不同方法转染人前列腺癌PC-3细胞pEGFP-N1基因的体外实验研究

目的:探讨转染人前列腺癌PC-3细胞pEGFP-N1基因的最佳转染方法。方法:以超声微泡造影剂、超声辐照、脂质体转染及其相互结合的方法,将质粒pEGFP-N1基因转染人前列腺癌PC-3细胞,24h后以荧光显微镜观察前列腺癌PC-3细胞中的绿色荧光蛋白表达情况,并用流式细胞仪测定转染率。结果:以超声+微泡+脂质体组基因转染效率最高,与其他组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:超声联合微泡与脂质体结合能明显提高pEGFP-N1基因在人前列腺癌细胞中的转染率,是一种较理想的基因转染方法。     

低频超声辐照联合微泡抑制裸鼠人前列腺癌移植瘤的实验研究

目的 观察低频超声(20 kHz)辐照联合静脉注射微泡造影剂SonoVue对裸鼠人前列腺癌Du145移植瘤的抑瘤效应,并探讨其可能的抑瘤机制.方法 通过细胞移植和瘤块移植方法建立24只裸鼠人前列腺癌Du145移植瘤模型,随机分为超声微泡组、单纯超声组、单纯微泡组和对照组,每组6只.超声微泡组:尾静脉注射0.2 mL SonoVue的同时对瘤体行20 kHz超声辐照,辐照强度2 W/cm2,辐照2 min;单纯超声组:尾静脉持续缓慢推注生理盐水0.2 mL,同时超声辐照2 min;单纯微泡组:尾静脉持续缓慢推注SonoVue 0.2 mL同时行假照;对照组不做任何处理.各组均隔天治疗1次,共3次.治疗后测量瘤体大小,绘制瘤体生长曲线,计算抑瘤率.首次治疗后14 d剥离瘤体,通过光镜、电镜观察肿瘤组织病理改变.免疫组织化学法观察CD34阳性染色血管,计算肿瘤微血管密度(MVD),比较各组间MVD的差异.结果 24只裸鼠均成功植瘤.治疗后超声微泡组瘤体体积明显小于其他各组(P＜0.05),抑瘤率为62.70%.HE染色观察超声微泡组瘤体组织大部分损伤坏死,电镜下超声微泡组肿瘤内微血管的内皮细胞损伤,线粒体肿大,基底膜断裂.超声微泡组瘤体内CD34阳性染色微血管数减少,其MVD值显著低于其他各组(P＜0.05).结论 20 kHz低频超声辐照联合微泡造影剂SonoVue可有效抑制裸鼠人前列腺癌移植瘤的生长,其抑瘤机制是超声空化效应破坏肿瘤的微血管.     

