芪归合剂促进肾病综合征鼠肝IGF-Ⅰ、IGFBP-3表达的研究

目的观察芪归合剂对肾病综合征鼠(NS鼠)胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的作用.方法制备大鼠阿霉素NS模型,设正常对照组、NS组、NS蒸馏水治疗组和NS芪归合剂治疗组,每组5只大鼠.以放射免疫法和免疫放射法测定各组血、尿IGF-Ⅰ和IGFBP-3水平;用RT-PCR法检测肝IGF-ⅠmRNA、IGFBP-3mRNA表达;测量鼠的身长、体重和血生化指标.结果NS组鼠体重增长[(47±34)g/4周]、身长增长[(2.6±0.8)cm/4周]、血IGF-Ⅰ[(491±66)μg/L]、IGFBP-3[(102±4)μg/L]低于正常鼠组[分别为(162±19)g/4周、(8.1±1.5)cm/4周、(968±184)μg/L、(133±16)μg/L],尿IGF-Ⅰ[(264±119)ng/24h]高于正常鼠组[(59±16)ng/24h],而肝IGF-ⅠmRNA表达(0.52±0.04)与正常对照组(0.53±0.06)相似、IGFBP-3mRNA表达(0.56±0.05)低于正常鼠组(0.93±0.05).芪归合剂治疗组肝IGF-ⅠmRNA表达(0.93±0.05)、IGFBP-3mRNA表达(0.87±0.05)高于NS蒸馏水治疗组.结论NS鼠存在IGF-Ⅰ、IGFBP-3代谢紊乱和生长障碍,血IGF-Ⅰ降低主要是由于尿中排出所致,而血IGFBP-3降低主要与合成减少有关.芪归合剂能增加NS鼠肝IGF-ⅠmRNA、IGFBP-3mRNA表达.     

胞内钙离子浓度与咖啡因保护小脑颗粒神经元作用的关系

用凝胶电泳和fura-2荧光技术测定［Ca²⁺］_i方法研究咖啡因对低钾诱导的大鼠小脑颗粒神经元凋亡的保护作用与［Ca²⁺］_i升高之间的关系. 将体外培养的小脑颗粒神经元从高钾（25 mmol·L^-1 KCl）培养基中转移到低钾（5 mmol·L^-1 KCl）培养基中,神经元发生凋亡. 但低钾引起的神经元死亡可被咖啡因（5-20 mmol·L^-1）浓度依赖性地保护,且咖啡因的这种作用不受蓝尼定(ryanodine) 敏感钙释放阻断剂蓝尼定和丹曲林(dantrolene)的影响;也不被Ｌ-型钙通道阻断剂硝苯地平, 尼莫地平, 维拉帕米和NMDA受体阻断剂地佐环平抑制. 结果说明［Ca²⁺］_i的升高并不是咖啡因对小脑颗粒神经元的保护作用所必需的.     

黑海参多糖对β-淀粉样蛋白诱导的皮质神经元凋亡的保护作用

体外培养大鼠皮质神经元,用β－淀粉样蛋白（β－ＡＰ）诱导皮质神经元凋亡。黑海参多糖使皮质神经元存沃经增加,使神经元的ＤＮＡ电泳图谱不出现“梯子状”,使神经元的流式细胞仪分析图上不出现凋亡峰,表明黑海参多糖对β－ＡＰ诱导的皮质神经地凋亡具有保护作用。     

核因子-κB在狼疮肾炎肾组织中的表达及其意义

目的了解狼疮肾炎(LN)肾组织中核因子(NP)-κB的表达并探讨其与LN肾脏病理改变和肾功能损害的关系.方法以NF-κB亚基P65单抗为抗体,采用微波免疫组织化学染色(APAAP法)检测LN肾组织NF-κB表达,并进一步分析其与肾小球内C-myc蛋白表达、LN活动指数、肾脏病理和功能损害的关系.结果狼疮肾炎肾组织中NF-κB表达较正常肾组织显著增高,以WHOⅣ型为最显著.NF-κB在肾小球和肾小管均有表达,但小管表达更显著.LN肾组织NF-κB阳性细胞数与肾小球C-myc蛋白表达量、肾组织活动指数、肾脏病理改变和肾功能损害显著相关.结论NF-κB可能参与了LN的发病机制,肾组织中NF-κB的表达可作为反映狼疮肾组织活动病变和进行性肾损害的参考指标.     

