法检测颗粒细胞内caspase-3活性。结果何首乌饮含药血清可上调颗粒细胞bcl-2蛋白表达,下调bax蛋白表达,中、高剂量组何首乌饮含药血清与对照组比较,可明显上调bcl-2蛋白表达(P均<0.01),中、高剂量组何首乌饮含药血清与对照组比较,明显下调bax蛋白表达(P均<0.01)。何首乌饮含药血清可下调颗粒细胞caspase-3活性,中、高剂量何首乌饮含药血清组与对照组比较有显著性差异(P均<0.01)。结论何首乌饮增加GC内凋亡抑制蛋白bcl-2表达及减少凋亡促进蛋白bax表达的作用,可能是其抑制GC凋亡,防止卵泡闭锁的作用途径之一;同时何首乌饮可能是在凋亡的较早阶段,通过阻断caspase-3的级联裂解即可开始起效,而发挥凋亡抑制作用。     

不同来源精子行卵胞浆内单精子注射临床妊娠结局分析

目的探讨不同来源精子对卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗后妊娠结局的影响。方法回顾性分析因男性因素行ICSI的不育患者835例的859个助孕周期,根据精子来源不同分A组即射精精子组699周期,B组即经皮附睾精子抽吸术(PESA)组114周期,C组即睾丸精子抽吸术(TESA)组46周期。结果 (1)A、B、C三组正常受精(2PN)率分别为:82.4%、76.2%、71.8%,A组最高,即射精组PESA组TESA组,B、C组与A组比较有显著性差异(P0.05);A、B、C三组卵裂率分别为:98.6%、97.6%、98.3%,B组与A组比较有显著性差异(P0.05),而C组与A组比较无显著性差异(P0.05)。(2)A、B、C三组可利用胚胎率、优质胚胎率比较无显著性差异(P0.05)。(3)A、B、C三组着床率分别为32.5%、37.7%、41.7%,三组比较无显著性差异(P0.05)。(4)A、B、C三组妊娠率分别为50.8%、56.1%、60.9%,三组比较无显著性差异(P0.05)。结论不同来源精子行ICSI,对受精率有影响,但三组都可获得相似的可利用胚胎、优质胚胎,应用射精精子以及PESA、TESA精子行ICSI都能获得较好的妊娠结局。     

影响冻融胚胎移植成功因素的分析

目的探讨冻融胚胎移植妊娠成功的影响因素。方法对2007年1月至2008年3月在本生殖医学中心进行冻融胚胎移植215周期进行回顾性分析。结果（1）冻融胚胎移植215周期,胚胎存活率76．8％（664／865）,周期临床妊娠率38．1％（82／215）,种植率21．6％（122／566）,流产率20．7％（17／82）。（2）人工周期和自然周期的冻融胚胎移植妊娠率、种植率分别为43．7％、34．1％和25．O％、19．3％,人工周期较自然周期偏高,但差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）不同的子宫内膜厚度对冻融胚胎妊娠结局的影响：A、B2组的临床妊娠率、种植率间差异无统计学意义（P〉0．05）。（4）患者年龄对冻融胚胎妊娠结局的影响：t〉35岁妊娠率、种植率显著降低,与其他2组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。（5）复苏胚胎细胞存活状况对冻融胚胎妊娠结局的影响：3组比较,A组既细胞完整组妊娠率、种植率最高,3组两两比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论（1）根据FET患者情况,采用个体化方案,可采用自然周期或人工周期,尽量调整子宫内膜在8～15mm,均能取得较好妊娠率和种植率。（2）冻融胚胎复活率不受年龄的影响,FET患者年龄≥35岁妊娠率、种植率显著降低。（3）解冻后胚胎质量是冻融胚胎成功的关键。     

卵胞浆内单精子显微注射后三原核合子发生相关因素及妊娠结局分析

目的探讨卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)后的三原核(3PN)合子发生的相关因素及对妊娠结局的影响。方法对2007年1月至2008年12月在河北医科大学第二医院生殖医学中心行ICSI的287个周期进行回顾性分析。将周期分为2组,A组:至少有1个以上的3PN发生。B组:无3PN的发生。比较两组的年龄、促性腺激素(Gn)用量、雌二醇峰值、获卵数、单精子注射卵数、取卵至ICSI时间、不正常卵子率、精子质量、双原核合子率、种植率、妊娠率、流产率等。结果 A组和B组Gn用量、雌二醇峰值、获卵数、单精子注射卵子数和双原核合子率分别为[(28.45±8.68)支对(33.66±14.02)支,75U/支]、[(10203.04±3402.97)pmol/L]对[(8649.27±3870.19)pmol/L]、[(17.09±8.58)枚对(11.34±6.52)枚]、[(13.61±7.49)枚对(9.26±5.41)枚]、[(66.85±18.69)%对(77.39±19.31)%],差异有统计学意义(P<0.05)。两组种植率、妊娠率、流产率差异无统计学意义。结论卵巢对Gn刺激的高反应所造成的部分卵子质量或内部结构的...     