甲状腺滤泡癌的超声声像图特征

目的探讨甲状腺滤泡癌的超声声像图特征。方法回顾性分析经手术病理证实的36例甲状腺滤泡癌患者（微浸润型滤泡癌31例,广泛浸润型滤泡癌5例）及52例甲状腺滤泡性腺瘤患者的临床及超声声像图资料,供分析的超声声像图参数包括：肿瘤大小（最大直径）、声晕、囊性成分比例、实性成分回声类型及均匀性、钙化情况和结节个数,临床参数包括患者的年龄和性别。采用t检验（患者年龄、肿瘤最大直径）或χ2检验（囊性成分比例、声晕、实性成分回声类型及均匀性、钙化情况、结节个数和患者的性别）分析各参数在甲状腺滤泡癌和甲状腺滤泡性腺瘤间的差别。结果甲状腺滤泡癌以实性为主（100．0％,36/36）,多呈低回声（69．4％,25/36）,实性成分回声多不均匀,呈斑片状等回声及低回声相间改变（83．9％,26/32）,超过一半的滤泡癌内部及周边可见钙化灶（55．6％,20/36）,周围多表现为无明显声晕或声晕薄厚不均（69．4％,25/36）;而甲状腺滤泡性腺瘤则以囊实混合性或囊性为主（61．5％,32/52）,实性成分多呈等回声（63．5％,33/52）,内部回声多较均匀（80．8％,42/52）,伴钙化少见（7．7％,4/52）,声晕存在且多薄而均匀（86．5％,45/52）。以上特征甲状腺滤泡癌与甲状腺滤泡性腺瘤比较,差异均有统计学意义（χ2＝34．813、28．596、35．256、25．052、28．811,P均＜0．01）。甲状腺滤泡癌与甲状腺滤泡性腺瘤患者平均年龄、肿瘤最大直径比较,差异均无统计学意义（t＝0．222、－1．228,P＝0．825、0．223）。甲状腺滤泡癌患者中肿瘤最大直径＞40 mm所占比例为22．2％（8/36）、单个结节的比例为31．3％（12/24）、男性比例为25．0％（9/27）、年龄＞45岁者的比例为66．7％（24/36）,与甲状腺滤泡性腺瘤的17．3％（9/52）、21．2％（11/41）、23．1％（12/40）和71．2％（37/52）相比,差异均无统计学意义（χ2＝0．330、1．635、0．043、0．201,P均＞0．05）。结论甲状腺滤泡癌患者的超声声像图特征为肿瘤偏实性、回声较低、回声欠均匀、存在钙化以及声晕厚薄不均。     

正交设计法优化超声联合微泡诱导人前列腺癌细胞凋亡的研究

目的采用正交实验设计,探讨超声联合微泡诱导人前列腺癌细胞的凋亡的最优参数组合。方法选定超声功率、辐照时间、微泡/细胞悬液体积比三个因素,又分别按超声功率15、20、25、30 mW/cm2,辐照时间30、60、90、120 s和微泡/细胞悬液体积比10%、20%、30%、40%,每因素四个水平设定正交设计表,按正交设计表进行超声辐照,辐照后细胞继续培养24 h,用流式细胞仪进行细胞凋亡检测。结果对细胞凋亡的影响因素,超声功率>微泡/细胞悬液体积>辐照时间;各因素水平影响:超声功率:15 mW/cm2>25 mW/cm2>20 mW/cm2>30 mW/cm2,辐照时间:30 s>60 s>120 s>90 s,微泡/细胞悬液体积:20%>10%>30%>40%。结论超声联合微泡诱导人前列腺癌细胞凋亡最佳组合为超声功率15 mW/cm2,辐照时间30 s,微泡/细胞悬液体积比20%。     

高频超声诊断早期小儿肠套叠36例分析

肠套叠是儿科较为常见的急腹症,及时、准确的诊断对治疗起到至关重要的作用.     

微泡增强低频超声空化抑制裸鼠前列腺癌移植瘤

目的观察低频超声（20kHz）辐照联合静脉注射微泡造影剂SonoVue对裸鼠前列腺癌（Dul45）移植瘤的抑瘤效应,并探讨其可能的抑瘤机制。方法通过细胞移植和瘤块移植方法建立24只裸鼠前列腺癌Dul45移植瘤模型,随机分为超声微泡组、单纯超声组、单纯微泡组和对照组,每组各6只。超声微泡组：尾静脉注射0．2mLSonoVue的同时对瘤体行20kHz超声辐照,辐照强度200mW／cm2;单纯超声组：尾静脉注射生理盐水0．2mL,同时超声辐照2min;单纯微泡组：尾静脉注射SonoVue0．2mL同时行假照,各组均隔天1次,共3次,对照组不做任何处理。治疗后测量瘤体大小,绘制瘤体生长曲线,计算抑瘤率。首次治疗后14d剥离瘤体,通过光学显微镜、电子显微镜观察肿瘤组织病理改变。免疫组织化学方法观察CD34阳性染色血管,计算肿瘤微血管密度（microvesseldensity,MVD）,比较各组间MVD的差异。结果24只裸鼠均成功植瘤。治疗后超声微泡组瘤体体积均数明显小于其他3组（P〈O．05）,抑瘤率为62．7％。光学显微镜下超声微泡组瘤体组织大部分损伤坏死,电子显微镜下超声微泡组肿瘤内微血管的内皮细胞损伤,线粒体肿大,基底膜断裂。超声微泡组瘤体内CD34阳性染色微血管数减少,其MVD值显著低于其他各组。结论20kHz低频超声辐照联合微泡造影剂SonoVue可有效抑制裸鼠人前列腺癌移植瘤的生长,其抑瘤机制可能是通过超声空化效应破坏肿瘤的微血管实现的。     

