胰岛素强化治疗糖尿病合并脑梗死的临床研究

目的探讨早期胰岛素强化治疗对2型糖尿病合并老年脑梗死患者营养状况及预后的影响。方法将84例老年2型糖尿病合并脑梗死患者分为两组,两组均予胰岛素泵控制血糖。常规组(n=42)控制血糖于11.1 mmol/L以下即可,强化组(n=42),控制血糖于正常水平(3.9~6.1 mmol/L)。治疗7天后比较两组患者营养状况及预后。结果强化组的营养状况显著优于常规组(P<0.05),病死率显著低于常规组(P<0.05)。结论对于老年2型糖尿病合并脑梗死患者采取胰岛素强化治疗高血糖,不仅可以较好地控制病人血糖,还可以相应改善其营养状况,降低病人的病死率,有助于改善预后。     

蛋白酶体抑制剂对T淋巴细胞增殖活化的影响

目的：探讨蛋白酶体（proteasome）抑制剂LAC（lactacystin）和β-LAC（β-lactacystin）对外周血T淋巴细胞增殖、活化的影响。方法： 以植物血凝素（phytohemagglutinin，PHA）作为刺激剂，经流式细胞仪检测T淋巴细胞增殖（BrdU掺入率），检测CD3+CD25+/CD3+及CD3+CD69+/CD3+细胞比例, 同时用RT-PCR检测蛋白酶体11S调节蛋白PA28及细胞因子IL-2 mRNA的表达。结果： （1）对预先活化的T淋巴细胞，LAC和β-LAC降低 T淋巴细胞BrdU掺入率（P＜0.05）；（2）LAC和β-LAC不影响T淋巴细胞CD69的表达（各时点，P＞0.05），而显著抑制T细胞表面抗原CD25表达（48 h、72 h，P＜0.05）；（3）与对照组相比，LAC和β-LAC明显下调T淋巴细胞PA28、IL-2 mRNA的表达(48 h、72 h，P＜0.05)。结论： LAC和β-LAC能够显著抑制T淋巴细胞增殖，这一效应与其抑制T淋巴细胞表面早期活化抗原CD25表达,下调PA28、IL-2 mRNA的表达有关。     

环孢菌素A抑制小鼠同种心脏移植急性排斥反应中Lymphotactin表达的研究

目的：研究小鼠同种心脏移植急性排斥反应中淋巴细胞趋化因子（lptn）的表达情况及环孢菌素A（cyclosporine A, CsA）的抑制作用。 方法： 改良Banff评分系统判断同种小鼠移植心急性排斥反应程度，RT-PCR检测移植心组织内淋巴细胞趋化因子表达水平，ELISA方法检测心脏移植小鼠脾细胞活化T细胞核因子(NFAT)活性。 结果： C57BL/6-Balb/c急性排斥组小鼠移植术3 d后脾脏显著增大。术后第5、7 d移植心肌间淋巴细胞浸润程度评分分别为2.667±0.577和2.333±0.577。C57BL/6-Balb/c+CsA组小鼠移植术后脾脏肿大明显减轻，术后第5、7 d心肌间淋巴细胞浸润程度评分分别为1.000±0.000和1.333±0.577。急性排斥组和CsA处理组小鼠移植心脏在术后第5 d和第7 d都可检测到Lptn mRNA阳性表达，但CsA处理组Lptn mRNA的表达明显弱于急性排斥组。治疗剂量的CsA可以完全抑制NFATc1活性。 结论： Lptn在早期移植免疫事件中具有重要的作用，CsA仅能部分抑制Lptn mRNA的表达。活化T细胞Lptn的表达调控存在NFAT以外的途径。     

多发性脑梗塞性痴呆的病因及CT分析

目的：探讨多发性脑梗塞性痴呆（ＭＩＤ）的病因及梗塞部位;方法：回顾性分析３０例多发性脑梗塞性痴呆患者的既往史及头颅ＣＴ检查;结果：３０例多发性脑梗塞性痴呆的患者中,有２８例患者既往有高血压、脑卒中、糖尿病、心脏病房颤病史中的一种或风种,占９３．３％;有２７例患者多发性梗塞的梗塞灶涉及到基底节区、额叶、顶叶中的一种或几种,占９０．０％,其中有脑萎缩者占７０．０％,白质疏松者占２０．０％;结论：通过对多发性脑梗塞性痴呆的分析,认为高血压、脑卒中病史、糖尿病及心脏病房颤为顾因素。ＣＴ显示梗塞位于基底节、额叶、颞叶、顶叶的患者易发生痴呆,部分患者有脑萎缩或白质疏松。     

