云南金铁锁的生物学特性及其保护的初步研究

对金铁锁的生物学特征、适应性及其机理进行探讨。结果表明：金铁锁具有旱生植物的结构和特征，耐旱、耐贫瘠能力较细。同时提出了相应的保护措施。为合理的开发、利用和保护金铁锁提供了依据。     

珍稀濒危药用植物金铁锁的组织培养和快速繁殖研究

金铁锁(Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu)为珍稀濒危药用植物,属国家二级保护植物,可治疗风湿痹痛,胃痛,创伤出血,跌打损伤。为有效保护其野生资源,对金铁锁进行组织培养和快速繁殖研究,以金铁锁幼嫩茎段作外植体,在MS+IAA_(0.1-1.0)+BA_(0.5-1.0)培养基上一步分化成苗;在MS+BA_(0.5-1.5)+KT_(0.1-0.5)+IAA_(0.1-0.5)+2,4-D_(0.1-0.5)+NAA_(0.1-0.5)培养基上增殖;分化出的苗在1/2MS+NAA_(0.1-0.2)+IBA_(0.1-0.2)培养基上迅速生根,生根率可达100%。为了实现金铁锁的快速增殖,使用正交实验探讨了不同生长调节物质对其增殖的影响和最佳培养条件的筛选:MS+0.5mg/L BA+0.1mg/L KT+0.1mg/L IAA+0.0mg/L NAA+0.5mg/L 2,4-D培养基,培养温度19.5±1℃,光照强度1200Lx,光照周期12小时为最优化培养条件。     

金铁锁居群繁殖生物学初步研究

云南省昆明市小墨雨调查样地的金铁锁，主要生长于以石灰岩为母岩的酸性红壤土，居群呈成群型分布。在自然条件下只以种子行有性繁殖；种子成熟散布后，随即发芽形成幼苗；幼苗可成功越冬者，经2～3年达到性成熟；每株有花序1～5条，为二或三歧聚伞花序，每花序平均有花20．64朵，仅顶花能形成果实。     

金铁锁叶绿体基因组序列及其系统发育分析

目的解析金铁锁叶绿体基因组结构和确定其在石竹科的系统位置。方法基于二代测序技术IlluminaHiseq平台,对金铁锁叶绿体基因组进行测序,使用生物信息学分析软件进行组装和注释,并以苋科植物千穗谷为外类群,通过RAxM L 8.2.11软件构建ML系统发育树,分析石竹科属间的亲缘关系。结果金铁锁叶绿体基因组总长为153977bp。LSC和SSC区被2个反向重复区域IRs隔开,其大小分别为84 385、17 526、26 033 bp。除去重复后,共编码109个基因,包含75个PCGs,30个tR NA和4个rR NA基因。总的CG含量为36.5%,IR区(42.4%)GC含量明显高于LSC(34.2%)和SSC(30.1%)区。在系统进化树中,金铁锁与长萼瞿麦互为姊妹类群,且各节点的支持率较高,能够清晰反映属间的亲缘关系。结论本研究对金铁锁叶绿体基因组结构进行了解析,并探讨了石竹科属间系统发育关系,为金铁锁种质资源综合评价、系统进化等研究提供有效的科学数据。     

金铁锁鲨烯合酶cDNA的克隆和功能鉴定

濒危药用植物金铁锁(Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu.)的有效成分三萜总皂苷有显著的药理活性。为克隆和鉴定金铁锁三萜皂苷生物合成途径中的关键酶基因——鲨烯合酶的全长cDNA，本研究采用同源兼并引物PCR和cDNA末端快速扩增(RACE)等方法克隆了其全长cDNA；结合大肠杆菌异源表达、体外酶促反应及针对产物化学结构的GC和GC-MS分析等方法鉴定了其功能。研究结果表明：金铁锁鲨烯合酶cDNA全长为1 663 bp，含有1 245 bp的开放阅读框(ORF)，编码414个氨基酸(计算分子质量为47.69 kD)，5′非编码区(UTR)和3′UTR分别为260 bp和158 bp，GenBank注册号为EF585250，与三七、人参和甘草的鲨烯合酶的氨基酸序列有较高的同源性，分别为83%、 82%和82%，而与裂变酵母、白色念珠菌和人的氨基酸序列的同源性分别只有35%、 39%和47%；表达产物具有催化两分子法呢烯焦磷酸连接成鲨烯的活性。本研究克隆和鉴定了金铁锁鲨烯合酶的全长cDNA，为金铁锁次生代谢工程研究提供了重要基础。     

金铁锁不同居群rDNA ITS序列分析

目的分析金铁锁不同居群的核糖体ITS碱基序列,为鉴别不同产地金铁锁提供分子依据.方法使用1对引物18P1和26P2进行ITS基因的PCR扩增并测序.结果12个居群金铁锁的ITS1片段长度为225~229 bp,ITS2片段长度为166~170 bp,5.8S片段长度为261~264 bp.云南昆明、丽江、个旧、鹤庆和四川盐源5个居群的ITS序列碱基完全一致,云南宣威、会泽、中甸、保山、四川木里、西藏林芝等7个居群的ITS序列则有不同的变化,碱基变异数目(包括5.8 S编码区)为1~4个.结论经过比较分析,rDNA ITS区碱基序列在分布于云南中部、四川西南端等居群与云南西部、西北端、西藏东南部、四川西南部居群具有各自相应的指纹特征,可以作为相应居群的鉴别依据.     

青阳参及其近缘种的生药学比较

目的:针对青阳参Cynanchum otophyllum Schneid.存在混淆种类的情况,对青阳参和与其相混淆的隔山消C. wilfordii(Maxim.)Hemsl.和昆明杯冠藤C. wallichii Wight进行生药学鉴别.方法:运用原植物鉴别、性状鉴别和显微鉴别方法对青阳参及其近缘种进行鉴别.结果:通过性状特征和显微组织构造比较可以区分青阳参、隔山消和昆明杯冠藤.结论:应用生药学方法可以进行青阳参及其近缘种的种间鉴别.     

民族药响铃豆的生药学研究

响铃豆为云南习用地丁——黄花地丁的品种之一,来源于豆科猪屎豆属植物响铃豆Crotalaria albida Heyne.的全草,在云南各民族中广泛应用.对其植物来源、药材性状、显微及理化鉴别特征作了初步研究,为云南地丁的品种整理研究提供了资料,并为开发利用这一民族药资源提供了理论依据.     

云南黄芪药用植物物种多样性研究

云南作为黄芪属植物的一个分布中心，具有丰富的药用植物资源，有正品黄芪２个种，代用品５个种和地方习用品１３个种，正品沙苑子１个种，代用品和地方用品各１种，本文从物种多样性方面对该药物植物进行讨论，并对其亚属，组的等级，特别是同且中的药用植物进行了研究，找出了一定规律。还介绍了几个兄弟民族对黄芪属药用植物的利用情况。     

金铁锁三个居群的随机扩增多态性DNA分析

目的：为金铁锁种质资源保护、种源质量标准研究奠定基础。方法：采用随机扩增多态性DNA(RAPD)分析方法对来自昆明、鹤庆、中甸的三个不同金铁锁Psammosilene tunicoides W.C.Wu er C.Y.Wu居群进行了居群遗传研究。结果：金铁锁居群内遗传多样性较为丰富，同时居群间有较大的分化。结论：在进行种质资源保护时，应该对其居群内和居群间的遗传多样性给予同等的重视。