胰岛素强化治疗糖尿病合并脑梗死的临床研究

目的探讨早期胰岛素强化治疗对2型糖尿病合并老年脑梗死患者营养状况及预后的影响。方法将84例老年2型糖尿病合并脑梗死患者分为两组,两组均予胰岛素泵控制血糖。常规组(n=42)控制血糖于11.1 mmol/L以下即可,强化组(n=42),控制血糖于正常水平(3.9~6.1 mmol/L)。治疗7天后比较两组患者营养状况及预后。结果强化组的营养状况显著优于常规组(P<0.05),病死率显著低于常规组(P<0.05)。结论对于老年2型糖尿病合并脑梗死患者采取胰岛素强化治疗高血糖,不仅可以较好地控制病人血糖,还可以相应改善其营养状况,降低病人的病死率,有助于改善预后。     

小鼠肝癌树突状细胞融合瘤苗抗肿瘤作用的研究

目的 探讨小鼠肝癌树突状细胞(D C)融合瘤苗抗肿瘤作用及其机制。 方法 用聚乙二醇(P E G)法制备小鼠肝癌D C融合瘤苗;流式细胞仪检测融合细胞表型特征;体内预防试验观察融合瘤苗免疫小鼠抵抗肿瘤攻击能力,乳酸脱氢酶(L D H)法检测其诱导的杀伤性T淋巴细胞活性;体内治疗试验观察荷瘤小鼠生存期及肿瘤组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)表达。 结果 小鼠肝癌D C融合瘤苗具备D C及肝癌细胞表型特征,能抵抗H 22小鼠肝癌细胞的攻击及诱导较强的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性,DC/H22、DC H22、DC、H22各组CTL活性(A值)分别为0.624±0.014、0.330±0.014、0.262±0.019、0.246±0.017,F=65.46,P<0.01,能显著促进肿瘤组织中TNF-α、IFN—γ表达(F值分别为47.84、37.23,P值均<0.01)及延长荷瘤小鼠生存期(x2=18.45,P<0.01)。 结论 小鼠肝癌DC融合瘤苗能有效地诱导抗肿瘤免疫反应,在预防和治疗肝癌的复发及转移中有广阔的应用前景。     

疏血通联合依达拉奉治疗缺血性脑卒中临床观察

目的探讨疏血通联合依达拉奉治疗缺血性脑卒中的疗效和安全性。方法将93例缺血性脑卒中患者随机分为对照组和治疗组,对照组采取常规治疗方法,治疗组采用常规治疗方法基础上加用疏血通联合依达拉奉治疗。比较两组治疗前后疗效和血流变的变化。结果治疗组和对照组经治疗后在疗效和血流变比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论疏血通联合依达拉奉治疗缺血性脑中风疗效显著安全性好。     

纤维连接蛋白及精-甘-天冬-丝氨酸多肽对肝癌细胞化疗敏感性的影响

目的 探讨纤维连接蛋白(FN)和精-甘-天冬-丝氨酸多肽(RGDS多肽)对肝癌细胞化疗敏感性的影响.方法 将肝癌细胞株7721分为胎牛血清BSA处理组(BO组)、纤维连接蛋白FN处理组(FO组)、精-甘-天冬-丝氨酸RGDS多肽处理组(RO组)、FN+RGDS多肽共同处理组(FR组),加入不同浓度的丝裂霉素C(MMC)作用2 h、12 h和24 h,用MTT比色法检测不同时间肿瘤细胞的存活率,用荧光染色法和流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡,比较FN和RGDS对化疗作用结果的影响.结果 不同浓度MMC作用2 h后,FO组及BO组、FO组与FR组之间的存活率比较,差异无统计学意义(P＞0.05),而作用12 h、24 h后,FO组及BO组、FO组与FR组之间的存活率比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 药物作用一定时间后,FN能使MMC对肝癌细胞的促凋亡作用下降,产生药物耐受;而RGDS多肽上调肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.     

肝癌病人外周血及骨髓AFP mRNA的检测及意义

目的 通过检测AFP mRNA在肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC)病人外周血和骨髓中的表达，探讨AFP mRNA作为HCC微转移指标的可能性。方法 建立敏感的巢式逆转录聚合酶链反应体系（Nested-RT-PCR)，检测71例HCC、36例肝硬化、9例肝血管瘤、11例肝转移瘤、30例正常对照外周血AFP mRNA和19例HCC、15例血液病骨髓AFP mRNA。结果 71例HCC外周血中38例AFP mRNA表达阳性（53．5％），肝硬化、肝血管瘤、肝转移瘤和正常对照均为阴性。HCC外周血AFP mRNA检出率与血清AFP值无明显相关（P＞0．05），而与肿瘤大小、门静脉癌栓、肝内转移、肝外转移等临床参数有明显相关（P＜0．05）。19例HCC骨髓中9例AFP mRNA表达阳性（47．4％），15例血液病为阴性。骨髓AFP mRNA检出率与血清AFP值、肝内转移无明显相关（P＞0．05），与肿瘤大小、门静脉癌栓、肝外转移明显相关（P＜0．05）。外周血和骨髓AFP mRNA的表达呈一致性（P＜0．05）。结论 血循环AFP mRNA可作为CC微转移的早期检测指标。HCC病人外周血和骨髓AFP mRNA的表达与复发转移显著相关，且HCC病人外周血和骨髓AFP mRNA的表达呈一致性，联合检测有助于提高结论的可靠性。     

