肾氨基酸代谢与蛋白质的动力学控制

成人机体内肾脏蛋白质的含量和肾脏大小保持着十分恒定的状态 ,表明肾内蛋白质的合成与分解受到严格的调控。但有关人体肾脏蛋白质的调控机制尚未完全清楚。肾脏内蛋白质的代谢可受多种因素的影响 ,如肾氨基酸的来源、激素或生长因子、酸碱平衡、肾功能改变以及出现伴随进行性肾单位减少的肾损伤。氨基酸合成肾蛋白质的来源有多个方面。一方面 ,氨基酸可由动脉血进入肾细胞 ;另一方面 ,也可以来自经肾小球滤过和重吸收的低分子量蛋白质的降解。因此肾的质量不仅取决于从血中所获得的游离氨基酸 ,还取决于经肾脏滤过及降解的蛋白质。人体的肾…     

CTX-M-38型β-内酰胺酶的克隆与表达

目的构建新型β-内酰胺酶CTX-M-38的表达载体。方法应用PCR扩增CTX-M-38基因全长编码序列,经NdeI、XhoI酶切后连接至pET-26b(+)表达载体,重组质粒经酶切及DNA测序确证后,转入大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。超声破碎法提取表达蛋白产物,检测其活性,等电聚焦电泳检测蛋白的等电点(pI)。结果PCR扩增获得894bp的产物,重组表达载体经NdeI、XhoI酶切及DNA测序后表明,目的基因已成功接入表达载体,重组菌的粗提物经头孢硝噻吩检测显示具有β-内酰胺酶活性,显示载体[pET-26b(+)/CTX-M-38]构建成功。蛋白pI为8.4。结论β-内酰胺酶CTX-M-38在原核表达细胞中实验了基因重组表达,为进一步分析酶的特性提供条件。     

大鼠脑梗死早期星形细胞胶质化及其与神经营养因子的关系

目的 探讨星形南细胞（ＡＳ）在脑梗死早期的变化及与神经营养因子的关系。方法 运用免疫组织化学技术检测Ｍｉｄｋｉｎｅ（ＭＫ）、星形胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）的动态变化。结果 梗死后１天，梗死边缘开始表达ＧＦＡＦ。梗死后２天，ＧＦＡＰ表达达高峰。ＭＫ于梗死后１天表达，随后其阳性梗死后２￣４天表达逐步增强。结论 脑梗死早期星形胶质细胞增生可能与分泌神经营养因子及损伤后的修复有关。     

中医辨证治疗慢性肾功能衰竭57例临床观察

目的 :观察中医辨证分型治疗慢性肾功能衰竭(CRF)的临床疗效。方法 :采用中医辨证治疗和正常组对照 ,观察其疗效及血清BUN与Cr的变化。结果 :气阴两虚型、肝肾阴虚型以肾功能代偿期及氮质血症期为主 ;脾肾气(阳)虚型以氮质血症期及尿毒症期为多 ;阴阳两虚型以尿毒症期为最多。各型BUN与Cr明显高于正常组 ,而以阴阳两虚型最高 ;气阴两虚型、肝肾阴虚型、脾肾气(阳)虚型的疗效及降低BUN与Cr作用尤为显著。结论 :CRF患者各型与西医肾功能分期关系密切 ,中医辨证治疗对CRF有明显的改善作用。     

LEN-5型β-内酰胺酶基因的克隆及原核表达

目的对来自肺炎克雷伯菌临床菌株的LEN-5型β-内酰胺酶进行基因克隆和重组表达。方法从相应临床菌株提取质粒DNA;以质粒为模板,PCR扩增LEN-5基因,扩增产物经NdeI、XhoI酶切后连接至pET-26b(+)表达载体,重组质粒经DNA测序确证后,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。超声破碎法提取蛋白表达产物,头孢硝噻吩检测其活性,并检测蛋白的等电点(pI)。结果PCR扩增获得879bp的产物,DNA序列显示该片断序列与目的序列完全一致。重组表达载体经NdeI、XhoI酶切及DNA测序后表明,目的基因已成功接入表达载体,表达产物经头孢硝噻吩检测显示具有β-内酰胺酶活性,显示载体〔pET-26b(+)/LEN-5〕构建成功。表达蛋白的等电点为7.6。结论β-内酰胺酶LEN-5基因在原核细胞中完成了重组和表达,为进一步做酶动力学及酶的其他分子生物学特性研究奠定基础。     

慢性肾功能不全患者血浆IL-10、IL-6、TNFα变化与中医辨证分型的关系

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法 (ELASA)检测 57例慢性肾功能不全 (CRF)患者和正常人群对照组 2 0例血浆中IL 10、IL 6、TNFα的水平。结果 :CRF各型患者的IL 6、TNFα值均高于正常组 ,其中阴阳两虚型为显著性差异 (P <0 0 5) ;各型IL 10值均高于正常组 ,脾肾气 (阳 )虚型为显著性差异 (P <0 0 5) ,阴阳两虚型差异有非常显著性差异 (P <0 0 1)。结论 :CRF患者中医证型间存在着不同程度的细胞免疫功能失调 ,IL 10、IL 6、TNFα可作为CRF患者中医辨证的客观指标之一。     

胚胎肾发生的分子基础

近几年来，随着分子生物学的研究进展，研究者们开始以分子学机理来阐明器官发生学，将以往从形态发生学对肾脏的研究提高到了分子水平。大量的研究对一些基因在肾脏发生学及其在肾脏疾病的发生与发展中的意义进行了探讨，并对哺乳动物的肾脏发生学及信息基因破坏的方法及...     

Fas和细胞凋亡与肾脏疾病

细胞凋亡是机体维持自稳态和免疫系统正常发育的重要机制；也是肾脏发生，发育及肾脏疾病的病理损伤与修复过程中必不可少的环节，Ｆａｓ系统不仅参与肾小球损伤过程中肾细胞的凋亡，也参与急性肾移植的排斥。此外，系统性红斑狼疮及狼疮性肾炎的发展与Ｆａｓ功能缺陷相关。     

原发性高血压病患者血管紧张素转换酶的基因多态性分析

目的：采用三条引物法进行血管紧张素转换酶(ACE)基因分型，并与Rigat法进行比较，探讨ACE基因多态性与原发性高血压病(EH)之间的关系。方法：抽取外周血DNA，分别用三条引物法和Rigat法对128例EH患者进行ACE基因分型，并以150例正常人作对照组。结果：Rigat法对DD型的错判率为22．22％。正常血压人群ACE基因DD型、Ⅱ型、ID型分别有10、62、78例，占6．67％、41．33％、52％，Ⅰ和D的等位基因频率是67％、33％；原发性高血压病人群ACE基因DD型、Ⅱ型、ID型分别有14、47、67例，占10．94％、36．72％、52．34％，Ⅰ和D的等位基因频率是63％、37％。结论：ACE基因多态性与原发性高血压有一定关系。     

内收蛋白α亚单位遗传多态性与原发性高血压

人群中约30%～50%的血压变异是由遗传因素决定的〔1〕,与原发性高血压（EH）发病相关的遗传基因可能赋予个体对EH 的易感程度.目前的遗传流行病学研究提示,内收蛋白（adducin）基因可能是 EH(尤其是盐敏感性EH)的易感基因,因此该基因多态性与EH的相关性受到广泛关注.本文就内收蛋白α亚单位（α-内收蛋白）基因多态性在其与高血压及其靶器官损害的关系以及其与利尿药物的相互作用等方面的研究进行综述.