条件培养对骨髓间质干细胞体外成骨潜能的影响

目的:骨髓间质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)有多种分化的潜能,但其分化并非是一个完全自发的过程,探讨使用条件培养基对MSCs体外成骨潜能的影响,为优化骨组织工程的种子细胞提供实验依据。方法:采用条件培养(A组)与完全培养(B组)基两种方法将兔骨髓间质干细胞进行体外培养后,对各组细胞进行形态学观察、组织学检测以及采用碱性磷酸酶(ALP)与骨钙素检测试剂盒进行定量分析,以判断两种培养基对骨髓间质干细胞体外成骨能力的影响。结果:在细胞传代培养中A组细胞增殖速度明显低于B组。A组细胞随培养时间的延长细胞呈多层生长,不发生接触抑制现象。而B组随时间的延长,细胞间逐渐出现接触抑制,细胞分裂停止,逐渐死亡。ALP含量A组为(8.17±0.61)U/L,B组为(5.07±0.49)U/L。骨钙素含量A组为(25.38±1.06)μg/L,B组为(14.37±1.71)μg/L,A,B两组比较差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:体外培养的MSCs具有一定的成骨能力,使用含有地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的条件培养基可以大大提高其成骨能力。     

骨髓基质细胞复合人脱细胞骨的成骨活性

背景:寻找一种既保持支持功能良好又具有一定成骨活性的同种异体骨是治疗骨缺损的重要研究课题。以往曾对比测定脱细胞骨的生物力学性质,发现其与正常大小的新鲜骨质在最大抗压力,压强方面无显著性差异。人脱细胞骨复合骨髓基质细胞后的成骨活性如何,是否能够保持成骨的活性是临床医生非常关心的问题。目的:研究人脱细胞骨复合经诱导的骨髓基质细胞的实验效果,观察细胞的黏附和生长情况,并对其成骨活性进行检测。设计:单一样本实验。单位:哈尔滨医科大学附属第二医院。材料:实验于2003-01/2004-08在哈尔滨医科大学附属第二医院实验中心完成。脱细胞骨(取新鲜尸体髂骨块,自愿捐献)。方法:用过氧化氢和乙醚去除人髂骨块内的结缔组织和细胞成分,消毒后制备人脱细胞骨。取材活体或新鲜尸体的骨髓行骨髓基质细胞培养,细胞纯化后加入β-甘油酸钠,地塞米松和抗坏血酸等向成骨方向诱导,并进行对照培养。通过碱性磷酸酶和骨钙素检测来确定骨髓基质细胞的增殖和分化情况,将诱导的骨髓基质细胞浓缩后复合到制备好的脱细胞骨块内进行培养。8d后通过光镜和电镜等形态学观察以及生化指标检测来确定细胞的成骨活性。主要观察指标:①人骨髓基质细胞/脱细胞骨复合物碱性磷酸酶和骨钙素检测结果。②人骨髓基质细胞/脱细胞骨复合物组织学观察结果。结果:①人髂骨块细胞清除干净,骨基质保存良好。②诱导8d后的骨髓基质细胞碱性磷酸酶和骨钙素含量明显高于对照组[诱导后骨髓基质细胞:(181.54±40.01)nkat/L,(7.2±1.3)μg/L,对照组:无法测到,P<0.05]。③骨髓基质细胞在人脱细胞骨支架内附着紧密,生长良好。结论:人脱细胞骨复合经诱导的骨髓基质细胞在体外具有有效的成骨功能,是一种较为理想的骨组织工程材料。     

小儿继发性肠套叠的病理与诊断

近 2 0年我们三家医院共手术治疗小儿肠套叠 5 32例 ,经手术证实套入部有器质性病变的 87例 ,本文探讨套叠部大体病理解剖与临床症状的关系 ,分析了术前诊断困难的原因 ,提出了疑诊要点与诊查手段。临床资料本组 87例 ,男 48例 ,女 39例。 5个月～ 2岁 15例 ,3～ 7岁 43例 ,8～ 13岁2 9例 ,平均年龄 5 .5岁。以呕吐、腹痛、果酱样便典型急性肠套叠症状就诊的5 7例 ,其中 41例采用空气或水灌肠套叠整复 ,7例获得复位 ,但其中 5例在不同时期再发套叠 ,有 2例反复 3次再发套叠。表现为进食后腹胀、腹痛、慢性、不全性肠梗阻症状而就诊的 11例 ,…     

一穴肛合并短囊袋状结肠1例

一穴肛合并短囊袋状结肠１例韩福友，张旗涛，孙岩，李昭铸，管声扬患儿：女，１６个月。生后无肛门，阴道排尿、排便至今。无排便困难及腹胀，便柱成人拇指粗，稀便时完全失控，排成形便时亦有污裤现象。尿失禁，长期湿裤，但尚有成泡尿。患儿曾几次因患急性尿路感染，而...     