大鼠不同体积肝移植早期肺组织内诱导性一氧化氮合成酶的表达

目的探讨大鼠不同体积肝移植早期肺组织内诱导性一氧化氮合成酶(iNOS)的表达及意义。方法建立全肝、50%及30%体积肝移植模型,分别于术后0·5、2、6、24h处死大鼠,同时以假手术组作为对照,RT-PCR和Westernblot法检测肺组织内iNOS的表达,同时进行肺组织病理学检查。结果(1)iNOS表达:假手术组mRNA没有或微弱表达,各肝移植组表达增高,全肝移植组和50%肝移植组的表达水平在移植后6h时点均明显高于30%肝移植组(P<0·05);iNOS蛋白表达与mRNA表达基本一致。(2)病理学检查:假手术组肺组织结构基本正常,肝移植组出现肺间质明显出血充血,肺泡间隔明显增厚,中性粒细胞浸润明显,以移植后2h时点最为明显。结论肝移植早期肺组织内存在iNOS表达升高,可能与肝移植后肺损伤的发生有关,其表达高低可能与移植肝脏体积大小有关。     

蛋白酶体抑制剂对T淋巴细胞增殖活化的影响

目的：探讨蛋白酶体（proteasome）抑制剂LAC（lactacystin）和β-LAC（β-lactacystin）对外周血T淋巴细胞增殖、活化的影响。方法： 以植物血凝素（phytohemagglutinin，PHA）作为刺激剂，经流式细胞仪检测T淋巴细胞增殖（BrdU掺入率），检测CD3+CD25+/CD3+及CD3+CD69+/CD3+细胞比例, 同时用RT-PCR检测蛋白酶体11S调节蛋白PA28及细胞因子IL-2 mRNA的表达。结果： （1）对预先活化的T淋巴细胞，LAC和β-LAC降低 T淋巴细胞BrdU掺入率（P＜0.05）；（2）LAC和β-LAC不影响T淋巴细胞CD69的表达（各时点，P＞0.05），而显著抑制T细胞表面抗原CD25表达（48 h、72 h，P＜0.05）；（3）与对照组相比，LAC和β-LAC明显下调T淋巴细胞PA28、IL-2 mRNA的表达(48 h、72 h，P＜0.05)。结论： LAC和β-LAC能够显著抑制T淋巴细胞增殖，这一效应与其抑制T淋巴细胞表面早期活化抗原CD25表达,下调PA28、IL-2 mRNA的表达有关。     

环孢菌素A抑制小鼠同种心脏移植急性排斥反应中Lymphotactin表达的研究

目的：研究小鼠同种心脏移植急性排斥反应中淋巴细胞趋化因子（lptn）的表达情况及环孢菌素A（cyclosporine A, CsA）的抑制作用。 方法： 改良Banff评分系统判断同种小鼠移植心急性排斥反应程度，RT-PCR检测移植心组织内淋巴细胞趋化因子表达水平，ELISA方法检测心脏移植小鼠脾细胞活化T细胞核因子(NFAT)活性。 结果： C57BL/6-Balb/c急性排斥组小鼠移植术3 d后脾脏显著增大。术后第5、7 d移植心肌间淋巴细胞浸润程度评分分别为2.667±0.577和2.333±0.577。C57BL/6-Balb/c+CsA组小鼠移植术后脾脏肿大明显减轻，术后第5、7 d心肌间淋巴细胞浸润程度评分分别为1.000±0.000和1.333±0.577。急性排斥组和CsA处理组小鼠移植心脏在术后第5 d和第7 d都可检测到Lptn mRNA阳性表达，但CsA处理组Lptn mRNA的表达明显弱于急性排斥组。治疗剂量的CsA可以完全抑制NFATc1活性。 结论： Lptn在早期移植免疫事件中具有重要的作用，CsA仅能部分抑制Lptn mRNA的表达。活化T细胞Lptn的表达调控存在NFAT以外的途径。     

肾恶性肿瘤患者肿瘤组织端粒酶活性与其病理分级的关系

目的：探讨端粒酶活性与肾恶性肿瘤病理分级间的关系。方法：采用端粒酶－聚合酶链反应－酶联免疫吸附试验，对32份不同病理分级的肾恶性肿瘤组织、32例肿瘤旁组织和6份正常肾组织进行端粒酶活性检测。结果：32份肾恶性肿瘤组织标本端粒酶表达阳性率（81．25％）与肿瘤旁组织及正常肾组织端粒酶表达阳性率（均阴性）比较差别有显著性意义（均P＜0．01）；除1份为肾非霍奇金淋巴瘤在病理学上不分级，其余31份肾恶性肿瘤组织标本中，病理分级I级者端粒酶表达阳性率58．．33％（7／12）；病理分级Ⅱ级者端粒酶表达阳性率91．67％（11／12）；病理分级Ⅲ-Ⅳ级者端粒酶表达全部阳性（7／7），病理分级Ⅱ－Ⅳ级者端粒酶表达阳性率高于病理分级I级者（P＜0．05）。结论：肿瘤组织端粒酶活性高低与肾肿瘤恶性程度密切相关。     

小鼠二次心脏移植的研究

随着器官移植受体数量的累积 ,需要进行再次移植的患者逐渐增加。为在合适的动物模型上进行再次移植的免疫学研究 ,我们探讨建立小鼠心脏首次腹腔异位移植并二次颈部异位移植模型。一、材料与方法1.实验动物 :供受体均为健康ＩＣＲ小鼠 ,体重 2 5～ 30 ｇ ,雌雄不限。2 .手术器械 :ＳＳＷ 3型显微手术器械包 ;ＹＺ2 0Ｔ4型手术显微镜。3.小鼠二次心脏移植手术方法 :首次心脏移植手术采用腹腔异位移植 ,二次移植于首次移植术后 1周进行 ,采用颈部异位移植。供体手术 :2 0ｇ/Ｌ戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。沿腋前线剪开胸廓 ,3号针穿刺下腔静脉 ,…