重组CTLA4Ig腺病毒对巨噬细胞活性及移植后排斥反应的抑制作用

 目的研究重组CTLA4Ig腺病毒对巨噬细胞活性及移植后排斥反应的抑制作用及其初步机制。方法采用大鼠原位肝移植模型,供体移植前7d应用重组CTLA4Ig腺病毒,移植后动态观察移植物急性排斥反应病理学分级、巨噬细胞浸润程度、细胞凋亡程度、移植物局部及受体外周血IFN-γ水平。结果应用重组CTLA4Ig腺病毒后,CTLA4Ig可以在移植肝局部稳定表达,并在移植术后3,5,7,12d各时点排斥反应病理分级、移植物局部巨噬细胞浸润和肝细胞凋亡指数均较排斥对照组显著减低(P<0.01);巨噬细胞浸润与排斥反应分级呈显著相关(r=0.696,P<0.01)。对细胞因子IFN-γ的检测表明,应用重组CTLA4Ig腺病毒后,移植物局部IFN-γmRNA和蛋白水平明显受抑制,血清IFN-γ浓度在术后5,7,12d均较排斥时照组低(P<0.01)。结论应用重组CTLA4Ig腺病毒可以抑制IYN-γ表达,抑制巨噬细胞活性,从而减缓移植后急性排斥反应,抑制肝细胞凋亡,保护移植物功能。     

小鼠肝癌树突状细胞融合瘤苗抗肿瘤作用的研究

目的 探讨小鼠肝癌树突状细胞(D C)融合瘤苗抗肿瘤作用及其机制。 方法 用聚乙二醇(P E G)法制备小鼠肝癌D C融合瘤苗;流式细胞仪检测融合细胞表型特征;体内预防试验观察融合瘤苗免疫小鼠抵抗肿瘤攻击能力,乳酸脱氢酶(L D H)法检测其诱导的杀伤性T淋巴细胞活性;体内治疗试验观察荷瘤小鼠生存期及肿瘤组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)表达。 结果 小鼠肝癌D C融合瘤苗具备D C及肝癌细胞表型特征,能抵抗H 22小鼠肝癌细胞的攻击及诱导较强的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性,DC/H22、DC H22、DC、H22各组CTL活性(A值)分别为0.624±0.014、0.330±0.014、0.262±0.019、0.246±0.017,F=65.46,P<0.01,能显著促进肿瘤组织中TNF-α、IFN—γ表达(F值分别为47.84、37.23,P值均<0.01)及延长荷瘤小鼠生存期(x2=18.45,P<0.01)。 结论 小鼠肝癌DC融合瘤苗能有效地诱导抗肿瘤免疫反应,在预防和治疗肝癌的复发及转移中有广阔的应用前景。     

TC21/R-Ras 2在肝癌中的表达、亚细胞定位及意义

目的:探讨TC21基因在肝癌细胞、肝癌及癌旁组织中的表达、亚细胞定位及意义。方法:用RT-PCR检测TC 21在肝癌细胞系及人肝癌及癌旁组织中mRNA水平的表达,用免疫组化及Western印迹检测TC21蛋白在肝癌相关组织中的表达差异,用组织芯片技术结合免疫组化检测TC21蛋白的亚细胞定位。结果:RT-PCR检测结果表明TC21 mRNA在SMMC-7721、BEL-7402、Huh-7、Hep3B、HepG2、MHCC-97L、MHCC-LM3 7个肝癌细胞系及L-02和Chang liver 2株永生化人肝细胞系、7对肝癌及对应癌旁肝组织中均有较高表达;Western印迹结果表明上述细胞系中TC21蛋白表达与mRNA表达一致,TC21在4对肝癌及癌旁组织中均呈较高水平的表达;免疫组化检测结果表明TC21在人原发性肝癌、癌旁组织、硬化肝组织与正常肝组织中的表达阳性率分别为84.2%、77.2%、41.7%、0%,肝癌与肝硬化、正常肝相比显著高表达(P<0.05,P<0.01),与癌旁组织比无统计学意义(P>0.05);统计学分析结果表明TC21蛋白表达与肿瘤大小呈正相关(P<0.05),与是否肝硬化呈负相关(P<0.05);肝癌组织中TC21主要定位于肝癌细胞核,部分定位于胞质,膜定位不明显,TC21蛋白在肝癌细胞中的核定位显著高于癌旁肝细胞(P<0.001)。结论:本研究首次揭示TC21蛋白在肝癌组织中的高表达及核定位预示其在肝细胞恶性转化及肝癌发生发展中发挥重要作用。     