低频超声联合微泡造影剂增强脂质体介导pEGFP-N1基因转染体外前列腺癌细胞

目的探讨低频超声联合微泡造影剂增强脂质体介导增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP-N1)转染前列腺癌细胞的可行性,并对超声微泡浓度参数进行优化。方法将前列腺癌PC-3细胞悬液分为空白对照组、超声组、微泡组、微泡+超声组、脂质体组、脂质体+微泡组、脂质体+超声组、脂质体+微泡+超声组,其中脂质体+微泡+超声组根据微泡体积浓度不同分为(0、10%、20%、30%、40%和50%)6个亚组。经超声辐照,24h后用荧光显微镜观察细胞中基因表达情况,并用流式细胞仪检测转染率。结果脂质体+微泡+超声组基因转染效率最高,与其他组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);在脂质体+微泡+超声亚组中,微泡浓度为20%亚组基因转染率最高。结论低频超声联合微泡能有效增强脂质体介导pEGFP-N1基因在体外前列腺癌细胞中的转染率,20%是体外基因转染前列腺癌细胞的最佳微泡浓度。     

低频超声辐照对前列腺癌细胞膜通透性影响的体外实验研究

目的探讨不同强度低频超声对前列腺癌细胞膜通透性的影响。方法应用不同声强的低频超声辐照前列腺癌PC-3细胞悬液,超声辐照5min,占空比20%。辐照后应用荧光显微镜检测FD500染色阳性率及细胞死亡率。结果 5mW/cm2组、20mW/cm2组及80mW/cm2组中细胞FD500染色阳性率分别为0.12±0.04、0.37±0.08、0.73±0.05,各组间比较均有统计学差异(P<0.05),同时随着声强增加,细胞死亡率也逐渐增加。结论低频超声能增加前列腺癌细胞膜通透性,其通透性与声强的强度有关。     

彩色多普勒超声对Budd-Chiari综合征的诊断价值

[目的]探讨彩色多普勒超声对Budd-Chiari综合征（BCS）的诊断价值。[方法]回顾分析我院2001-2006年经下腔静脉造影证实的22例BCS的彩色多普勒超声表现。[结果]15例下腔静脉膜性阻塞,5例下腔静脉血栓性阻塞,2例单纯肝静脉阻塞。彩色多普勒超声对其中21例作出正确诊断,漏诊1例,诊断符合率为95%。[结论]彩色多普勒超声可以准确诊断病变的位置、性质以及程度,而且具有无创、简便、价廉、无辐射等优势,可以作为本病的首选影像诊断方法。     

硝酸甘油诱导的偏头痛大鼠脑内Glu、NMDAR含量改变

【目的】研究硝酸甘油诱导的大鼠偏头痛与脑内兴奋性神经递质谷氨酸(Glu)及其受体N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDAR)的关系。【方法】静脉注射硝酸甘油构建偏头痛大鼠模型;应用免疫组化技术检测大鼠三叉颈复合体、三叉神经节Glu含量;应用Western-Blot检测三叉颈复合体NMDAR2B亚单位及该亚单位1472位点酪氨酸磷酸化水平。【结果】静脉注射硝酸甘油大鼠脑内三叉神经节Glu含量减少,三叉颈复合体Glu含量增加;Western-Blot表明NMDAR的2B亚单位蛋白表达在三叉颈复合体无明显变化,该亚单位1472位点酪氨酸磷酸化水平明显增高。【结论】神经传导通路兴奋性的改变可能在偏头痛病理生理发生过程中起作用。