常规体外受精后未见原核胚胎的相关因素分析及临床价值探讨

目的探讨常规体外受精(IVF)后的未见原核(0PN)合子发生的相关因素及0PN来源胚胎的利用价值。方法对2013年1月至2016年12月在河北医科大学第二医院生殖医学科行常规IVF 10 834个周期进行回顾性分析。(1)将周期分为两组,A1组:存在1个或以上0PN;A2组:无0PN。比较A1、A2两组的临床、实验室指标及新鲜移植周期的妊娠率、流产率、活产率、胎儿畸形率。(2)以每周期0PN的发生率为应变量,回归分析0PN周期产生的相关因素。(3)将新鲜移植周期按移植胚胎来源分为3组,B1组:均为0PN胚胎,B2组:0PN+双原核(2PN)胚胎,B3组:均为2PN胚胎。比较B1、B2、B3 3组的临床、实验室及妊娠结局。结果 (1)A1组与A2组比较,年龄低[(30.3±4.5)岁vs.(30.6±4.7)岁]、刺激周期数少[(1.1±0.6)个vs.(1.2±0.6)个]、基础卵泡刺激素(FSH)低[(8.4±2.2)U/L vs.(8.8±1.6)U/L]、周期获卵数多[(11.2±5.7)枚vs.(10.1±5.7)枚],hCG注射日血清雌二醇(E2)高[(11 482.0±1219.5)pmol/L vs.(10 556.4±1330.4)pmol/L],差异有统计学意义(P<0.05)。(2)患者年龄(r=0.858,P<0.001)、刺激周期数(r=0.892,P<0.05)、基础FSH(r=0.768,P<0.001)、获卵数(r=2.602,P<0.001)及hCG注射日血清E2(r=2.714,P<0.001)与0PN的发生率显著相关。(3)B1组、B2组、B3组种植率分别为16.0%、27.5%、32.0%,妊娠率分别为19.8%、41.6%、47.4%,流产率分别为23.5%、23.5%、15.4%,活产率分别为14.0%、31.8%、39.8%,3组比较差异均有统计学意义,且B3组种植率、妊娠率和活产率明显高于B1、B2组,流产率明显低于B1、B2组(P<0.05)。结论常规IVF后0PN合子形成可能与卵巢储备功能较好有关,而0PN来源卵裂期胚胎在无2PN可利用胚胎的情况下具有一定的移植价值,但是应该充分告知并知情同意。     

染色体结构异常PGT周期中囊胚评估参数与其整倍体率的相关性

目的研究染色体结构异常患者胚胎植入前遗传学检测(PGT)周期中囊胚评估参数与其整倍体率的相关性。方法回顾性分析2019年1月至2020年6月在河北医科大学第二医院生殖医学科因夫妇双方或一方染色体结构异常行PGT的83例患者(97个周期)的相关资料,将所有患者按照一般情况、周期基本情况以及活检囊胚情况进行逐层分组,比较各亚组囊胚的PGT检测结果,分别采用周期特征性分析、广义评估方程GEE模型和分类决策树模型分析囊胚的整倍体率与周期特征、囊胚活检时的发育天数、囊胚扩张程度、内细胞团(ICM)级别、滋养层细胞(TE)级别的相关性。结果共活检371枚囊胚,其中整倍体囊胚154枚(41.51%),非整倍体囊胚217枚(58.49%)。(1)周期基本特征统计分析显示:女方18.5≤BMI<24 kg/m²组其囊胚整倍体率(48.37%)显著高于BMI<18.5 kg/m²(23.81%)组和BMI≥24 kg/m²(36.14%)组(P<0.05);平衡易位患者囊胚整倍体率(31.88%)显著低于罗氏易位(52.85%)和倒位(56.10%)患者(P<0.05);Gn使用总量<2250 U组囊胚整倍体率(50.00%)显著高于2250~3000 U组(38.06%)和>3000 U组(34.15%)(P<0.05);活检第5天(D5)囊胚的整倍体率(53.53%)显著高于D6(31.96%)和D7(14.29%)(P<0.05);ICM、TE评级为A级的囊胚整倍体率(67.74%、70.00%)显著高于B级(39.02%、46.98%)和C级(39.62%、36.32%)(P<0.05)。(2)广义评估方程GEE模型分析显示:囊胚发育天数[OR=4.400,95%CI(1.553,12.465)]、囊胚扩张程度[OR=0.344,95%CI(0.128,0.928)]是整倍体率的独立影响因素;而女方年龄、男方年龄、女方体重指数、获卵数、MⅡ卵数、基础激素水平、促排卵情况、囊胚ICM/TE等级等与其整倍体率无关(P>0.05)。(3)分类决策树模型显示共生成3组节点:第1组节点为染色体结构异常类型,倒位及罗氏易位患者的整倍体率显著高于平衡易位患者(χ²=19.164,P<0.001);第2组节点为活检囊胚发育天数,D5的囊胚整倍体率显著高于D6和D7囊胚(χ²=10.824,P=0.003);第3组节点为染色体结构异常来源于男方/女方,倒位及罗氏易位男方核型异常患者囊胚整倍体率显著高于女方核型异常患者(χ²=5.552,P=0.018),但平衡易位女方核型异常患者囊胚整倍体率显著高于男方核型异常患者(χ²=5.320,P=0.021),交叉验证正确百分比64.2%。结论囊胚的整倍体率与囊胚的发育速度即活检时囊胚发育天数和扩张程度显著相关,而与ICM/TE评级无显著相关性。染色体结构异常的类型和患者性别与囊胚的整倍体率亦存在一定的相关性。     

