染色体结构异常PGT周期中囊胚评估参数与其整倍体率的相关性

目的研究染色体结构异常患者胚胎植入前遗传学检测(PGT)周期中囊胚评估参数与其整倍体率的相关性。方法回顾性分析2019年1月至2020年6月在河北医科大学第二医院生殖医学科因夫妇双方或一方染色体结构异常行PGT的83例患者(97个周期)的相关资料,将所有患者按照一般情况、周期基本情况以及活检囊胚情况进行逐层分组,比较各亚组囊胚的PGT检测结果,分别采用周期特征性分析、广义评估方程GEE模型和分类决策树模型分析囊胚的整倍体率与周期特征、囊胚活检时的发育天数、囊胚扩张程度、内细胞团(ICM)级别、滋养层细胞(TE)级别的相关性。结果共活检371枚囊胚,其中整倍体囊胚154枚(41.51%),非整倍体囊胚217枚(58.49%)。(1)周期基本特征统计分析显示:女方18.5≤BMI<24 kg/m²组其囊胚整倍体率(48.37%)显著高于BMI<18.5 kg/m²(23.81%)组和BMI≥24 kg/m²(36.14%)组(P<0.05);平衡易位患者囊胚整倍体率(31.88%)显著低于罗氏易位(52.85%)和倒位(56.10%)患者(P<0.05);Gn使用总量<2250 U组囊胚整倍体率(50.00%)显著高于2250~3000 U组(38.06%)和>3000 U组(34.15%)(P<0.05);活检第5天(D5)囊胚的整倍体率(53.53%)显著高于D6(31.96%)和D7(14.29%)(P<0.05);ICM、TE评级为A级的囊胚整倍体率(67.74%、70.00%)显著高于B级(39.02%、46.98%)和C级(39.62%、36.32%)(P<0.05)。(2)广义评估方程GEE模型分析显示:囊胚发育天数[OR=4.400,95%CI(1.553,12.465)]、囊胚扩张程度[OR=0.344,95%CI(0.128,0.928)]是整倍体率的独立影响因素;而女方年龄、男方年龄、女方体重指数、获卵数、MⅡ卵数、基础激素水平、促排卵情况、囊胚ICM/TE等级等与其整倍体率无关(P>0.05)。(3)分类决策树模型显示共生成3组节点:第1组节点为染色体结构异常类型,倒位及罗氏易位患者的整倍体率显著高于平衡易位患者(χ²=19.164,P<0.001);第2组节点为活检囊胚发育天数,D5的囊胚整倍体率显著高于D6和D7囊胚(χ²=10.824,P=0.003);第3组节点为染色体结构异常来源于男方/女方,倒位及罗氏易位男方核型异常患者囊胚整倍体率显著高于女方核型异常患者(χ²=5.552,P=0.018),但平衡易位女方核型异常患者囊胚整倍体率显著高于男方核型异常患者(χ²=5.320,P=0.021),交叉验证正确百分比64.2%。结论囊胚的整倍体率与囊胚的发育速度即活检时囊胚发育天数和扩张程度显著相关,而与ICM/TE评级无显著相关性。染色体结构异常的类型和患者性别与囊胚的整倍体率亦存在一定的相关性。     

玻璃化冷冻卵子解冻后ICSI的妊娠结果相关因素

目的探讨玻璃化冷冻的成熟卵母细胞解冻受精移植后,患者的临床因素或卵母细胞冻融过程中的实验室因素对妊娠结局的影响。方法对2012年5月至2018年3月在河北医科大学第二医院生殖医学科接受卵子冷冻,并随后行卵子解冻的90个周期进行回顾性分析。按照妊娠结局分为妊娠组和未妊娠组,比较两组患者卵子冷冻周期的临床指标和实验室指标及其与冻融过程参数的相关性。结果 (1)妊娠组和未妊娠组的女方年龄[(28.10±4.90)vs.(32.40±5.90)]、不孕年限[(4.50±3.50)vs.(6.80±3.60)]、雌二醇峰值[(14 598.60±5 181.67)pmol/L vs.(9 392.81±6 868.41)pmol/L]、获卵数[(21.70±14.80)vs.(12.10±10.90)]、成熟卵数[(19.50±13.10)vs.(11.00±10.80)]差异均有统计学意义(P0.05);(2)妊娠组和未妊娠组脱颗粒至冷冻时间(T2)分别为(2.82±1.25)h和(3.66±1.06)h,差异有统计学意义(P0.05);妊娠组和未妊娠组卵子解冻周期的卵子存活率[(98.54±2.86)%vs.(84.24±30.38)%]、正常受精率[(89.91±11.00)%vs.(70.07±32.77)%]、优胚数[(3.90±2.60)vs.(1.60±2.00)]、优胚率[(52.25±20.57)%vs.(31.06±34.96)%]、移植胚胎评分[(8.55±2.02)vs.(5.50±2.19)],差异均有统计学意义(P0.05);(3)取卵至脱颗粒时间(T1)与脱颗粒至冷冻时间(T2)呈负相关(r=-0.615,P=0.000),与取卵至冷冻时间(T3)呈正相关(r=0.615,P=0.000);T1与优胚数、优胚率呈正相关(r=0.351,P=0.021;r=0.302,P=0.049);T2与卵子存活率、优胚数、优胚率呈负相关(r=-0.378,P=0.010;r=-0.469,P=0.002;r=-0.423,P=0.005);T3与卵子存活率呈负相关(r=-0.325,P=0.029);解冻至ICSI时间(T4)与正常受精率呈负相关(r=-0.313,P=0.041)。结论卵子冷冻周期女方年龄及成熟卵数对卵子解冻周期的妊娠结局有重要影响。适当延长取卵至脱颗粒时间、缩短脱颗粒至冷冻时间可能通过使卵胞质进一步成熟、降低脱颗粒后卵子老化程度来提高卵子解冻存活率及发育潜能。     

