不同方法转染人前列腺癌PC-3细胞pEGFP-N1基因的体外实验研究

目的:探讨转染人前列腺癌PC-3细胞pEGFP-N1基因的最佳转染方法。方法:以超声微泡造影剂、超声辐照、脂质体转染及其相互结合的方法,将质粒pEGFP-N1基因转染人前列腺癌PC-3细胞,24h后以荧光显微镜观察前列腺癌PC-3细胞中的绿色荧光蛋白表达情况,并用流式细胞仪测定转染率。结果:以超声+微泡+脂质体组基因转染效率最高,与其他组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:超声联合微泡与脂质体结合能明显提高pEGFP-N1基因在人前列腺癌细胞中的转染率,是一种较理想的基因转染方法。     

乏力、纳差,肝功异常,肝脏占位性病变

病历摘要 患者男,48岁,因查体发现肝功异常2 a,肝占位1 α,乏力、纳差、尿黄1个月于2005年9月23日入院.患者2 a前查体发现肝功异常,转氨酶升高(具体不详),HbsAg(+)、抗Hbe(+)和抗Hbc(+),无明显不适.     

低频低功率超声联合微泡对DU145细胞及PC3细胞早期凋亡的影响

目的比较低频低功率超声联合微泡造影剂对人前列腺癌DU145细胞与PC3细胞早期凋亡率的不同影响。方法使用低频低功率超声连续波辐照人前列腺癌DU145细胞和PC3细胞悬液60 s,实验中两种细胞系各分为4组:空白对照组(A组)、单纯微泡组(B组)、单纯超声组(C组)和超声联合微泡组(D组),辐照后细胞继续培养24 h,流式细胞仪检测细胞早期凋亡情况,透射电镜观察细胞形态改变。结果两种细胞D组的早期细胞凋亡率明显高于其余各组(P﹤0.01),C组亦均高于A组(P﹤0.05),A、B组之间差异无统计学意义;两种细胞经相同处理后,C、D组PC3细胞的早期细胞凋亡率均高于DU145细胞(P﹤0.01)。透射电镜下两种细胞D组可见癌细胞体积变小变圆,空泡增多,有明显的凋亡小体形成,PC3细胞内还可见大量的自噬体出现。结论低频低功率超声联合微泡造影剂能明显诱导人前列腺癌细胞的早期凋亡,且对PC3细胞早期细胞凋亡作用强于DU145细胞。     

低频超声联合微泡辐照增大对犬前列腺增生组织射频消融灶体积的影响

目的评估低频超声辐照犬前列腺增生组织对射频消融灶大小的影响。 方法实验犬共9只,分为3组（每组各3只）,对犬前列腺行射频消融术,实验组消融术前行低频超声辐照,对照组仅行射频消融术或仅行低频超声辐照;术后即刻行经直肠前列腺常规超声检查、超声造影及磁共振增强检查。低频超声辐照加射频消融组与仅行射频消融术的对照组的增强磁共振成像前列腺消融灶体积的比较采用t检验,低频辐照前造影剂达峰时间、曲线下面积与低频辐照比较采用配对t检验。 结果低频超声辐照后即刻超声造影显示,前列腺内造影剂达峰时间缩短,最大强度较辐照前减低,且造影剂持续时间变长,辐照后造影剂达峰时间由（28.55±10.88）s缩短至（14.81±5.15）s,差异有统计学意义（t=2.796,P=0.0189）,时间-信号强度曲线曲线下面积由（2046.56±424.66）dB s缩小至（1454.82±458.12）dB s,差异有统计学意义（t=2.32,P=0.0427）。超声造影及增强磁共振均能准确评价前列腺射频消融灶大小。实验组消融后磁共振增强图像显示实验组消融灶体积为（1.27±0.21）cm³,仅行射频消融术的对照组消融灶体积为（0.73±0.18）cm³,差异有统计学意义（t=3.382,P=0.0277）;而仅行低频超声辐照的犬前列腺未出现消融灶。 结论低频超声联合微泡辐照能有效阻断增生前列腺组织内血流灌注量,联合射频消融治疗能有效增大消融灶体积。     

他莫昔芬对人肝癌细胞增殖及ER表达影响的研究

目的:研究他莫昔芬(Tamoxifen,TAM)对入肝癌HepG2细胞增殖和HepG2细胞ER表达的影响.方法:按照TAM的浓度不同分为7.5 μmol/L、15 μmol/L、30 μmol/L 3组,对照组不加TAM,每孔加入1 ×105 mL-1细胞0.1mL,培养24、48和72 h,采用MTT法测定抑制率;细胞免疫组化染色观察TAM对肝癌细胞ER的表达的影响.结果:TAM抑制人肝癌细胞增殖及ER表达,并具有时间一浓度依赖.结论:TAM可能通过影响肝癌细胞ER的表达抑制肝癌细胞增殖.     