何首乌饮含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞端粒酶活性的影响

目的观察不同剂量的中药何首乌饮对大鼠卵巢颗粒细胞端粒酶活性的影响,探讨其在调节卵泡微环境过程中所起的作用。方法制备大鼠排卵前卵巢模型,收集颗粒细胞(GC)分别与雌性SD幼鼠空白血清及含不同剂量何首乌饮的药物血清在体外共同培养。用TRAP-ELISA方法分析GC的端粒酶活性;运用流式细胞术分析GC凋亡、坏死情况。结果各剂量组何首乌饮含药血清可明显上调GC端粒酶活性,与对照组比较,中、高剂量何首乌饮含药血清能够显著提高GC端粒酶活性(P均<0.05)。随着中药血清药物剂量的增加,颗粒细胞凋亡率逐渐下降,与对照组比较,中、高剂量组何首乌饮含药血清均能够显著降低离体GC的凋亡率(P均<0.01),各含药血清组细胞坏死率虽较对照组高,但与各组比较差别无统计学意义。结论何首乌饮通过上调离体培养的大鼠卵巢GC端粒酶活性、抑制凋亡从而对卵泡局部微环境的调节,可能是其调节下丘脑-垂体-卵巢轴的重要靶点之一。     

过夜培养对早卵裂期冻融胚胎移植妊娠结局的影响

目的:探讨过夜培养对早卵裂期冻融胚胎移植(FET)妊娠结局的影响。方法:回顾性分析2015年1月至2016年12月在河北医科大学第二医院行FET的3443例患者(4294周期)的临床资料,患者年龄≤38岁、移植胚胎数为2胚、子宫内膜在8~15 mm,按解冻后培养时间的不同将患者分为:过夜培养组(解冻后培养26~27小时后移植,共693周期)和短时培养组(解冻后培养4~6小时解冻日移植,共3601周期),比较以上两组患者的妊娠结局。结果:(1)过夜培养组和短时培养组FET患者的临床妊娠率分别为51.23%(355/693)和55.60%(2002/3601),异位妊娠率分别为1.13%(4/355)和3.05%(61/2002),差异有统计学意义(P0.05),而两组种植率、多胎率、流产率差异无统计学意义(P0.05)。(2)在全胚冷冻行首次FET患者中,两组临床妊娠率、种植率、流产率、异位妊娠率差异均无统计学意义(P0.05),过夜培养组的多胎率57.35%(39/68)高于短时培养组44.30%(400/903),差异有统计学意义(P0.05)。(3)在FET≥3次患者中,两组患者的临床妊娠率、胚胎种植率、流产率、异位妊娠率、多胎率差异均无统计学意义(P0.05)。结论:早卵裂期胚胎解冻后过夜培养移植的妊娠结局并不优于解冻日移植,且过夜培养并不能改善多次FET失败患者的妊娠情况,同时全胚冷冻行首次FET的患者过夜培养仅使多胎妊娠有所增加,可以行单胚胎移植,以避免多胎妊娠发生。