过夜培养对早卵裂期冻融胚胎移植妊娠结局的影响

目的:探讨过夜培养对早卵裂期冻融胚胎移植(FET)妊娠结局的影响。方法:回顾性分析2015年1月至2016年12月在河北医科大学第二医院行FET的3443例患者(4294周期)的临床资料,患者年龄≤38岁、移植胚胎数为2胚、子宫内膜在8~15 mm,按解冻后培养时间的不同将患者分为:过夜培养组(解冻后培养26~27小时后移植,共693周期)和短时培养组(解冻后培养4~6小时解冻日移植,共3601周期),比较以上两组患者的妊娠结局。结果:(1)过夜培养组和短时培养组FET患者的临床妊娠率分别为51.23%(355/693)和55.60%(2002/3601),异位妊娠率分别为1.13%(4/355)和3.05%(61/2002),差异有统计学意义(P0.05),而两组种植率、多胎率、流产率差异无统计学意义(P0.05)。(2)在全胚冷冻行首次FET患者中,两组临床妊娠率、种植率、流产率、异位妊娠率差异均无统计学意义(P0.05),过夜培养组的多胎率57.35%(39/68)高于短时培养组44.30%(400/903),差异有统计学意义(P0.05)。(3)在FET≥3次患者中,两组患者的临床妊娠率、胚胎种植率、流产率、异位妊娠率、多胎率差异均无统计学意义(P0.05)。结论:早卵裂期胚胎解冻后过夜培养移植的妊娠结局并不优于解冻日移植,且过夜培养并不能改善多次FET失败患者的妊娠情况,同时全胚冷冻行首次FET的患者过夜培养仅使多胎妊娠有所增加,可以行单胚胎移植,以避免多胎妊娠发生。     

胚源性IL-1β与人类胚胎发育及种植的关系

目的探讨胚胎培养液中胚胎分泌的白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）水平与胚胎发育及植入潜能的关系。 方法选取首次行卵胞浆内单精子显微注射－胚胎移植（intracytoplasmic sperm injection-embryo transfer,ICSI-ET）手术的新鲜周期不孕患者80例,胚胎在体外采用单液滴单胚胎培养,在取卵受精后第3天进行胚胎移植,且移植胚胎数量均为2枚。收集新鲜周期移植胚胎相对应的卵裂期培养液微滴,采用酶联免疫吸附试验测定其上清的IL-1β水平。根据每周期胚胎种植率,将入组患者分A组43例（种植率为0%）、B组27例（种植率为50%）、C组10例（种植率为100%）。比较3组主要临床资料与胚胎实验室相关参数、在移植胚胎培养液中分泌的IL-1β水平、移植胚胎形态学累积评分;分析IL-1β水平、移植胚胎形态学累积评分之间的相关性。 结果80例患者中临床妊娠37例,临床妊娠率为46.3%,其中单胎妊娠27例,双胎妊娠10例。3组主要临床资料与胚胎实验室相关参数差异均无统计学意义（P＞0.05）。B组移植胚胎卵裂期培养液中IL-1β水平高于A组,C组高于A组和B组,差异有统计学意义（P＜0.05）。3组移植胚胎形态学累积评分差异无统计学意义（P＞0.05）。IL-1β水平与胚胎形态学累积评分呈正相关（r=0.587,P＜0.05）。 结论胚胎培养过程中胚胎分泌的内源性IL-1β与胚胎发育及植入存在密切相关性,其对胚胎的评估以及早期胚胎干预的研究可提供参考意义。     

体外受精-胚胎移植中生长激素在子宫内膜异位症患者中的作用

［摘要］ 〖HTH〗目的〖HTSS〗〖KG*2〗探讨生长激素（growth hormone,GH）在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)患者中的意义及其对卵巢黄素化颗粒细胞凋亡的影响。 〖HTH〗方法〖HTSS〗〖KG*2〗选择进行体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET）助孕的EMs不孕患者（EMs组）40例,单纯输卵管因素不孕患者（对照组）40例,比较2组实验室指标及妊娠结局;放射免疫分析法检测2组取卵当日血清、卵泡液GH水平,密度梯度法提取颗粒细胞体外培养贴壁后,免疫细胞化学检测2组患者Bcl-2、Bax蛋白表达水平;将贴壁后EMs患者颗粒细胞按干预方式分为空白组和GH组,免疫细胞化学检测Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。 〖HTH〗结果〖HTSS〗〖KG*2〗EMs组血清、卵泡液GH水平和颗粒细胞Bcl-2表达水平低于对照组,EMs组Bax表达水平高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。GH组较空白组Bcl-2表达水平升高,Bax表达水平下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。 〖HTH〗结论〖HTSS〗〖KG*2〗EMs患者的低GH水平可能引起颗粒细胞凋亡增加,从而影响卵母细胞质量及胚胎的发育潜能。一定浓度的GH可能改善EMs患者颗粒细胞凋亡状态。