表皮生长因子及其受体表达与原发性肝癌的相关性探讨

目的探讨表皮生长因子（EGF）及其受体（EGFR）在肝癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化S-P法检测40例肝癌（肝癌组）、30例乙肝肝硬化（肝硬化组）及20例健康人（对照组）肝组织中EGF和EGFR表达情况。结果肝癌组EGF和EGFR阳性率显著高于肝硬化组和对照组（P〈0．01）;I期、Ⅱ期、Ⅲ期肝癌EGF和EGFR阳性率逐渐增高;Ⅱ期和Ⅲ期显著高于I期（P〈0．05）。结论EGF和EGFR在肝癌呈过表达,是肝癌发生、发展和转移的重要促进因素。     

低频超声联合SonoVue微泡促进裸鼠基因体内转染的可行性

目的 探讨利用低频超声联合SonoVue微泡造影剂促进基因转染人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤的可行性。方法 采用人前列腺癌PC-3细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤后随机分为空白组（仅注射生理盐水）、单纯质粒组（注射生理盐水和质粒混悬液）、低频超声组（注射生理盐水和质粒混悬液后超声辐照）和低频超声+微泡组（注射超声微泡造影剂和质粒混悬液后超声辐照）。超声辐照条件：功率3 W/cm²,占空比5：5,频率80 kHz,辐照10 min。基因转染3天后在激光共聚焦显微镜下观察各组绿色荧光蛋白表达情况,并分析其平均荧光强度;同时行常规病理检查,观察低频超声联合微泡辐照对组织的损伤程度。结果 4组中,仅低频超声+微泡组可见明显绿色荧光,与其他各组差异均有统计学意义（P均<0.05）;空白组、单纯质粒组和低频超声组均未见明显绿色荧光。各组均未见明显组织损伤。结论 SonoVue微泡造影剂在低频超声辐照下能够安全有效地促进pEGFP基因转染进入人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤组织内。     

细胞及瘤块种植人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤模型的比较

目的 比较细胞悬液法及瘤块法种植裸鼠前列腺癌皮下移植瘤,以期获得使瘤体生长最快,质量最佳的种植方式.方法 采用细胞悬液及瘤块两种方式种植PC-3细胞人前列腺癌皮下移植瘤,比较两种种植方法所种植的移植瘤的成瘤率、成瘤潜伏期、瘤体形态以及移植瘤的中心坏死灶,同时对两种方法种植的皮下移植瘤进行常规病理学检查.本研究同时观察了PC-3细胞悬液浓度对于种植皮下移植瘤成瘤的影响.结果 两种方式种植的移植瘤的成瘤率差异无统计学意义,采用瘤块种植的移植瘤生长较细胞种植稍快,瘤体形态各异,较容易发生中心性坏死;细胞悬液组成瘤稍慢,瘤体较规则,多呈圆形或椭圆形,发生中心性坏死较晚,而且随着细胞浓度增高,其成瘤潜伏期明显缩短.结论 通过比较发现细胞悬液种植皮下移植瘤较瘤块种植更有优势,而且采用较高浓度细胞悬液种植可以有效缩短成瘤潜伏期,是一种较为理想的种植方式.     

彩色多普勒超声对慢性肾病肾血流动力学观察

目的采用彩色多普勒超声观察慢性肾脏病不同时期,肾内各分级动脉血流动力学改变及其临床价值。方法选择慢性肾脏病患者50例,根据肾脏病理、血肌酐、尿素氮等指标进行分组,分别分为：肾病Ⅰ组、肾病Ⅱ组、肾病Ⅲ组,与正常对照组50例进行比较,应用彩色多普勒超声波诊断仪,观察肾脏体积大小,皮髓交界是否清晰,皮质回声强度及皮质厚度。测量双肾大小并观察其内部回声,彩色多普勒显示肾内各分级动脉血流充盈情况,即段动脉、叶间动脉,测量各血流参数,包括收缩期峰值流速（Vs）、舒张末期流速（Vd）、阻力指数（RI）,并相互进行对照。结果慢性肾脏病Ⅱ组及Ⅲ组肾段动脉及叶间动脉收缩期最大血流速度（Vs）、舒张期最低血流速度（Vd）及阻力指数（RI）较对照组比较,其差异显著,肾脏病理损害越严重,肾功能损害越严重,上述指标越明显。结论彩色多普勒检测能无创伤监测慢性肾脏病肾血流动力学的变化,为疾病的诊断、病情的监测与治疗效果提供重要的临床参数。