DNA防龋疫苗联合蛋白质疫苗诱导小鼠免疫应答的研究

目的:研究以一种新型免疫策略即追加相应蛋白质抗原来加强免疫DNA疫苗的免疫效果。方法:重组质粒pCIA-P经鼻腔滴注途径免疫小鼠,并以其相应抗原rPAc蛋白或rPAc蛋白及黏膜佐剂rCTB经鼻腔滴注加强免疫,ELISA法检测血清和唾液中特异性抗体水平。结果:以rPAc蛋白或rPAc蛋白及黏膜佐剂rCTB加强免疫可显著提高唾液中IgA型特异性抗体和血清IgG型特异性抗体水平。并且以rPAc蛋白和黏膜佐剂rCTB加强免疫组产生了最高水平的唾液IgA型特异性抗体和血清IgG型特异性抗体。结论:DNA防龋疫苗联合蛋白质疫苗可有效增强DNA防龋疫苗免疫效果。     

协同信号分子在DNA疫苗免疫中的作用

DNA疫苗接种后抗原提呈和T细胞活化所涉及的细胞和分子成分尚不清楚，协同信号分子在其中起重要的作用。采用共传递编码协同信号分子和编码特异抗原的基因，是一种有效的增强DNA疫苗免疫效果的方法。深入了解协同信号分子在DNA疫苗免疫中的作用，对揭示DNA疫苗作用机制和免疫佐剂增强免疫反应的作用机制有重要意义。     

奥丽汀健齿露对定菌鼠龋齿发生的影响

目的:探讨奥丽汀健齿露对龋齿的预防作用,建立防龋食品功能性评价方法。方法:采用变形链球菌(S.matans8148)、茸毛链球菌(S.Sobrinus6715)以及上述两种菌混合物定菌SPF级W istar大鼠,给予致龋饲料建立三种龋损模型,观察各组大鼠磨牙患龋情况,参照Keyes经典计分标准进行龋齿计分。并采用所建立的三种龋损模型观察奥丽汀健齿露对大鼠龋损的影响。结果:三种定菌方式致龋性不同:动物感染茸毛链球菌者比感染变形链球菌者龋齿计分低,差异有显著性(P<0.01),混合定菌大鼠龋齿计分比变形链球菌低,而比茸毛链球菌者高,差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。与相应的对照组比较,实验组定菌大鼠的Dx、Dm、D s值显著降低(P<0.01)。结论:奥丽汀健齿露能够有效地抑制龋病的发生和发展。     

AddaVax经不同免疫途径对防龋疫苗的佐剂效应

目的：研究3种不同免疫途径下,防龋亚单位疫苗联合AddaVax佐剂接种小鼠所产生的免疫效果。方法：以rPAc与AddaVax混合物经鼻腔滴注、颊黏膜下注射及颈背部皮下注射等3种途径免疫小鼠,并以rPAc行鼻腔滴注免疫,ELISA法检测血清和唾液中的特异性抗体水平。结果：rPAc＋AddaVax皮下及颊黏膜下注射方式均可显著提高小鼠血清中抗PAcIgG水平;rPAc＋AddaVax颊黏膜下注射方式可有效提高小鼠唾液中抗PAcIgA水平。结论：rPAc与AddaVax联合经皮下及颊黏膜下注射方式可有效提高防龋疫苗的免疫效果。     