纤维连接蛋白及精-甘-天冬-丝氨酸多肽对肝癌细胞化疗敏感性的影响

目的 探讨纤维连接蛋白(FN)和精-甘-天冬-丝氨酸多肽(RGDS多肽)对肝癌细胞化疗敏感性的影响.方法 将肝癌细胞株7721分为胎牛血清BSA处理组(BO组)、纤维连接蛋白FN处理组(FO组)、精-甘-天冬-丝氨酸RGDS多肽处理组(RO组)、FN+RGDS多肽共同处理组(FR组),加入不同浓度的丝裂霉素C(MMC)作用2 h、12 h和24 h,用MTT比色法检测不同时间肿瘤细胞的存活率,用荧光染色法和流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡,比较FN和RGDS对化疗作用结果的影响.结果 不同浓度MMC作用2 h后,FO组及BO组、FO组与FR组之间的存活率比较,差异无统计学意义(P＞0.05),而作用12 h、24 h后,FO组及BO组、FO组与FR组之间的存活率比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 药物作用一定时间后,FN能使MMC对肝癌细胞的促凋亡作用下降,产生药物耐受;而RGDS多肽上调肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.     

肝癌病人外周血及骨髓AFP mRNA的检测及意义

目的 通过检测AFP mRNA在肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC)病人外周血和骨髓中的表达，探讨AFP mRNA作为HCC微转移指标的可能性。方法 建立敏感的巢式逆转录聚合酶链反应体系（Nested-RT-PCR)，检测71例HCC、36例肝硬化、9例肝血管瘤、11例肝转移瘤、30例正常对照外周血AFP mRNA和19例HCC、15例血液病骨髓AFP mRNA。结果 71例HCC外周血中38例AFP mRNA表达阳性（53．5％），肝硬化、肝血管瘤、肝转移瘤和正常对照均为阴性。HCC外周血AFP mRNA检出率与血清AFP值无明显相关（P＞0．05），而与肿瘤大小、门静脉癌栓、肝内转移、肝外转移等临床参数有明显相关（P＜0．05）。19例HCC骨髓中9例AFP mRNA表达阳性（47．4％），15例血液病为阴性。骨髓AFP mRNA检出率与血清AFP值、肝内转移无明显相关（P＞0．05），与肿瘤大小、门静脉癌栓、肝外转移明显相关（P＜0．05）。外周血和骨髓AFP mRNA的表达呈一致性（P＜0．05）。结论 血循环AFP mRNA可作为CC微转移的早期检测指标。HCC病人外周血和骨髓AFP mRNA的表达与复发转移显著相关，且HCC病人外周血和骨髓AFP mRNA的表达呈一致性，联合检测有助于提高结论的可靠性。     

阿加曲班不同时间段应用对脑梗死患者的影响

目的探讨不同时间段阿加曲班治疗急性脑梗死溶栓治疗的疗效及安全性。方法 100例急性脑梗死患者按接受阿加曲班治疗时已发病时间分为三组,6 h内进行治疗为A组,24 h内进行治疗为B组,72 h内进行治疗为C组,比较三组临床疗效。结果 A组患者神经缺损评分和BI值改善明显优于其他两组,差异有统计学意义（P〈0.05）,并且A组基本治愈比例高于其他两组,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论阿加曲班治疗脑梗死在6 h内给药治疗效果最佳。