访问美国医学院校侧记

为了探讨医学教学改革和发展的道路 ,我校在 CMB资助下 ,组成美国医学教育考察小组 ,访问了美国五所著名院校 ,了解了美国医学教育教学改革与发展、教学管理方式、教学方法、学生和医生的培养程序 ,在诸多方面都有较大收获 ,深有感触。一、美国医学教育的一般情况美国的医学教育是西方医学教育的典型代表 ,是一种比较成功和有特色的教育模式。美国现有医学院 12 5所 ,大部分归属于综合性大学 ,平均每所医学院每年招生 130人左右 ,在校学生 40 0～ 5 0 0人左右。报考医学院的考生一般要完成 4年理工科大学本科的学习 ,医学院独立进行新生录…     

摔伤 腹痛 呕吐 血便

患儿 :男 ,7岁。于 2 0 0 1年 10月 2 3日 10时 ,患儿在旋转跑动中摔倒在地 ,当即出现腹部剧痛 ,2ｍｉｎ后疼痛缓解从地面爬起。此后 ,表现为持续性腹部隐痛 ,阵发性绞痛 ,发作时疼痛难忍 ,弯腰、曲膝时哭闹不安。每次绞痛发作持续 2～ 5ｍｉｎ ,间隔 10ｍｉｎ～ 1ｈ不等。伤后 3ｈ出现呕吐症状 ,当天呕吐 3次 ,皆为胃内容物。第 2ｄ出现频繁呕吐 ,约 10余次 ,且为淡黄绿色胆汁样液体 ,曾几次饮水后即吐出。伤后第 2ｄ在当地医院就诊 ,诊断不明 ,而转本院。就诊时呕吐已停止 ,诊断不明 ,而来我院。就诊时呕吐已停止 ,主要表现为阵发性腹痛 ,…     

小儿椎管内血管瘤的病理与诊治

我院１９８３～１９９８年共手术治疗小儿椎管内血管瘤６例,其中原发性椎管内血管瘤５例,继发于竖脊肌的海绵状血管瘤经椎间孔突入硬膜外腔的１例。根据本组病例并结合文献,探究诊断和治疗方法。临床资料６例发病年龄、部位及病理诊断见表１。例１：因血管瘤自发破裂,形成硬膜外血肿出现截瘫后来我院治疗,脊髓造影见蛛网膜下腔梗阻。术中见硬膜外血肿５．０ｍｌ,血肿块周围有数条迂曲、扩张的静脉。例２：胸背部无规律隐痛３个月,下肢无力１周,ＣＴ扫描报告为硬膜外肿瘤,手术所见有较完整的包膜性肿块,破溃后见有陈旧性静脉血溢出…     

儿童骨髓基质细胞体外培养

目的 探讨儿童骨髓基质细胞体外培养条件,为儿童骨组织工程研究选择种子细胞。方法 将儿童髂骨内骨髓分别采用密度梯度离心法和全骨髓法培养,待细胞长满培养瓶后传代,选取正常生长骨髓基质细胞第3代绘制生长曲线并测定细胞内骨钙素(OCN)及培养液中碱性磷酸酶(ALP)含量。培养期间用倒置相差显微镜观察细胞形态。结果 原代儿童骨髓基质细胞呈长梭形、三角形或多角形,存在有集落样生长特性,传代后细胞形态无明显变化,且生长、增殖稳定,细胞内OCN及培养液中ALP含量在1周左右达到高峰。结论 采用密度梯度离心法和全骨髓法获得儿童骨髓基质细胞,经培养、传代后,可以得到大量稳定增殖的骨组织工程种子细胞。     

股直肌远端转移在脑瘫患儿膝关节功能重建中的应用

改善脑瘫患儿行走功能的一个重要问题是重建膝关节的屈伸功能。强直膝或蹲位步态常常造成走路疲劳，严重影响患儿行走匹离和生活质量。传统的软组织松解术以胞绳肌腱松解延长来校正伸膝功能，容易造成膝关节过伸和步态跨步早期的屈膝障碍，而膝关节的动态活动范围并未得到改善[1]。Perry[2]根据步态分析的结果提出在胭绳肌松解的同时，应解除股直肌的痉挛，并将其远端转移到膝关节后方，使此肌肉既能屈伪，又能在跨步时屈膝，有助于将尼抬高地面，增加膝关节的动态活动范围。本人将在巴西SARAH医院研修期间行股直肌远端转移术重建膝关节…     

V形皮瓣龟头成形术在尿道下裂治疗中的应用

目的 寻找一种尿道下裂治疗中防止砂成形术后尿道外口狭窄的方法。方法 １１例阴茎阴囊型或阴囊型先天性尿道下裂患儿，在行阴囊纵隔岛状皮瓣尿道成形术中应用了“Ｖ”形皮瓣龟头成形术，术后对排尿情况和尿道外口大小进行了随访和测量。结果 在１－３．５年的随访中，除１例在原尿道外口处有轻度狭窄外，其余均未见有龟头末端尿道外口狭窄，而且尿流通畅。结论：“Ｖ”形皮瓣龟头形术是一种防止尿道重建后尿道外口狭窄的有效方法