SB203580对小脑颗粒神经元的保护作用

目的 :研究特异性p3 8分裂原激活的蛋白激酶 (MAPK)抑制剂SB2 0 3 580对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的作用及机制。方法 :体外神经元培养、凝胶电泳和SAPK/JNK分析盒测定JNK(c Jun氨基末端激酶 )活性。结果 :低钾 (KCl 5mmol/L)培养基诱导小脑颗粒神经元的具有典型形态学和生化特征的凋亡。但是 ,特异性的p3 8MAPK抑制剂SB2 0 3 580通过抑制凋亡 ,而促进低钾环境中培养的小脑颗粒神经元的存活。此保护作用具有浓度依赖性。培养于低钾环境中的神经元 ,其c Jun的表达和磷酸化水平升高 ,且激活了JNK的活性。当小脑颗粒神经元生长在含SB2 0 3 580 2 5μmol/L的低钾培养基中 ,c Jun的表达、磷酸化水平和JNK的活性都明显的降低。结论 :SB2 0 3 580可能通过抑制JNK的活性 ,降低c Jun的磷酸化水平而对低钾培养的小脑颗粒神经元具有保护作用。     

咖啡因对谷氨酸诱导神经元凋亡的保护作用

目的　研究咖啡因对谷氨酸诱导的神经元凋亡是否具有保护作用,并对其机制进行探讨。方法　采用ＤＮＡ凝胶电泳分析及Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８核染色方法进行凋亡分析;使用荧光指示试剂Ｆｕｒａ ２检测单细胞内游离钙浓度变化。结果　谷氨酸可诱导小脑颗粒神经元凋亡,咖啡因能拮抗谷氨酸的这一效应,其ＩＣ５０为５－０ｍｍｏｌ·Ｌ－１。咖啡因的这一保护作用不能被ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ模拟,也不能被Ｒｐ ｃＡＭＰ阻断。此外,内质网Ｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体阻断剂ｄａｎｔｒｏｌｅｎｅ也不能取消咖啡因的保护作用,咖啡因不影响谷氨酸诱导的钙超载。结论　咖啡因对谷氨酸诱导的神经元凋亡具有保护作用,这一保护作用与咖啡因升高细胞内ｃＡＭＰ和Ｃａ２＋水平的药理作用无关。     

黑海参多糖对β-淀粉样蛋白诱导的皮质神经元凋亡的保护作用

体外培养大鼠皮质神经元 ,用β-淀粉样蛋白 (β- AP)诱导皮质神经元凋亡。黑海参多糖使皮质神经元存活率增加 ,使神经元的 DNA电泳图谱不出现“梯子状”,使神经元的流式细胞仪分析图上不出现凋亡峰 ,表明黑海参多糖对 β- AP诱导的皮质神经元凋亡具有保护作用。     

胞内钙离子浓度与咖啡因保护小脑颗粒神经元作用的关系(英文)

用凝胶电泳和 fura- 2荧光技术测定 [Ca2 + ]i方法研究咖啡因对低钾诱导的大鼠小脑颗粒神经元凋亡的保护作用与 [Ca2 + ]i 升高之间的关系 .将体外培养的小脑颗粒神经元从高钾 ( 2 5mmol· L-1KCl)培养基中转移到低钾 ( 5mmol· L-1KCl)培养基中 ,神经元发生凋亡 .但低钾引起的神经元死亡可被咖啡因 ( 5- 2 0 mmol· L-1)浓度依赖性地保护 ,且咖啡因的这种作用不受蓝尼定 ( ryanodine) -敏感钙释放阻断剂蓝尼定和丹曲林 ( dantrolene)的影响 ;也不被 L-型钙通道阻断剂硝苯地平 ,尼莫地平 ,维拉帕米和 NMDA受体阻断剂地佐环平抑制 .结果说明 [Ca2 + ]i 的升高并不是咖啡因对小脑颗粒神经元的保护作用所必需的 .     

Alpha-DHEC神经保护作用依赖核因子Kappa B的激活

目的　探讨α-二氢麦角隐亭(alpha-DHEC)的神经保护作用与核因子Kappa B(NF-κB)激活的相关性。方法　采用大鼠大脑中动脉闭塞诱导神经元凋亡,用迁移率改变法(EMSA)检测NF-κB活性,流式细胞仪(FCM)和TUNEL法检测神经元凋亡。结果　脑缺血1,3,6和12 h均伴有NF-κB激活,其中以缺血3 h尤为显著。100 μg.kg^-1和150 μg.kg^-1的alpha-DHEC预防给药均可明显抑制缺血3 h诱发的神经元凋亡,当用PDTC选择性阻断NF-κB活性后,alpha-DHEC的神经保护作用明显减弱。结论　alpha-DHEC的神经保护作用可能依赖NF-κB的激活。