不同血液净化模式对急性肾损伤患儿血清β2微球蛋白的清除效果及安全性研究

目的 探讨不同血液净化模式对急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患儿血清β2微球蛋白(β2-microglulin,β2-MG)的清除效果和安全性研究.方法 收集2011年3月至2013年3月收治于贵阳市儿童医院肾脏免疫科和儿童重症监护病房(PICU)行血液净化治疗98例次的小儿AKI的患者38例.其中男20例,女18例,年龄5个月～14岁.其中持续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT) 66例次[包括连续性静-静脉血液透析(continuous veno-venous hemofiltration,CVVH)及连续性静-静脉血液透析滤过(continuous veno-venous hemodiafiltration,CVVHDF)],间歇性血液透析(intermittent hemodialysis,IHD) 32例次.原发性疾病:循环障碍7例,各种肾毒性药物及毒物中毒10例,脓毒症伴多器官衰竭9例,肾脏实质性疾病如肾病综合征、链球菌感染后肾小球肾、狼疮性肾炎、急进性肾炎等12例.依据不同血液净化方式分为CRRT组和IHD组,其中CRRT组上机治疗8 ～16h,IHD组治疗2.5～3h.评价患儿血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(serum creatinine,SCr)及水电解质酸碱平衡、β2-MG等.结果 AKI行血液净化治疗共38例98例次,其中CRRT组(包括CVVH、CVVHDF) 66例次,IHD组32例次.进展至终末期肾病需长期维持透析治疗2例(占5％),病死率0. (1) CRRT组治疗前后血BUN、Scr分别为[(22.34 ±2.08) mmol/L,(12.24 ±0.98) mmol/L]、[(310.23 ±85.34) μmol/L、(178.15 ±34.12) μmol/L],差异有统计学意义(t=12.39,t=5.906,P均＜0.05);IHD组冶疗前后血BUN、Scr分别为[(23.80±2.14) mmol/L,(7.39±0.88) mmol/L]、[(350.11±78.42) μmol/L,(108.20 ±28.20) μmol/L],差异有统计学意义(t =29.04,t=13.83,P均＜0.05);(2) CRRT组及IHD组β2-MG清除率分别为(40.50±7.20)％、(1.50±0.05)％,CRRT组β2-MG清除效果优于IHD组,差异有统计学意义(P＜0.05);(3) CRRT组中不良反应出现少,患儿安全性较IHD为高.结论 CRRT对小儿急性肾损伤具有清除血清β2-MG好、血流动力学稳定等特点,是治疗小儿急性肾损伤的一种快速、有效和安全的方法.     

EGCG和黄芩苷协同mTOR依赖性抑制小鼠牙周炎巨噬细胞M1向极化

目的:初步探究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)和黄芩苷(baicalin)是否有协同治疗小鼠牙周炎的作用及其机制.方法:将C57/BL6小鼠随机分为空白对照组、牙周炎组、EGCG组、EGCG+黄芩苷组.苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察牙周组织学改变和牙槽骨丧失量(alveolar bone loss,ABL);抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察破骨细胞数目;免疫组织化学法观察总巨噬细胞、各亚型巨噬细胞数和哺乳动物雷帕霉素靶向蛋白(mTOR)的表达.结果:丝线结扎联合局部接种牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)成功诱导小鼠实验性牙周炎.单独使用EGCG或联合使用黄芩苷减轻牙周组织炎症,减少破骨细胞数量和牙槽骨吸收量,减少牙周组织总巨噬细胞、M1型巨噬细胞数量及M1/M2比例,抑制牙周组织mTOR的表达.且EGCG和黄芩苷联合使用比单独使用EGCG效果好.结论:EGCG和黄芩苷可以协同治疗小鼠牙周炎,可能与下调mTOR信号通路抑制巨噬细胞M1向极化有关.     

FimH重组蛋白的原核表达及纯化

目的：在大肠杆菌中构建并表达3种FimH重组蛋白,并对FimH重组蛋白的培养条件进行优化,制备高纯度FimH重组蛋白。方法：采用原核表达载体pET28a构建出能表达FimH的重组质粒,并分别对诱导温度、IPTG浓度、诱导时间等条件进行优化,以提高重组蛋白的产量和增大其可溶性,最后以亲和层析分离纯化3种FimH重组蛋白。结果：成功构建出表达大肠杆菌（K12,BL21）和沙门氏菌（S．T．）FimH的原核表达载体pET28a—K12／BL21／S．T．,经酶切、测序和WesternBlot鉴定,目的蛋白表达正确。在适当浓度的IPTG诱导,15℃震荡培养20h,可使FimH的表达量达到最大,分离纯化的蛋白在SDS—PAGE中显示为一条带。结论：本研究构建以3种FimH为表面呈现系统的表达载体,3种FimH基因和预测蛋白结构略有差异。本研究为后续研究3种蛋白生物活性差异及其靶向M细胞的免疫佐剂活性提供物质基础。     

CS-160型高速涡轮牙钻机故障检修一例

针对高速涡轮牙钻机在教学使用中出现的一次压缩机卡缸故障,进行分析和检修,总结设备损坏的原因和设备使用及操作的注意事项。     

防龋DNA疫苗免疫效能评价中间接ELISA检测的建立和验证

目的：建立血清样本特异性抗体检测的间接ELISA方法,应用于龋齿DNA疫苗特异性抗体效力检测。方法：通过棋盘滴定确定样本检测条件建立血清特异性抗PAc抗体间接ELISA方法,并对所建立的方法进行特异性和精密度验证。结果：确定包被PAc蛋白浓度为10mg/L,酶标抗体工作浓度1∶5000,样本稀释倍数1∶200。方法的重复性检测表明,板间和板内误差小于15%;中间精密度高、中、低3个浓度的CV值小于15%。结论：该方法特异性强,具有良好的重复性和中间精密度,可用于防龋DNA疫苗免疫效能评价中血清样本特异性抗PAc抗体的检测。